Введение к работе
Актуальность темы. Тетраэтилтиурамдисульфид (антабус, тетурам) в настоящее время входит в состав многих противоалкогольных препаратов и является одним из наиболее действенных лекарственных средств для лечения хронического алкоголизма.
Есть сведения, что основной метаболит тетраэтилтиурамдисульфида - диэтилдитиокарбамат - способен стимулировать активность иммунной системы. Соли дитиокарбаминовых кислот обладают радиопротекторной активностью.
Наряду с применением в медицине тетраэтилтиурамдисульфид широко применяется в аналитической практике в качестве реагента на ионы металлов.
Рассматриваемое соединение применяют также как
хелатообразователь при отравлении тетракарбонилом никеля.
Тетраэтилтиурамдисульфид и некоторые близкие к нему структуры находят широкое применение в качестве пестицидов.
Тетраэтилтиурамдисульфид токсичен для теплокровных организмов. LD5o для крыс при пероральном введении составляет 500 мг/кг.
Описаны многочисленные случаи отравления людей данным соединением с летальным исходом. Смерть взрослого человека может наступить от 30 г тетраэтилтиурамдисульфида, а при концентрации алкоголя в крови более 0,13% - от 1 г вещества.
Широкое применение рассматриваемого вещества, его высокая токсичность, наличие случаев летального отравления, обуславливают необходимость изучения данного вещества в химико-токсикологическом отношении.
До настоящего времени остаются недостаточно разработанными вопросы изолирования тетраэтилтиурамдисульфида из объектов биологического происхождения, его обнаружения, идентификации и количественного определения. В доступной литературе отсутствуют данные по сохраняемости данного соединения в биологическом материале.
Исходя из вышеизложенного, разработка методики химико -токсикологического исследования тетраэтилтиурамдисульфида является актуальной.
Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования является разработка методики химико-токсикологического исследования тетраэтилтиурамдисульфида.
Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
1. Изучить особенности электронных и колебательных спектров
тетраэтилтиурамдисульфида.
2. Определить характер хроматографической активности
исследуемого вещества в тонких слоях и колонках сорбентов.
Исследовать особенности изолирования объекта исследования различными группами изолирующих агентов из биологического материала, разработать схему очистки извлечений.
Изучить распределение тетраэтилтиурамдисульфида в органах и биожидкостях теплокровных животных.
5. Определить сроки сохранения рассматриваемого вещества в
биологическом материале.
Научная новизна исследований. Изучены отдельные закономерности хроматографического поведения тетраэтилтиурамдисульфида в сорбентах с гидроксилированной и привитой поверхностями при использовании различных подвижных фаз; определены оптимальные условия и рассчитан ряд параметров хроматографирования исследуемого вещества в тонких слоях и колонках сорбентов.
На основе проведенных исследований разработаны методики идентификации и количественного определения тетраэтилтиурамдисульфида методами ТСХ и хроматоспектрофотометрии.
Исследованы особенности поглощения веществом
электромагнитного излучения в УФ-части спектра, закономерности изолирования агентами различной химической природы. Для повышения селективности качественного спектро фотометрического определения рассчитан ряд основных оптических характеристик электронных спектров.
Впервые для изолирования тетраэтилтиурамдисульфида из биологического материала обосновано использование в качестве изолирующего агента этилацетата. На основе применения в качестве изолирующего агента этилацетата и очистки в тонких слоях или колонках нормальнофазового сорбента разработаны оригинальные методики определения рассматриваемого вещества в ткани органов и биожидкостях, применимые как для исследования свежего, так и гнилостно изменённого биоматериала.
С использованием вновь разработанных методик в опытах на животных (крысы) исследованы особенности распределения тетраэтилтиурамдисульфида в организме теплокровных при его самостоятельном введении и при введении вместе с этанолом.
Определены сроки сохраняемости рассматриваемого вещества в биологическом материале (печень, кровь).
