Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ. Успехи фундаментальной иммунологии указывают на ведущую роль антигенов гистосовместимости класса II, (1а-антигенов), в молекулярных механизмах развития иммунного ответа и его регуляции (Петров Р.В., Хаитов P.M., и др., 1981; Алексеев Л.П., Хаитов P.M.,1996; Benacerraf В.,1981; Dasgupta J., Yunis E., 1987). Ia-антигены (Ia-a) или Іа-белки необходимы на всех этапах иммунного ответа, они участвуют в антигенном распознавании, презентации антигена, клеточном взаимодействии, определяют генетическую рестрикцию и силу иммунной реакции (Медуницын Н.В., Алексеев Л.П., 1987; Grey Н.М., et.al., 1985; Buus S. 1994).
Многие вопросы проблемы антигенов гистосовместимости остаются слабо изученными. Это касается значения антигенов класса II в процессинге и презентации экзогенных антигенов, в образовании комплекса фрагмента антигена с 1а-а, механизмов интернализации и реэкспрессии антигенов класса II главного комплекса гистосовместимости (ГКГ). В последние годы достигнуты успехи в изучении взаимодействия очищенных la-молекул с пептидами (Adorini L., et.al., 1991; Jensen Р.Е., 1991; Frumento G., et.al., 1994; Guery J-C., Adorini L., 1995), но остаются мало изученными процессы взаимодействия нативных белковых антигенов с поверхностью вспомогательных клеток, что имеет решающее значение для выяснения механизмов развития начальной стадии иммунного ответа.
Изучение роли антигенов класса II как рецепторов для нативных белковых растворимых антигенов имеет большое значение в решении проблем фундаментальной иммунологии, в выяснении роли антигенов класса II в регуляции иммунитета и механизмах развития отдельных заболеваний, в разработке методов и средств лечения различных форм иммунопатологии.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Цель настоящей работы заключалась в изучении способности вспомогательных клеток неиммунизированных мышей связывать растворимые нативные белковые антигены и определении роли la-белков в этом процессе.
-
Изучить способность различных фракций вспомогательных клеток неиммунизированных мышей связывать растворимые нативные белковые антигены.
-
Выяснить влияние препаратов, стимулирующих или подавляющих уровень экспрессии la-антигенов на клеточной поверхности, на связывающую способность вспомогательных клеток.
-
Изучить влияние уровня экспрессии антигенов гистосов-местимости класса II на поверхности вспомогательных клеток на развитие реакций клеточного иммунитета на белковые антигены.
-
Выяснить влияние синтетических полиэлектролитов на созревание эффекторных клеток, образующих фактор торможения миграции макрофагов (МИФ) при стимуляции синтетическим полипептидом (Т.Г)-А-Л вспомогательных клеток низкореагирующих мышей.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Представлены доказательства участия антигенов класса II ГКГ в связывании нативных белковых антигенов вспомогательными клетками неиммунизированных мышей.
При сочетанном использовании двух способов оценки связывания нативных белковых антигенов (по уровню радиоактивной и флюоресцентной метки) установлена зависимость между уровнем связывания нативного антигена и экспрессией продуктов генов гистосов-местимости класса II на поверхности вспомогательных клеток.
Показано, что способы, снижающие уровень экспрессии антигенов гистосовместимости класса II, подавляют степень связывания нативных белков вспомогательными клетками, а способы, стимулирующие экспрессию la-белков, усиливают связывающую способность этих
клеток.
Установлено, что фаза индукции созревания МИФ-продуцентов на яичный альбумин в условиях in vitro и эффекторная стадия их активации являются 1а-зависимыми процессами.
Установлено, что 1а-а, экспрессирующиеся на поверхности вспомогательных клеток, являются универсальными рецепторами для нативных белковых антигенов.
ПРАКБЇЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ. Изучение антигенов класса 11 ГКГ как рецепторов для нативных антигенов важно для выяснения механизмов развития начальной стадии иммунного ответа с целью разработки способов регуляции иммунного ответа, что имеет большое значение для подбора методов и средств лечения различных форм иммунопатологии. Изучение механизмов стимулирующего действия синтетических полиэлектролитов имеет важное значение для разработки искусственных вакцин нового типа, рассчитанных на создание клеточного иммунитета и поиска новых подходов к преодолению иммунологической толерантности.
-
Разные виды вспомогательных клеток связывают нативные белковые антигены с различной интенсивностью. Степень связывания нативных белков зависит от уровня экспрессии антигенов класса II на поверхности клеток.
-
Интенсивность клеточных реакций на белковые антигены in vitro (созревание и активация МИФ-продуцентов, антигенспецифи-ческая пролиферация Т-клеток) зависит от степени экспрессии антигенов класса II на поверхности вспомогательных клеток.
-
Синтетический полипептид (Т.Г)-А-Л при коньюгировании с синтетическим полиэлектролитом МБ приобретает способность вызывать формирование МИФ-продуцентов у мышей, низкоотвечающих на чистый (Т.Г)-А-Л.
-
Антигены класса II ГКГ, экспрессирующиеся на поверхности
вспомогательных клеток, являются универсальными рецепторами для нативных белковых антигенов.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Основные положения работы доложены на конференции молодых ученых Института иммунологии Минздрава РФ (Москва 1990), на межлабораторной конференции Института иммунологии, на 1-м съезде Белорусского научного общества иммунологов "Экологическая иммунология" (г.Минск, 1990 г.), на Всесоюзном симпозиуме с международным участием "Система мононуклеарных фагоцитов в норме и при патологии" (г.Новосибирск, 1990 г.), на Первой международной конференции по иммунореабилитации (г. Сочи-Дагомыс, 1992 г.), на Международном симпозиуме по аллергологии и клинической иммунологии (г.Алма-Ата, 1992 г.).
Диссертация апробирована на заседании Ученого совета ГИСК им. Л.А. Тарасевича (Москва, 1996г.).
ПУБЖКАЦИИ. По теме диссертации опубликовано 18 работ: журнальных статей - 3, статей в сборник - 3, тезисов - 12.
ОБЬЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация изложена на НО страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной описанию материалов и методов исследования, главы собственных исследований, обсуждения и выводов. Указатель литературы включает /9S источник, в том числе Зт отечественных авторов и зарубежных. Диссертация иллюстрирована "1%> рисунками и ІЗ, таблицами.
