Введение к работе
Актуальность. В последнее время наблюдается все более широкое распространение смешанных инфекций. Наиболее часто возбудители выделяются в виде устойчивых ассоциаций при интраабдоминальных инфекциях (Меньшиков Д.Д., Янискер Г.Я., 1990), инфекциях мягких тканей, абсцессах и флегмонах (Georgalas C. et al., 2002; Sakae F.A. et al., 2006), инфицировании ожоговых ран (Федоровская Е.А. и др., 1984; Алексеев А.А. и др., 1998). В этиологической структуре пневмонии на долю смешанных инфекций приходится от 2 до 48% случаев заболевания (Kauppinen M.T. et al., 1995; Bartlett J.G. et al., 1998; Вишнякова Л.А., Жоголев С.Д., Мошкевич И.Р., 2001; Lim W.S. et al., 2001). Для смешанных инфекций по сравнению с заболеваниями, вызванными одним микробом, характерно более тяжелое клиническое течение, которое трудно поддается лечению и часто сопровождается различными осложнениями. С одной стороны, это связано с тем, что смешанные инфекции возникают на фоне снижения иммунитета, причиной которого являются длительное применение антибиотиков, тяжелые травмы, хирургические вмешательства и т.д. С другой стороны, причиной неудач в лечении может быть широкое распространение резистентных штаммов и, что особенно важно, неспособность антибактериальных препаратов проникать в биопленки и оказывать непосредственное воздействие на формирующие их бактерии.
За прошедшее десятилетие была доказана роль биопленок в развитии целого ряда инфекций человека. По данным Центра по контролю заболеваемости (США) до 65% заболеваний человека может быть связанно с формированием биопленок (Potera C., 1999). Наиболее важной отличительной особенностью бактерий, находящихся в составе сообществ, является повышенная в 50-500 раз резистентность к антибактериальным препаратам (Adam B.,G. et al., 2002; Rice S.A. et al., 2005). Стандартная терапия способна справиться только с отдельно существующими планктонными клетками, в то время как бактерии внутри биопленки способны размножаться и вновь диссеминировать после завершения курса лечения, приводя к формированию хронических процессов и рецидивов заболевания.
Повышение эффективности терапии болезней микробной этиологии является чрезвычайно актуальной задачей. Современная стратегия и тактика терапии таких болезней в большинстве случаев предусматривает комплексное лечение больных. Вместе с тем, препараты, усиливающие действие антибиотиков на биопленки, образованные при моно- и смешанных инфекциях, практически отсутствуют. В большинстве работ, посвященных изучению толерантности биопленок, представлены данные о формировании сообществ одним видом микроорганизмов. Остаются недостаточно изученными свойства смешанных биопленок, сформированных неродственными бактериями. Данных о действии эндо- и экзогенных ферментов, а также о совместном влиянии ферментов и антимикробных препаратов на биопленки в доступной литературе обнаружить не удалось.
Цель исследования - оценить способность микроорганизмов, выделенных при смешанных инфекциях, образовывать общие биопленки и изучить чувствительность бактерий, входящих в состав сообществ, к действию антибиотиков и ферментных препаратов.
Задачи исследования
-
Определить роль смешанных инфекций в этиологии гнойно-воспалительных процессов челюстно-лицевой области и неспецифических заболеваний легких.
-
Оценить возможность получения смешанных биопленок, образованных бактериями, изолированными из материала больных с микст-инфекциями.
-
Оценить действие антибактериальных препаратов на смешанные биопленки, образованные различными видами микроорганизмов in vitro.
-
Изучить действие протеолитических ферментов и ДНКазы на биопленки бактерий.
-
Оценить характер сочетанного действия антибиотиков и ферментов на смешанные биопленки.
Научная новизна
Установлено, что штаммы неродственных бактерий, выделенные из материала больных с одонтогенными абсцессами и флегмонами челюстно-лицевой области и неспецифическими заболеваниями легких смешанной этиологии, способны формировать общие биопленки.
Биопленки, образованные несколькими видами бактерий, обладают общими и индивидуальными свойствами по отношению к сообществам, сформированным одним видом микроорганизмов.
Бактерии в составе смешанных биопленок более защищены от действия антибактериальных препаратов, чем в сообществах, образованных каждым микроорганизмом в отдельности.
ДНКаза угнетает формирование биопленки и потенцирует действие антибиотиков на бактерии в составе смешанных биопленок.
Использование ДНКазы совместно с антибиотиками в комплексном лечении больных с абсцессами и флегмонами челюстно-лицевой области ускоряет снижение микробной обсемененности гнойной раны.
Практическая ценность работы
Разработаны и внедрены в клиническую практику новые эффективные схемы антимикробной терапии у больных с абсцессами и флегмонами челюстно-лицевой локализации, учитывающие свойства смешанных биопленок. На основании полученных данных доказана обоснованность сочетанного назначения ферментов и антибиотиков при лечении больных гнойно-воспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту
-
Штаммы бактерий, выделенные от больных с гнойно-воспалительными процессами челюстно-лицевой области и неспецифическими заболеваниями легких смешанной этиологии, формируют in vitro сложные микробные биопленки, отличающиеся повышенной устойчивостью к антибактериальным препаратам.
-
Ферментные препараты задерживают формирование смешанных микробных биопленок, образованных неродственными аэробными и анаэробными бактериями, и способствуют снижению биомассы сообществ.
-
Применение ДНК-азы в сочетании с антибиотиками в комплексном лечении смешанных инфекций у больных с одонтогенными абсцессами и флегмонами челюстно-лицевой локализации позволяет ускорить очищение гнойной раны и, следовательно, сократить общую продолжительность терапии, уменьшить сроки пребывания больных в стационаре и снизить частоту рецидивов заболевания.
Внедрение в практику
Результаты диссертационного исследования внедрены в диагностическую работу бактериальной лаборатории и в практическую деятельность клиники челюстно-лицевой хирургии СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, использованы в лекциях и семинарах для студентов и врачей СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова.
Апробация результатов исследования
Основные положения диссертации доложены на X и XI национальных конгрессах по болезням органов дыхания (Санкт-Петербург, 2000; Москва, 2001), на XI и XIII конгрессах Европейского респираторного общества (Берлин, 2001; Вена, 2003), международной конференции челюстно-лицевых хирургов и стоматологов (СПб, 2004). Диссертация апробирована на заседании кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова и на проблемной комиссии «Микробиология и иммунология» СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова (2007).
Личный вклад автора
Личное участие автора осуществлялось на всех этапах работы. Автор выполнил микробиологические исследования клинического материала пациентов, включенных в исследование и экспериментальной части работы, провел статистическую обработку и анализ полученных данных.
Публикации
По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, в том числе 2 статьи в ведущих изданиях, рекомендованных ВАК РФ.
Объем и структура диссертации
![Использование липосомальных форм антимикробных препаратов для лечения раневой инфекции в эксперименте [Электронный ресурс]](/i/i/4326/211478.png "Использование липосомальных форм антимикробных препаратов для лечения раневой инфекции в эксперименте [Электронный ресурс] Снатенков Евгений Александрович")
![Этиологическая роль кампилобактеров в структуре острых бактериальных кишечных инфекций у детей в Таджикистане [Электронный ресурс]](/i/i/4703/193414.png "Этиологическая роль кампилобактеров в структуре острых бактериальных кишечных инфекций у детей в Таджикистане [Электронный ресурс] Ахмедова Гульнора Махмуджановна")
