Введение к работе
Актуальность темы. Эндотелиальная дисфункция (ЭД) рассматривается как предиктор целого ряда заболеваний, в том числе артериальной гипертензии, ишемической болезни сердца, хронической сердечной недостаточности, а также является патогенетическим компонентом органных повреждений при сахарном диабете, гипоэстрогенных и других состояниях (Бабак О.Я., 2005; Билецкий СВ., 2008).
Согласно современным представлениям, в основе эндотелиальной дисфункции лежит нарушение метаболизма главного вазодилатирующего агента -оксида азота (N0). В организме источником оксида азота служит L-аргинин. В цикле мочевины метаболизм L-аргинина протекает по двум путям. Первый путь катализирует фермент аргиназа, под действием которого L-аргинин гидролизи-руется в орнитин и мочевину. Другой путь превращения L-аргинина - в оксид азота и цитруллин - катализируется NO-синтазой. Оба фермента конкурируют между собой за общий субстрат L-аргинин. По данным современных исследований, аргиназа по своей активности в тысячу раз превышает NO-синтазу. Таким образом, L-аргинин расходуется на синтез орнитина и мочевины, и лишь небольшая часть - на синтез NO. Возможность блокады аргиназы, позволила бы в значительной мере увеличить биодоступность оксида азота (Bagnost Т., 2010; Ryoo S., 2008).
Наименее изученным среди ингибиторов аргиназ остается L-норвалин. L-норвалин (2-аминопентановая кислота) - неметаболизирующийся аналог L-валина, по данным ряда исследователей, один из самых мощных неселективных ингибиторов аргиназы. Нами использована субстанция производства WI-RUD GmgH, Hamburg (Ming X.-F., 2009).
«Блоктран A» - комплексный препарат, содержащий 50 мг лозартана калия и 5 мг амлодипина, проходящий доклиническое исследование заводом «Фармстандарт-Лексредства», г. Курск.
Таким образом, существует необходимость фармакологического изучения эндотелиотропных свойств ингибитора аргиназы L-норвалина в комбинации с кардиотропными препаратами с доказанной эндотелиотропной активностью.
Номер государственной регистрации темы - 01201151655.
Цель исследования: провести комплексное изучение эндотелио- и кар-диопротективного действия сочетанного использования ингибитора аргиназы L-норвалина и препарата «Блоктран А» (50 мг лозартана калия + 5 мг амлодипина) при моделировании L-NAME- и гипергомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции.
Задачи исследования:
Изучить эндотелио- и кардиопротективную активность L-норвалина, лозартана, амлодипина и комбинированного препарата «Блоктран А» в качестве монотерапии при моделировании L-NAME-индуцированной эндотелиальной дисфункции.
Изучить эндотелио- и кардиопротективную активность сочетанного применения L-норвалина и препарата «Блоктран А» при моделировании L-NAME-индуцированной эндотелиальной дисфункции.
Изучить эндотелио- и кардиопротективную активность L-норвалина, лозартана, амлодипина и комбинированного препарата «Блоктран А» в качестве монотерапии при моделировании гипергомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции.
Изучить эндотелио- и кардиопротективную активность сочетанного применения L-норвалина и препарата «Блоктран А» при моделировании гипер-гомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции.
Провести интегральный векторный анализ гемодинамических и биохимических показателей для комплексной оценки эндотелио- и кардиопротектив-ной активности сочетанного применения L-норвалина и комбинированного препарата «Блоктран А».
Научная новизна исследования. В работе впервые предложен способ фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции при моделировании дефицита оксида азота с использованием L-норвалина и комбинированного антигипертензивного препарата с доказанной эндотелиотропной активностью «Блоктран А» (50 мг лозартан калия и 5 мг амлодипина в одной таблетке). В работе впервые показано,что L-норвалин в дозе 10 мг/кг при сочетанном использовании с комбинированным препаратом «Блоктран А» (0,16 таб./кг, что соответствует 8 мг/кг лозартана и 0,8 мг/кг амлодипина) оказывают аддитивное эндотелиопротективное действие при однократном внутрижелудочном введении в течение 7 суток при моделировании как L-NAME-индуцированной, так и гипергомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции. Таким образом, в работе впервые представлены убедительные доказательства необходимости дополнительной эндотелиотропной терапии с использованием L-норвалина и нового комбинированного антигипертензивного препарат «Блоктран А» для коррекции нарушений метаболического пути L-аргинин/Ж).
