Введение к работе
Актуальность проблемы. Экспериментальными и клиническими исследованиями, большинство из которых проводилось коллективом кафедры патофизиологии Пермской медицинской академии, было показано, что наряду с классической иммунной реакцией существует принципиально иная форма специфического реагирования - экстренные антимикробные реакции клеток крови (В.Н.Каплин, 1966-1996). К реакциям такого типа относят специфические' изменения фагоцитарной активности лейкоцитов, антиген-связывающей способности эритроцитов, бактериофиксирующей активности крови и титров антител. Эти реакции отличает быстрота возникновения - первые минуты при воспроизведении их in vitro и первые дни инфекций у людей. Длительность этих реакций ограничена временем контакта клеток крови с микробными субстанциями. Реакции индуцируются прямым действием на клетки растворимых субстанций микробов - липополисахаридов (ЛПС) и полисахаридов (ПСХ). Характерной чертой экстренной формы реагирования, проявляющейся усилением взаимодействия клеток со специфическим объектом, является одновременное угнетение реакции в отношении неспецифических объектов.
Изучение закономерностей формирования экстренно возникающих антимикробных реакций позволило создать ряд принципиально новых методических подходов к диагностике инфекций, основанных на определении и оценке реакции по соотношению ее специфического и неспецифического компонента (И.П.Корюкина, 1982, Л.В.Шалгина, Г.И.Лузина, 1987, ЛЛ.Санакоева, 1988, Л.НШляшшкова, 1989, А.Х.Мамунц с соавт. , 1992, В.Н.Каплин, 1996, и др.).
Значительное внимание привлекало исследование экстренной специфической реакции лимфоцитов, которая была воспроизведена в модельных опытах и выявлена в раннем периоде инфекций. Экспериментальными исследованиями на животных и клиническими наблюдениями было установлено раннее появление специфических розеткообразующих лимфоцитов (РОЛ) - спустя 30-60 мин после заражения или иммунизации лабораторных животных и в первые три дня инфекций у людей (ВЖМинаева с соавт., 1987, Л.П.Быкова, 1988, Л.А.Прасолова, 1990, А.С.Закс с соавт., 1993, и др.). Однако механизм этой реакции остается не совсем ясным.
Определение реакции специфической адгезии лимфоцитов, известной как иммунное розеткообразование (РО), используется в диагностике инфекций. Однако метод иммунного РО не стандартизован и многоэтапен. Главным фактором, снижающим его диагностическую ценность, является отсутствие унифицированного количественного критерия оценки реакции. Этим определяется актуальность настоящего исследования.
Целью работы явилось совершенствование определения реакции специфической адгезии лимфоцитов, изучение закономерностей ее формирования в модельных опытах in vitro и при инфекциях и повыщение эффективности иммунодиагностики инфекций.
Задачи исследования.
1. Разработать метрд определения реакции специфической
адгезии лимфоцитов и ее оценки по соотношению адгезии специ
фического и неспецифического объектов.
-
Изучить закономерности формирования in vitro экстренной реакции специфической адгезии лимфоцитов при взаимодействии лейкоцитарной взвеси доноров с растворимыми субстанциями микробов.
-
Изучить закономерности реакции специфической адгезии лимфоцитов в начальном периоде инфекций - туберкулеза и ши-геллеза.
-
Усовершенствовать раннюю диагностику инфекций на основе исследования реакции специфической адгезии лимфоцитов.
Научная новизна. На основе нового методического подхода изучены закономерности формирования in vitro экстренной реакции специфической адгезии лимфоцитов.
Установлена неантигенная природа этой реакции.
Выявлены новые закономерности формирования реакции специфической адгезии лимфоцитов при туберкулезной и шигел-лезной инфекциях.
Практическая ценность и внедрение. Разработан новый метод определения реакции специфической адгезии лимфоцитов, позволяющий унифицировать ее оценку и использовать единый диагностический критерий при разных инфекциях. Предложенный метод позволяет осуществлять эффективную диагностику туберкулеза и шигеллеза в начальном периоде заболевания.
Фрагменты исследования включены, в монографию В.Н.Каплина "Нетрадиционная иммунология инфекций" (Пермь, 1996).
По материалам работы подана заявка на изобретение "Способ иммунодиагностики инфекций" (приоритетная справка №96118905 от 23.09.96.).
Основные положения, выносимые на защиту.
-
Оригинальный метод исследования реакции специфической адгезии лимфоцитов с оценкой реакции по соотношению адгезии специфического и неспецифического объектов.
-
Закономерности формирования экстренной реакции специфической адгезии лимфоцитов при ее воспроизведении in vitro.
-
Закономерности формирования реакции специфической адгезии лимфоцитов в начальном периоде туберкулезной и шигел-лезной инфекций.
4. Эффективность метода определения реакции специфиче
ской адгезии лимфоцитов в ранней диагностике туберкулеза и
шигеллеза.
Апробация работы. Работа выполнена на кафедре патологической физиологии Цермской медицинской академии и является частью комплексного исследования "Разработка новых методов иммунологического исследования и ранняя иммунологическая диагностика инфекций и деструктивных процессов во внутренних органах"^ госрегистрации темы 12820080720).
По материалам исследования сделаны сообщения на Всероссийской научно-практической конференции "Состояние и перспективы разработки препаратов для диагностики вирусных гепатитов и инфекций, управляемых специфическими средствами профилак-тики"(Пермь, 1993), на заседании научной проблемной комиссии ПГМА "Общая и прикладная иммунология"(Пермь, 1993), на межрегиональной учебно-методической конференции "Преподавание в медицинском вузе вопросов профилактики и здоровья и его реабилитации" (Пермь, 1994), на IX иммунологической конференции ПГМА (Пермь, 1994), на конференции молодых ученых, посвященной 80-летию ПГМА (Пермь, 1996), на совместном заседании кафедр микробиологии и патофизиологии ПГМА (Пермь, 1996), на заседании лаборатории экологической иммунологии Института экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН (Пермь, 1997).
По итогам конкурса на лучшую научную работу молодых ученых Пермской медицинской академии (1996) работа отмечена дипломом III степени.
Публикации. Основные положения работы представлены в 5 научных публикациях.
Объем работы. Диссертация изложена на 110 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, двух глав собственных исследований, заключения и выводов. Библиографический указатель включает ссылки на 162 отечественных и 54 зарубежных
источника. Работа содержит 17 таблиц, иллюстрирована 2 рисунками.
