Введение к работе
Актуальность
Изучение симбиозов в настоящее время заняло одно из приоритетных мест в ряду актуальных проблем современной биологии. Ассоциативный симбиоз – это многокомпонентная интегральная система, в которой существует макросимбионт (хозяин), а также микросимбионты – доминантные и ассоциативные микроорганизмы (Бухарин, 2006). В составе таких симбиоценозов, как правило, наблюдается разделение доминантного и ассоциативных микросимбионтов с разнонаправленным действием, определяющим формирование, стабильность существования и продуктивность симбиоза в целом (Проворов В.Н., 2001; Бухарин О.В., 2007).
Микробиоценоз репродуктивного тракта женщин можно рассматривать в качестве важнейшего примера ассоциативного симбиоза человека. Данный биотоп, в отличие от других, имеет один доминантный таксон (лактобациллы) и несколько таксонов ассоциированных микроорганизмов, которые в случае повышения патогенного потенциала могут являться основным или дополнительным этиологическим фактором патологического процесса (Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Хуснутдинова Л.М., 2000, 2003, 2007).
Урогенитальная система женщины весьма сложна и характеризуется сложной микроэкологической структурой, значение отдельных компонентов которой недостаточно изучено (Кафарская Л.И. и соавт., 2001; Назарова Е.К. и соавт., 2003; Гобечия М., 2004; Наумкина Е.В., Рудаков Н.В., 2009). Так, например, еще не оценена в должной мере роль микоплазм в инфекционной патологии человека.
Широко распространенное носительство микоплазм можно рассматривать как патогенный потенциал этих микроорганизмов, так как оно приводит к развитию многочисленных патологических состояний (Прилепская В.Н., Быковская О.В., 2005; Lidbric P., 2004). Совокупность характерных для микоплазм свойств, таких как их убиквитарность, мембранный паразитизм, способность преодолевать тканевые барьеры, отсутствие выраженного тропизма, многокомпонентность факторов вирулентности свидетельствует об особом характере взаимодействия микоплазм с организмом хозяина (Мальцева Л.И., Зефирова Т.П. и соавт., 2005; Макаров О.В. и соавт., 2007; Зигангирова Н.А., 2008). В связи с этим чрезвычайно интересным представляется рассмотрение роли микоплазм в формировании измененных микробных симбиозов (Данилов Е.Ю., 2007). Изучены механизмы взаимодействия макро- и микрокомпонентов АС, а также ДМ и АМ (Константинова О.К, 2004). Однако взаимное влияние на биологические свойства в системе «АМ-АМ», определяющие их патогенность и стабильность микросимбиоценоза в целом остаются не изученными.
Целью исследования явилось выявление изменения патогенного потенциала Еnterococcus faecalis при взаимодействии с Мycoplasma hominis в условиях ассоциативного симбиоза репродуктивного тракта.
Для реализации этой цели были сформулированы следующие задачи:
-
Дать характеристику микробиоценоза репродуктивного тракта женщин при воспалительных заболеваниях, вызванных М. hominis.
-
Определить фенотипические проявления и генетические детерминанты патогенности клинических изолятов М. hominis в условиях ассоциативного симбиоза репродуктивного тракта женщин.
-
Выявить биологические свойства и изменения встречаемости генетических детерминант патогенности микросимбионта Е. faecalis, выделенного из микробных консорциумов репродуктивного тракта женщин при наличии и отсутствии в них микоплазм.
-
Дать оценку патогенного потенциала микросимбионтов после их взаимодействия в условиях сокультивирования in vitro.
Научная новизна
Впервые установлено, что в результате симбиотического взаимодействия при воспалительных заболеваниях репродуктивного тракта происходит изменение патогенного потенциала Е. faecalis при взаимодействии с М. hominis в условиях ассоциативного симбиоза репродуктивного тракта, проявляющегося в увеличении частоты встречаемости генетических детерминант патогенности обоих микросимбионтов.
Выявлено нарушение стабильности ассоциативного симбиоза репродуктивного тракта женщин при воспалительных заболеваниях, вызванных M. hominis, проявляющееся снижением доминирования основных симбионтов на фоне увеличения частоты встречаемости и повышения вирулентности ассоциативной микрофлоры. Показано, что при воспалительных заболеваниях РТ, вызванных микоплазмами, среди условно-патогенных бактерий доминирует микросимбионт Е. faecalis.
Впервые обнаружено достоверное увеличение распространенности генетических детерминант патогенности у клинических изолятов M. hominis (р120) и E. fаecalis (сylm, cpd и cps генов) после их сокультивирования с вирулентными штаммами ассоцианта in vitro.
Теоретическая и практическая значимость
Результаты проведенных исследований вносят вклад в развитие теоретических основ учения об ассоциативных симбиозах. Полученные в работе данные расширяют и углубляют представления о характере межмикробных взаимодействий, определяющих формирование и поддержание симбиоценоза репродуктивного тракта женщин, в частности, впервые установлено взаимное влияние на патогенный потенциал минорных ассоциантов.
Данные, полученные при изучении взаимодействия М. hominis и E. fаecalis, свидетельствуют о необходимости определения патогенности микросимбионтов для оценки их этиологической значимости и прогнозирования течения заболевания. Предложено также с целью улучшения качества диагностики микоплазменных инфекций внедрение в работу бактериологических лабораторий диагностических показателей патогенности микроорганизмов, что позволит оптимизировать диагностику и выявлять риск формирования патомикробиоценозов.
Основные положения диссертационной работы внедрены в практику клинико-диагностической лаборатории ГУЗ Областного клинического кожно-венерологического диспансера г. Ульяновска, а также включены в лекционные курсы и практические занятия по микробиологии в ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет».
По материалам диссертационной работы опубликованы практические рекомендации «Микробиоценоз репродуктивного тракта женщин при воспалительных заболеваниях» (г.Ульяновск, 2011).
Основные положения, выносимые на защиту
-
Воспалительные заболевания репродуктивного тракта женщин, вызванные М.hominis, сопровождаются дестабилизацией ассоциативного симбиоценоза, что проявляется угнетением доминантной микрофлоры на фоне повышения показателей частоты встречаемости и колонизационной резистентности ассоциативных симбионтов.
-
Минорные микросимбионты в условиях конкурентной борьбы внутри ассоциативного симбиоза оказывают взаимное влияние, стимулирующее накопление детерминант патогенности ассоцианта. Этот механизм имеет важное значение в развитии воспалительных заболеваний репродуктивного тракта, т.к. взаимодействие микросимбионтов в ассоциации М. hominis-E. fаecalis способствует формированию штаммов с высоким патогенным потенциалом.
Апробация работы
Диссертация выполнена в соответствии с планом научной работы ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет».
Результаты работы представлены на заочной электронной конференции «Экологические проблемы внутренних болезней перинатологии и педиатрии» (2008 г.), конференции молодых ученых с международным участием «Актуальные вопросы инфекционной патологии-2009» (г.Санкт-Петербург, 2009 г.), международной конференции «Диагностика, терапия профилактика социально значимых заболеваний человека» (Турция, 2009 г.), Российской научно-практической конференции с международным участием «Высшее сестринское образование в системе российского здравоохранения» (г. Ульяновск, 2010 г.).
Публикации
По материалам диссертации опубликовано 12 научных работ, из них 3 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ; 1 практические рекомендации.
Объем и структура диссертации
Диссертация изложена на 147 страницах. Состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка использованной литературы. Список включает 223 источника, в том числе 140 – отечественных и 83 – зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 29 таблицами и 16 рисунками.