Практическая значимость. В работе установлена и обоснована эффективность сочетанного применения L-норвалина с комбинированным препаратом «Блоктран А» для коррекции L-NAME- и гипергомоцистеин-индуцированного дефицита оксида азота в эксперименте. Показано, что их со-четанное использование позволяет улучшать изменение соотношения сосудистых реакций на ацетилхолин (эндотелийзависимая вазодилатация) и нитро-пруссид (эндотелийнезависимая вазодилатация) с уменьшением коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД), который в 5 раз увеличивается при L-NAME- и в 3 раза - при гипергомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции, предотвратить снижение показателей биохимических маркеров (Total NO) и повышение концентрации гомоцистеина.
Проведены целенаправленные доклинические исследования эндотелио-протективных эффектов препарата «Блоктран А» (производства ОАО «Фарм-стандарт-Лексредства», г. Курск) при ЭД.
Полученные данные позволяют рекомендовать целенаправленные клинические испытания L-норвалина, препарата «Блоктран А», а также сочетанного применения L-норвалина и препарата «Блоктран А».
Внедрение результатов научных исследований. Данные экспериментального исследования, имеющие отношение к эндотелио- и кардиопротектив-
ной активности L-норвалина и его комбинации с препаратом «Блоктран А» (производства ОАО «Фармстандарт-Лексредства», г. Курск), используются в обучающих лекционных курсах кафедры фармакологии ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, кафедры фармакологии и фармацевтических дисциплин ИПМО ФГАОУ ВПО НИУ БелГУ и кафедры фармакологии, клинической фармакологии и фармации медицинского института ФГБОУ ВПО «Орловский государственный университет».
Личный вклад автора. Автором проанализированы отечественные и зарубежные источники по теме диссертационного исследования, проведены серии экспериментов, получены и обобщены результаты исследования, проведена статистическая обработка и анализ полученных данных (доля участия 100%).
В публикациях в соавторстве доля участия диссертанта более 80%.
В публикациях № 1, 2, 3 автором лично проведена статистическая обработка полученных результатов, № 5, 6, 7 - моделирование дизайна исследования, в публикации № 4, 5 - научное обоснование и обобщение полученных результатов.
Апробация работы. Материалы диссертационной работы представлены на 75-й и 76-й итоговых межвузовских научных конференциях студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность» (Курск, 2010, 2011), Всероссийской научно-практической конференции «Биомедицинская инженерия и биотехнология» (Курск, 2010, 2011), V конгрессе «Рациональная фармакотерапия и клиническая фармакология» (Санкт-Петербург, 2010) молодежном научно-инновационном конкурсе «У.М.Н.И.К.» (Белгород, 2010), Всероссийском молодежном научно-инновационном форуме «Зворыкинский проект» (2010), на межвузовской научно-практической конференции с международным участием «Актуальные вопросы фармакологии и фармации - 2011» (Белгород, 2011). Апробация диссертации проведена на научно-практической конференции кафедр фармакологии, клинической фармакологии, внутренних болезней № 2, анатомии человека, биологической химии, инфекционных болезней и эпидемиологии, НИИ экологической медицины Курского государственного медицинского университета; фармакологии и фармацевтических дисциплин ИПМО ФГАОУ ВПО НИУ БелГУ. По материалам диссертации опубликовано 12 печатных работ в том числе 7 работ в журналах, рекомендуемых ВАК для диссертационных работ.
Положения, выносимые на защиту
Лозартан калия 8 мг/кг, амлодипин 0,8 мг/кг, препарат «Блоктран А» (лозартан калия 8 мг/кг+ амлодипин 0,8 мг/кг) однократно в течение 7 суток оказывают выраженное эндотелио- и кардиопротективное действие на модели L-NAME-индуцированной ЭД.
L-норвалин 10 мг/кг, сочетанное использование L-норвалина 10 мг/кг и препарата «Блоктран А» (лозартан калия 8 мг/кг + амлодипин 0,8 мг/кг) однократно в течение 7 суток оказывают выраженное эндотелио- и кардиопротективное действие на модели L-NAME-индуцированной ЭД.
Лозартан калия 8 мг/кг, амлодипин 0,8 мг/кг, препарат «Блоктран А» (лозартан калия 8 мг/кг+ амлодипин 0,8 мг/кг) однократно в течение 7 суток оказывают выраженное эндотелио- и кардиопротективное действие на модели гипрегомоцистеин-индуцированной ЭД.
L-норвалин 10 мг/кг, сочетанное использование L-норвалина 10 мг/кг и препарата «Блоктран А» (лозартан калия 8 мг/кг + амлодипин 0,8 мг/кг) однократно в течение 7 суток оказывают выраженное эндотелио- и кардиопротективное действие на модели гипергомоцистеин-индуцированной ЭД.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов исследования, обсуждения полученных результатов, выводов и списка используемой литературы, включающего 183 источника, из них 77 отечественных и 106 зарубежных авторов. Диссертация изложена на 143 страницах машинописного текста, содержит таблиц - 20, рисунков - 29. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
