Введение к работе
Актуальность темы. В настоящее время доля ненаркотических анальгетиков в структуре применяемых в медицинской практике лекарственных препаратов значительна. Из этой группы лекарственных препаратов наиболее широко применяются как в медицинской практике по назначению врача, так и самостоятельно: ибупрофен, кеторолак, метамизол натрия, нефопам, парацетамол и трамадол. Данные лекарственные препараты применяются как индивидуально, так и в сочетании друг с другом или другими наркотическими анальгетиками с целью усиления лечебного эффекта, уменьшения дозировки наркотического анальгетика, или же для усиления состояния наркотического опьянения и облегчения проявления абстинентного синдрома. При определённых условиях (передозировка, многочисленные торговые названия препаратов, взаимное потенцирование действия) приём изучаемых анальгетиков приводит к острым отравлениям, в том числе со смертельным исходом, что определяет их важное токсикологическое значение. По данным литературы разработаны ряд методик анализа отдельных вышеуказанных анальгетиков в различных биологических объектах. Однако по настоящее время отсутствуют методики их химико-токсикологического анализа при комбинированных отравлениях.
В связи с этим разработка методик дифференциальной диагностики указанных ненаркотических анальгетиков при химико-токсикологическом исследовании мочи является актуальной проблемой.
Цель исследования: разработка схемы химико-токсикологического анализа ибупрофена, кеторолака, метамизола натрия, нефопама, парацетамола и трамадола в моче. Задачи исследования:
-
Разработать методики идентификации ибупрофена, кеторолака, метамизола, нефопама, парацетамола, трамадола в моче с помощью химических и физико-химических методов.
-
Разработать методики количественного определения изучаемых анальгетиков в моче.
-
Разработать методики изолирования изучаемых лекарственных веществ из мочи индивидуально и в различных сочетаниях.
-
Предложить схему химико-токсикологического анализа при дифференциальной диагностике отравлений изучаемыми анальгетиками.
-
Внедрить схему химико-токсикологического анализа изучаемых анальгетиков в виде Информационного письма в практику работы химико-токсикологических и судебно - химических лабораторий России.
Научная новизна работы. Предложен методологический подход к разделению и идентификации изучаемых анальгетиков (ибупрофен, кеторолак, метамизол натрия, нефопам, парацетамол, трамадол) при направленном химико-токсикологическом анализе с использованием комплекса химических и физико-химических методов.
В предварительном исследовании предлагается использовать в скрининговом варианте метод ТСХ, а в основном исследовании – химические (хромогенные и микрокристаллоскопические реакции) и физико-химические методы: высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) и хромато-масс-спектрометрию (ГХ/МС).
Разработана методика количественного определения ибупрофена, кеторолака, метамизола, нефопама, парацетамола и трамадола методом ВЭЖХ в извлечениях из мочи как индивидуально, так и в различных сочетаниях. Дана валидационная оценка данной методики по основным критериям (линейность, специфичность, предел обнаружения, прецизионность, правильность, предел количественного определения).
Теоретически обоснованы и экспериментально подтверждены условия изолирования изучаемых анальгетиков из водных растворов с последующей разработкой способов их выделения из мочи. Установлена оптимальная кратность экстракции, изучено влияние условий гидролиза на стабильность указанных лекарственных веществ, что позволило разработать методики их изолирования из мочи как индивидуально, так и при различных сочетаниях.
Возможность использования разработанной схемы химико-токсикологического анализа изучаемых анальгетиков была подтверждена на лабораторных животных (крысах).
Практическая значимость работы и внедрение результатов исследования.
Разработанная схема химико-токсикологического анализа (ХТА) ибупрофена, кеторолака, метамизола, нефопама, парацетамола и трамадола позволяет достоверно диагностировать факт отравления и оценить его степень.
По материалам исследования подготовлено и утверждено Ученым советом ФГУ «Российский Центр судебно-медицинской экспертизы» Минздравсоцразвития России (протокол №3 от 09.06.2011 года) Информационное письмо «Дифференциальная диагностика некоторых ненаркотических анальгетиков при химико-токсикологическом исследовании мочи», которое рекомендовано к использованию в химико-токсикологических лабораториях и Бюро СМЭ Российской Федерации.
Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены на 62- 67 - ой региональных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2007-2012г.г.); на Российской научно-практической конференции (с международным участием) «Актуальные вопросы судебно-химических, химико-токсикологических исследований и фармацевтического анализа» (Пермь, 2009г.).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, в том числе две в журналах, рекомендованных ВАК РФ.
Положения, выносимые на защиту:
результаты разработки методик идентификации и количественного определения ибупрофена, кеторолака, метамизола, нефопама, парацетамола и трамадола в моче;
результаты поиска оптимальных условий изолирования исследуемых анальгетиков из мочи;
результаты апробации методик химико-токсикологического анализа исследуемых анальгетиков на лабораторных животных;
схему химико-токсикологического анализа мочи при отравлениях изучаемыми анальгетиками как индивидуально, так и при различных сочетаниях.
Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 170 страницах и состоит из введения, обзора литературы, четырёх глав экспериментальной части, общих выводов, списка литературы и приложения. В тексте содержится 31 таблица и 28 рисунков. Список цитируемой литературы включает 206 источников, из них 53 на иностранных языках.
