Введение к работе
з
Актуальность работы. Несмотря на интенсивное развитие ветеринарной медицины и, в частности ветеринарной дерматологии, трихофития по-прежнему имеет значительный и стабильный удельный вес среди кожных болезней животных в большинстве стран мира.
Эта болезнь распространена повсеместно и наносит ощутимый экономический ущерб за счет снижения прироста живой массы и качества кожевенного сырья, увеличения затрат на проведение лечебно-оздоровительных мероприятий (Борисова Л.И., 1986; Поляков И.Д., Иванова Л.Г., 1994; Кухар Е.В. , 2006).
Существующие технологии получения вакцин против микозов (Саркисов А.Х., Петрович СВ., Никифоров Л.В. и др., 1972; Летягин К.П., Саркисов К.А., Панин А.Н., Маноян М.Г., 1997; Соловьев Н.П., 2004; Лазовский В.А., 2007) основаны на культивировании грибов только поверхностным способом. Однако, как известно, такой способ культивирования промышленных штаммов микроорганизмов по современным требованиям биотехнологии нельзя считать технологичным. При развитии на твердых средах и, особенно, при снятии с поверхности агаризованных сред споры возбудителей микозов могут загрязнять производственные помещения, а процесс культивирования целевых штаммов длительный (более 20 суток) и трудоемкий.
Анализ опубликованной информации показывает, что ранее проводились исследования по разработке технологии глубинного культивирования несовершенных грибов, к которым относится и Trichophyton verrucosum (Мирзаев М.Н., Кононова С.Ю., 1985; Баласова А.И., Бабаян Е.Ю., Булатова А.А. и др.,1985). Полученные авторами данные позволили заменить промышленную технологию культивирования гриба Beauveria bassiana поверхностным методом на глубинное при получении энтомопатогенного препарата боверин.
Известные работы по культивированию гриба Trichophyton verrucosum (= синоним Trichophyton faviforme) глубинным способом посвящены оценке динамики накопления массы (Кухар Е.В., 1999 г.; Кухар Е.В., 2002 г.; Кухар Е.В., 2006 г.) и показывают, что наибольший рост достигнут за 21 сутки.
Таким образом, из изложенного видно, что актуальной задачей современной биотехнологии является усовершенствование производства препаратов против трихофитии животных на основе интенсификации процесса глубинного культивирования гриба Trichophyton verrucosum.
Цель и задачи исследований. Целью исследований является разработка технологии культивирования гриба Trichophyton verrucosum в глубинных условиях на основе создания новой питательной среды и оптимизации условий развития.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи: разработать сбалансированный компонентный состав питательной среды для глубинного способа выращивания гриба Trichophyton verrucosum;
определить основные технологические параметры культивирования Trichophyton verrucosum в жидкой питательной среде: аэрация, температура, иноку лят;
исследовать влияние условий культивирования на динамику спорообразования гриба;
получить экспериментальные образцы глубинной биомассы гриба Trichophyton verrucosum и изучить их антигенные свойства на лабораторных животных;
обосновать экономическую целесообразность внедрения в производство глубинного культивирования гриба Trichophyton verrucosum для получения соответствующей вакцины.
Научная новизна. Впервые разработана технологическая схема культивирования Trichophyton verrucosum в глубинных условиях на новой питательной среде, содержащей картофельный отвар и минеральные компоненты, оптимизированы основные параметры культивирования гриба
(аэрация, температура, инокулят). Впервые с помощью электронной и световой микроскопии проведен сравнительный анализ морфологических особенностей микроорганизма, выращенного на агаризованной и жидкой средах.
Практическая значимость работы. Разработаны питательная среда, а также параметры и режимы для глубинного культивирования Trichophyton verracosum с целью получения биомассы гриба, являющейся основой иммунобиологического препарата. Практическая значимость разработанной технологической цепочки глубинного культивирования Trichophyton verracosum подтверждена в условиях ФГУП «Покровский завод биопрепаратов» в аппарате-ферментере КНТ-10, результаты производственных испытаний оформлены утвержденным актом испытаний. Результаты диссертации используются в НИЛ инфекционной патологии и биотехнологии ФГОУ ВПО МГАВМиБ в научно-исследовательской работе.
Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на научной конференции молодых ученых МГАВМиБ им. К.И.Скрябина, (2008)
Основные положения, выносимые на защиту:
состав питательной среды для культивирования Trichophyton verracosum;
технологические режимы культивирования гриба;
морфология мицелия гриба при развитии в глубинных и поверхностных условиях
антигенные свойства биомассы гриба, полученной глубинным методом культивирования.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 3 работы, в том числе 2- в журналах, рекомендованных ВАК РФ.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 122 страницах машинописного текста и включает следующие разделы: введение, литературный обзор, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы, сведения о практическом использовании результатов,
Похожие диссертации на Разработка технологии глубинного культивирования гриба Trichophyton verrucosum