Практическая значимость работы. На основании проведённых исследований разработана методика изолирования из биологического материала, очистки, идентификации и количественного определения тетраэтилтиурамдисульфида.
Внедрение результатов работы:
- методика изолирования тетраэтилтиурамдисульфида из ткани печени, одноэтапного ТСХ-разделения и количественного определения методом спектрофотометрии (внедрена в учебный и научный процесс кафедры фармацевтической, токсикологической и аналитической химии Курского государственного медицинского университета с 01.09.2009 г.,
кафедры фармацевтической химии и клинической фармации Воронежской государственной медицинской академии им. Н.Н. Бурденко с 16.02.2009 г. и кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии Белгородского государственного национального исследовательского университета с 15.12.2010 г.);
- методика определения тетраэтилтиурамдисульфида в биологических жидкостях (кровь, моча) одноэтапного ТСХ-разделения и количественного определения методом спектрофотометрии (внедрена в учебный и научный процесс кафедры фармацевтической, токсикологической и аналитической химии Курского государственного медицинского университета с 01.09.2009 г. и кафедры фармацевтической химии и клинической фармации Воронежской государственной медицинской академии им. Н.Н. Бурденко с 16.02.2009 г. и кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии Белгородского государственного национального исследовательского университета с 15.12.2010 г.).
Связь исследований с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена по плану научно-исследовательских работ кафедры фармацевтической, токсикологической и аналитической химии Курского государственного медицинского университета и соответствует проблеме «Фармация» межведомственного научного совета N 36 РАМН. Номер государственной регистрации 0120.0801917.
Апробация работы. Основные положения работы представлены и доложены на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 10-летию биотехнологического факультета Курского государственного медицинского университета (Курск, 2008), на II Международном научном форуме «Аналитика и аналитики» (Воронеж, 2008), на IV Международной конференции «Экстракция органических соединений» (Воронеж, 2010), на IV Международной научной конференции молодых ученых-медиков (Курск, 2010).
Публикации. По теме диссертации опубликовано тринадцать научных работ, 4 из которых - в журналах списка ВАК, а 2 публикации являются патентами РФ.
Объём и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы (1 глава), экспериментальной части (5 глав), общей схемы исследования, общих выводов, списка цитируемой литературы. Материалы диссертации изложены на 168 страницах машинописного текста, содержат 10 рисунков, 27 таблиц. Список цитируемой литературы включает 169 источника, из которых 64 - на иностранных языках.
Первая глава (обзор литературы) включает в себя известные данные о тетраэтилтиурамдисульфиде как объекте химико-токсикологического исследования.
Вторая глава посвящена вопросам идентификации объекта
исследования хроматографическими и спектральными методами.
В третьей главе приводятся экспериментальные данные по вопросам количественного определения анализируемого вещества.
Четвёртая глава включает в себя результаты изучения особенностей выделения и очистки объекта исследования хроматографическими методами.
В пятой главе рассмотрены вопросы определения тетраэтилтиурамдисульфида после его изолирования из биологического материала оптимальным изолирующим агентом.
В шестой главе приведены данные, полученные в результате изучения особенностей распределения тетраэтилтиурамдисульфида в организме теплокровных и сохраняемости в биологическом материале (печень, кровь).
Основные положения, выносимые на защиту:
- результаты исследования хроматографической активности
тетраэтилтиурамдисульфида в тонких слоях и колонках сорбентов;
- особенности поглощения электромагнитного излучения
анализируемым веществом в УФ-области спектра;
методики идентификации и количественного определения объекта исследования хроматографическими и фотометрическими методами;
результаты исследования очистки тетраэтилтиурамдисульфида в тонких слоях и колонках сорбентов;
методика изолирования объекта исследования из биологического материала (печени, крови, мочи) и очистки от соэкстрактивных веществ;
- особенности распределения тетраэтилтиурамдисульфида в
организме теплокровных животных;
- сохраняемость тетраэтилтиурамдисульфида в тканях трупных
органов и в биологических жидкостях.
