Введение к работе
Одной из причин, приводящих к нарушению формирования пола у мальчиков (НФП 46XY), является нарушение периферического действия андрогенов. К этой группе заболеваний, характеризующейся НФП при сохранной продукции тестостерона яичками, на данный момент принято относить две нозологические формы - синдром резистентности к андрогенам (СРА) и дефицит 5а-редуктазы второго типа (5-АРИ). Несмотря на то, что эти два состояния могут иметь аналогичные клинические проявления (отсутствие производных мюллеровых протоков при различной степени маскулинизации наружных гениталий, варьирующей от феминного строения до микропениса), в их основе лежат различные патогенетические механизмы.
СРА - заболевание, имеющее Х-сцепленный рецессивный характер наследования, представляет собой полную или частичную нечувствительность тканей к мужским половым гормонам. Дефицит 5-АРИ - аутосомно-рецессивная форма НФП 46XY, обусловленная дефектом периферической конверсии тестостерона (Т) в дигидротестостерон (ДГТ), более активный андроген, обладающий большим сродством к андрогеновому рецептору и играющий основную роль в формировании наружных гениталий у плода мужского пола. В период новорожденности, когда необходимо определить пол воспитания ребенка, дифференцировать по клинической картине эти состояния невозможно. При гормональном обследовании у пациентов с нарушением периферического действия андрогенов определяется нормальный или повышенный уровень Т. Диагностическим критерием для дефицита 5-АРИ считается повышенное соотношение Т/ДГТ в крови, который в норме не превышает 25. Однако, на данный момент разными авторами отмечена недостаточная информативность данного критерия, особенно у детей допубертатного возраста.
Патогенез СРА обуславливает выбор женского пола воспитания ввиду неэффективности терапии андрогенами во взрослом возрасте, в то время как при дефиците 5-АРП вероятное влияние Т на дифференцировку головного мозга во внутриутробном периоде и выраженная маскулинизация в пубертате, а также выраженный маскулинизирующий эффект от терапии, проведенной в раннем возрасте, делают предпочтительным выбор мужского пола воспитания.
Вклад этих заболеваний в структуру НФП 46XY в российской популяции изучен
недостаточно. В литературе имеются данные исследования гена AR лишь у небольшого
числа пациентов с НФП 46XY, которые были получены без учета секвенирования экзона
1. Молекулярно-генетическая верификация дефицита 5-АРИ ранее не проводилась: в двух исследованиях, основанных на результатах клинико-гормонального обследования больных с НФП 46XY, была отмечена высокая встречаемость дефицита 5-АРИ, составившая 46% и 61% .
В настоящем исследовании среди российских пациентов с НФП 46XY нами была оценена встречаемость дефектов генов AR и SRD5A2 в структуре нарушения периферического действия андрогенов. Выявление молекулярных дефектов указанных генов проводилось по результатам полного секвенирования их кодирующих последовательностей и примыкающих фрагментов интронов.
Цель исследования:
Исследовать роль дефектов генов AR и SRD5A2 в структуре НФП 46XY, обусловленных нарушением периферического действия андрогенов.
Задачи исследования:
Среди больных с НФП 46XY по клинико-гормональным критериям (включая ЖХ-МС/МС) выделить группу пациентов с нарушением периферического действия андрогенов
Оценить распространенность дефектов генов AR и SRD5A2 при НФП 46XY, обусловленного нарушением периферического действия андрогенов
Оценить роль гормональных методов исследования в дифференциальной диагностике синдрома нарушения периферического действия андрогенов
Провести анализ корреляции генотип-фенотип в группе пациентов с выявленными мутациями
Научная новизна:
Впервые в России проведено полное исследование кодирующей последовательности гена AR у 77 пациентов с нарушением периферического действия андрогенов. Выявлено 24 мутации у 29 пациентов с нарушением периферического действия андрогенов. Из 24 выявленных мутаций в гене AR 12 мутаций (50%) были ранее описаны и 12 (50%) описываются впервые. Наибольшее число мутаций нами было выявлено в ранее не исследовавшемся экзоне 1, что составило 25%.
Доказано отсутствие достоверных гормональных критериев дифференциальной диагностики различных форм нарушений формирования пола с сохранной секрецией тестостерона в допубертатныи период, в том числе доказана неинформативность определения соотношения Т/ДГТ у пациентов допубертатного возраста.
Впервые в России описаны случаи дефицита 5-АРИ (3 пациента) с молекулярно-генетическим подтверждением диагноза. Показана низкая частота данного заболевания в структуре НФП 46XY.
В ходе работы также было выявлено два пациента с дефицитом 17(3-гидроксистероиддегидрогеназы 3 типа (17ГСДЗ), наблюдавшиеся ранее с диагнозом «синдром резистентности к андрогенам, неполная форма». Диагноз был подтвержден молекулярно-генетически.
Практическая значимость:
Показано, что при нарушении периферического действия андрогенов 41,6% случаев НФП 46XY с неоднозначным строением гениталий вызваны дефектами генов AR и SRD5A2, остальные случаи требуют уточнения причин данного состояния и поиска других патогенетических факторов.
Исследование гормонального профиля (включая определение соотношения Т/ДГТ) не позволяют провести дифференциальную диагностику между СРА и дефицитом 5-АРИ, таким образом всем пациентам с НФП 46XY с сохранной секрецией Т показано последовательно исследовать гены AR и SRD5A2.
На основании полученных данных разработан алгоритм дифференциальной диагностики заболеваний у пациентов с НФП 46XY.
Полученные данные могут быть использованы для проведения пренатальной диагностики в семьях с верифицированным прежде молекулярно-генетическим диагнозом.
Апробация работы.
Основные результаты исследования по материалам диссертации доложены на всероссийском конгрессе "Современные технологии в эндокринологии" (23-26 ноября 2009, г. Москва), на VI Съезде Российского общества медицинских генетиков (14-18 мая 2010 г, г. Ростов-на-Дону), на конгрессе «Молекулярные основы клинической медицины, возможное и реальное» (6-9 июня 2010 г, г. Санкт-Петербург). Диссертация апробирована на межотделенческой конференции ФГУ ЭНЦ Росмедтехнологий (17 декабря 2010 года).
Публикации.
По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ, в том числе 3 статьи в журнале, рецензируемом ВАК РФ.
Объем и структура диссертации.
Диссертация изложена на 107 страницах машинописного текста, состоит из введения, 4 глав (обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения), выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 7 отечественных и 126 зарубежных источника. Работа содержит 15 таблиц и 21 рисунок.
Похожие диссертации на Молекулярно-генетические и клинические варианты синдрома резистентности к андрогенам
![Эпидемиология, факторы риска вариантов синдрома дезадаптации сердечно-сосудистой системы у доношенных новорожденных и его отдаленные последствия [Электронный ресурс]](/i/i/4471/210397.png "Эпидемиология, факторы риска вариантов синдрома дезадаптации сердечно-сосудистой системы у доношенных новорожденных и его отдаленные последствия [Электронный ресурс] Дарвиш Аббас Абдаллах")
![Вкусовая чувствительность к поваренной соли и экскреция натрия у подростков с нипертензивным вариантом синдрома вегетативной дистонии [Электронный ресурс]](/i/i/4438/210730.png "Вкусовая чувствительность к поваренной соли и экскреция натрия у подростков с нипертензивным вариантом синдрома вегетативной дистонии [Электронный ресурс] Гнатенко Эдуард Павлович")
