Введение к работе
Актуальность исследования: нарушение функций холинергичсского отдела нервной системы лежит в основе или сопутствует возникновению многих патологических состояний, к которым можно отнести паркинсонизм (Werneck G., 1997; Яхно Н. Н., И одел ь М. Р., 2000), болезнь Лльцгсймсра (Рампі С. М., Петров А. Н., 1999; Takada-Takatori Y. ct al., 2007; Keverne J. et al., 2005), некоторые нарушения сердечного ритма (Steve В., Mark R. I)., 1999; Giessler C. et al, 1999; Xiao-Li Xu et al., 2006), язвенную болезнь (Машковский M. Д., 2005), отравления антихолинэстеразными ядами (Прозоровский В. В., Саватеев Н. В., 1976; Крылов С. С. и др., 1999; Куценко С. Л., 2004) и другие виды патологии (Fukutake Т. et al., 1993).
В связи с этим, холинергические лиганды, в частности блокагоры мускарино-вых рецепторов (синонимы: М-холинолитики, М-холиноблокаторы), находят широкое применение в качестве лекарственных средств.
Среди лекарственных средств, применяемг.гх для коррекции экстра пирамидных расстройств, важное место принадлежит препаратам, обладающим центральной хо-линоблокируюшей активностью (McEvoy J. P., 1983). Наибольшее распространение получило применение таких М-холиноблокатороп как трштексифенидил (циклодол, паркопан, апо-трайгекс), а также близких по структуре и активности препаратов — трипериден (норакин) и бипериден (акинетон). Реже используются бенактизии (амизил, актозин, и т. д.), дифенилтропин (тропацин), дексетимид (тремблекс). До 1989 года применялся отечественный препарат амедин.
В основе терапевтического действия мускарииовых антагонистов так же, как и при возникновении побочных реакций, лежит их взаимодействие со специфическими биологическими мишенями — М-холинорецепторами. Кроме того, необходимость длительного применения холинонегативных препаратов также приводит к развитию «нежелательных» эффектов. В основном, речь идет о проявлениях их периферического антихолинергического действия, В связи с этим, разработка новых лекарственных средств из указанной группы
должна быть, прежде всего, направлена на поиск веществ, обладающих высокой эффективностью, наряду с их безопасностью.
В настоящее время взгляды на использование мускариновых антагонистов в терапевтических целях претерпели существенные изменения в связи с развитием представлений о гетерогенности мускариновых рецепторов. Согласно этому представлению, мускариновые рецепторы в организме животных и человека образуют гетерогенную популяцию, состоящую из 5 генетически обусловленных подтипов. Подтипы мускариновых рецепторов отличаются химическим строением, расположением на различных частях нейрона, особенностями тканевой локализации, системой вторичных посредников и др.
Одним из путей повышения эффешшности и безопасности М-холинолити-ков явилось создание селективных антагонистов. Эта задача достаточно успешно решалась для веществ, обладающих периферическим действием. Появились высокоэффективные противоязвенное (пирензепин) и бронхолитическое (атро-вент) средства. Однако, поиск селективных центральных М-холинолитиков пока серьезных результатов не принес. Причиной этого явилась фрагментарность сведений о распространенности подтипов М-холинорецепторов в мозге и их роли в организации его работы.
Поэтому, для успешного поиска средств, обладающих необходимым профилем избирательности для лечения заболеваний, связанных с дисфункцией холи-нергической системы, необходимо изучение роли отдельных подтипов мускариновых рецепторов в механизмах развития патологии ЦНС и особенностей влияния на них потенциальных лекарственных препаратов.
Цель исследования: поиск антипаркинсонических средств из числа ацетиленовых аминоспиртов на базе изучения профиля их избирательности в отношении отдельных подтипов мускариновых рецепторов.
