Введение к работе
Актуальность темы. В настоящее время эпилепсия является одной из наиболее актуальных проблем неврологии. Особенность лечения заключается в необходимости длительного (иногда многолетнего или пожизненного) ежедневного приема противоэпилептических препаратов. Как и все эффективные лекарственные средства, эти препараты не лишены побочных эффектов: возможно негативное влияние как на нервную систему и психическую сферу, так и на внутренние органы. Следует иметь в виду, что все препараты, применяемые для лечения эпилепсии, в той или иной степени токсичны. Одним из широко применяемых препаратов этой группы считается ламотриджин. Данный препарат относится к новому поколению противоэпилептических средств. Ламотриджин применяют как в монотерапии, так и в комбинациях с другими противоэпилептическими средствами (фенитоин, фенобарбитал и др.). Наряду с положительным терапевтическим эффектом, ламотриджин в определенных условиях (при передозировке, злоупотреблении, повышенной чувствительности организма) оказывает токсическое действие на организм человека, в том числе с летальным исходом.
Анализ данных литературы свидетельствует о том, что не было проведено систематических исследований по изолированию, идентификации и количественному определению ламотриджина в биологических объектах; отсутствует схема химико-токсикологического анализа ламотриджина, позволяющая надежно идентифицировать отравления ламотриджином.
В связи с этим комплексное исследование по разработке методик изолирования, идентификации и количественного определения ламотриджина в биологических объектах является актуальной задачей.
Целью исследования является разработка схемы химико-токсикологического исследования ламотриджина в биологических объектах (кровь, моча, печень, почки) с помощью современных физико-химических методов.
Для выполнения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
Разработать методику изолирования ламотриджина из биологических объектов (кровь, моча, печень, почки);
Разработать методики идентификации ламотриджина в извлечениях из биологических объектов;
Разработать методики количественного определения ламотриджина в извлечениях из биологических объектов;
Предложить схему химико-токсикологического анализа ламотриджина при отравлениях;
Апробировать разработанные методики изолирования, идентификации и количественного определения на лабораторных животных (крысах).
Научная новизна работы. Определены оптимальные условия экстракции ламотриджина из водных растворов. С помощью метода математического планирования эксперимента – «латинский квадрат» изучали одновременное влияние на процесс жидкость-жидкостной экстракции ламотриджина четырёх факторов (природы органического растворителя, значения рН среды, наличия электролитов и продолжительности экстракции). Установлено, что на процесс изолирования ламотриджина методом жидкость-жидкостной экстракции влияют значение рН среды, природа органического растворителя и наличие электролита.
Найдены оптимальные условия для изолирования ламотриджина из биологических объектов (кровь, моча, печень, почки). Разработаны методики идентификации ламотриджина в извлечениях из биологических объектов с помощью современных физико-химических методов (ТСХ, ВЭЖХ и ГХ/МС) и химических реакций (хромогенные и микрокристаллоскопические). Разработаны методики количественного определения ламотриджина в извлечениях из биологических жидкостей и внутренних органов трупа с помощью методов ВЭЖХ и ГХ, позволяющие обнаружить изучаемое лекарственное вещество с относительным стандартным отклонением для всех исследуемых биологических объектов не превышающим 10,2%.
Предложенные методики изолирования, идентификации и количественного определения ламотриджина были апробированы на лабораторных животных (крысах) при введении им терапевтических и токсических доз лекарственного препарата, тем самым показано определение ламотриджина в биологических жидкостях и органах животных при отравлении.
Практическая значимость работы и внедрение результатов исследования
Разработаны методики химико-токсикологического анализа ламотриджина. Обосновано применение этих методик в практике химико-токсикологических лабораторий, что позволит достоверно диагностировать факт отравления ламотриджином и оценить его степень.
По результатам исследования утверждено РИО ФГУ «РЦСМЭ» Минздравсоцразвития России информационное письмо «Определение ламотриджина в биологических объектах при проведении химико-токсикологического и судебно-химического анализа» и рекомендовано к использованию в химико-токсикологических лабораториях.
Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены на 62-й, 64-й, 65-й и 66-й конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» г. Пятигорск (2007-2011 гг).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 научных работ, в том числе одна в журнале, рекомендованном ВАК РФ.
Положения, выносимые на защиту:
Результаты поиска оптимальных условий изолирования ламотриджина из биологических объектов (кровь, моча, печень, почки).
Результаты применения разработанных методик на модельных смесях для идентификации и количественного определения ламотриджина в извлечениях из биологических жидкостей (крови, мочи) и внутренних органов трупа (печень, почки) с помощью современных физико-химических методов (ВЭЖХ, ГХ/МС) и химических реакций (хромогенные и микрокристаллоскопические).
Схема химико-токсикологического исследования ламотриджина в биологических объектах и результаты апробации разработанных методик на лабораторных животных (крысах).
Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 99 страницах и состоит из введения, обзора литературы, четырёх глав экспериментальной части, общих выводов, списка литературы. В тексте содержится 33 таблицы и 24 рисунка. Список цитируемой литературы включает 109 источников, из них 41 на иностранных языках.