соединении из ряда ацетиленовых ами-предупреждать развитие экстрапирамид-
Задачи исследования:
1. Провести скрининг активности носпиртов по их способности
ных нарушений на модели нейролептического паркинсонизма
Изучить профиль фармакологической избирательности соединений из ряда ацетиленовых аминоспиртов в сравнении с М-холиноблокаторами из других химических групп в экспериментах на крысах.
Разработать способы оценки активности мускариновых антагонистов в отношении М„-холинорецепторов in vivo.
Определить роль блокады М^-холинорецепторов в нротивопаркинсони-ческой активности препаратов в опытах па крысах.
Оценить взаимодействие пентифина, соединения из ряда ацетиленовых аминоспиртов, с дофаминовыми рецепторами in vitro и in vivo.
Сопоставить антипаркиисоиичсскуіо активность М-холиноблокаторов с их влиянием на высвобождение ацетилхолина в стриатуме крыс.
Научная новизна работы:
Настоящее исследование продолжает цикл работ, направленных на поиск препаратов, предназначенных для лечения паркинсонизма, а также на выяснение механизмов их лечебного действия. Новизна определяется тем, что в ней впервые установлена роль блокады Гх/Ц-холинорецепторов в лечебном действии препаратов при экспериментальном паркинсонизме. Впервые обнаружено выраженное избирательное М^-холинолитическое действие у производных ацетиленовых аминоспиртов.
Выявлена связь между способностью соединений блокировать М^-холинорецептор и их антипаркинсонической активностью. Доказана перспективность поиска новых антипаркинсонических средств среди холинолити-ков, в частности, производных ацетиленовых аминоспиртов.
Практическая значимость работы:
В ходе проведения исследования был разработан способ оценки степени блокады холинорецепторов, принадлежащих к подтипу М4. Сочетание указанного способа с ранее разработанными приемами для оценки состояния Мг, М2- и Мз-холинорецепторов дало возможность оценить профили рецепторной избирательности ряда мускариновых антагонистов in vivo.
В ходе этих исследований были выявлены мускариновые антагонисты, проявляющие высокую избирательность в отношении М-холинорецепторов, принадлежащих к М4- и М]-подтипам. На два таких соединения получены соответствующие патенты. Кроме того, указанные соединения могут быть использованы в аналитических целях, как избирательные блокаторы М4- и Мг холиноре-цепторов. Соединения, проявляющие высокую фармакологическую избирательность по отношению к М4-подти пу, могут быть рекомендованы для дальнейшего изучения в качестве средств цля лечения паркинсонизма.
Положения, выносимые на защиту:
Соединения из химической группы ацетиленовых аминоспиртов проявляют выражешг/ю антипаркинсоническую активность.
Блокада Мгхолинорецепторов играет значимую роль в антипаркинсо-нической активности мускариновых антагонистов.
Соединение пентифин являетсл избирательным блокатором мускариновых рецепторов, принадлежащих к подтипу М4.
Апробация работы:
Основные положения работы доложены и обсуждены: на XVIII съезде физиологического общества им. И. П. Павлова, 2001; на XII Всероссийской конференции «Нейроиммунология», 2003; на 2-ом съезде токсикологов России, 2003; на конференции «Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты», 2004; на конференции «Нейрохимия: Фундаментальные и прикладные аспекты», 2005; на European Neuropsychopharmacology 8th ECNP Regional Meeting, 2005; на конференции «Нейррспецифические метаболиты и энзиматиче-ские основы деятельности центральной нервной системы», 2006; на V Международной конференции по функциональной нейроморфологии «Колосовские чтения», 2006; на Всероссийской конференции с международным участием «Структурно-функциональные и нейрохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга», 2006.
Публикации: материалы диссертации опубликованы в 19 печатных рабо-
тах, по материалам диссертации "Оформлено 2 патента на изобретение
Объем и структура диссертации: диссертация изложена на I 15 страницах машинописного текста и состоит из введения, 5 глав, заключения и выводов, иллюстрирована 5 рисунками и 15 таблицами. Указатель литературы содержит 53 отечественных и 166 иностранных источника.
