Содержание к диссертации
ВВЕДЕНИЕ 6
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 13
1.1 Антигены Burkcholderia pseudomallei и перспективы разработки на их основе препаратов для специфической профилактики мелиоидоза 13
1.2 Общее представление в системе цитокинов. Цитокины в патогенезе мелиоидозной инфекции 20
1.3 Рекомбинантные цитокины: применение в инфекционной патологии 29
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 37
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 37
2.1 Штаммы буркхольдерий, питательные среды 37
2.2 Антигенные комплексы 37
2.3 Экспериментальные животные 38
2.4 Перевиваемые клеточные линии, инфузории 38
2.5 Методы получения лимфокинов и монокинов 40
2.6 Методы изучения биологической активности лимфокинов и монокинов 41
2.7 Препараты рекомбинантных цитокинов 43
2.8 Оценка иммуногенности и протективности антигенов 44
2.9 Статистическая обработка результатов 46
Глава 3. ЦИТОКИНИНДУЦИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ АНТИГЕННЫХ КОМПЛЕКСОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ МЕЛИОИДОЗА 47
3.1 Тестирование токсичности антигенов на разных типах клеток 47
3.2 Биологическая активность монокинов и лимфокинов 54
3.3 Иммуногенные, иммунотропные и цитокининдуцирующие свойства антигенов и их взаимосвязь с протективностью 58
Глава 4. ВЛИЯНИЕ МОНОКИНОВ И ЛИМФОКИНОВ НА ИММУНОГЕННЫЕ И ПРОТЕКТИВНЫЕ СВОЙСТВА МЕЛИОИ ДОЗНЫХ АНТИГЕНОВ 63
4.1 Динамика иммунного ответа на мелиоидозные антигены при совместной иммунизации с лимфокинами и монокинами 63
4.2 Протективные свойства мелиоидозных антигенов при изолированном и совместном с лимфокинами и монокинами применении
Введение к работе
Актуальность проблемы. В настоящее время наблюдается тенденция к увеличению числа больных васкулитами кожи. Наиболее часто вас-кулиты кожи регистрируются у лиц молодого и зрелого трудоспособного возраста, отличаются упорным хроническим, рецидивирующим течением, резистентностью к традиционным методам лечения, и поэтому, сохраняется актуальность дальнейшего изучения этого вида [88, 89, 90, 119, 160, 195, 227].
Многочисленные исследования посвящены вопросам этиологии, патогенеза, патоморфологии, классификации, клиники и лечения васкулитов кожи [10,37,42,62,118,160, 165, 192, 220, 222, 252, 263, 316 и др.].
Большинство исследователей считают васкулиты кожи полиэтиологическим заболеванием. Доказана ведущая роль иммунных нарушений, очаговой инфекции, аллергических реакций в развитии патологического процесса при васкулитах кожи [88, 160, 163, 165, 223, 227, 263, 288].
Получены данные, подтверждающие роль нарушений липидного обмена в патогенезе некоторых форм васкулитов кожи [30, 36, 37, 38, 42].
Однако в исследованиях патогенетических механизмов васкулитов кожи до сего времени просматривалась некая "изолированность" их оценки, при этом полученные результаты указывали лишь на саму возможность влияния, не давая ответа на вопрос об изменениях на уровне основных регулирующих систем организма, которые во многом определяют низкую эффективность, а порой и безуспешность традиционных методов лечения. В этой связи, в последние годы акцент в работах по изучению основных закономерностей формирования любого патологического процесса все больше смещается к изучению роли главных адаптационных систем организма (антиоксидантной и иммунной], объединенных в единый структурно-функциональный блок [2, 40, 349].
Известно, что в реализации функциональных возможностей адаптационно-приспособительных систем организма принимают участие многие молекулярно-биохимические механизмы, среди которых наибольшей значимостью обладают свободно-радикальные процессы. Активация перекис-ного окисления липидов (ПОЛ), по-видимому, составляет ключевое звено процесса на клеточном уровне, приводящее к нарушению метаболизма клетки [144, 145, 300].
В серии клинических работ отечественными дерматологами была убедительно продемонстрирована роль ПОЛ вы патогенезе таких дерматозов, как псориаз, экзема, нейродермит, крапивница, красная волчанка, склеродермия и др. [3, 6, 54, 59, 60, 81, 173].
Единичные исследования посвящены изучению патогенетической роли процессов ПОЛ при глубоких васкулитах кожи [71].
Важным фактором нарушения гомеостаза является эндогенная интоксикация, которая обусловлена накоплением в крови биологически активных компонентов в результате катаболических процессов при снижении эндогенной детоксикации [67, 86, 149, 232].
Универсальным маркером эндогенной интоксикации являются средние молекулы (СМ), содержащиеся в крови и других биологических жидкостях.
В ряде клинических работ подтверждена роль эндогенной интоксикации, которая сопровождалась повышением уровня СМ в крови больных экземой, нейродермитом, токсикодермией [60, 81, 169, 182].
Вместе с тем, до настоящего времени отсутствует комплексный подход к изучению роли иммунологических сдвигов, процессов липоперокси-дации в в формировании липидного дисбаланса, эндогенной интоксикации в патогенезе васкулитов кожи.
Недостаточная проработанность вышеперечисленных проблем позволили нам сформулировать цель и задачи исследования.
Цель: повысить эффективность лечения больных поверхностными и глубокими васкулитами кожи на основе комплексного изучения клинического иммунологического и биохимического статусов организма.
Задачи исследования:
1. Изучить клинико-лабораторные особенности больных поверхностными и глубокими васкулитами кожи.
2. Выявить характер нарушений иммунной системы у данной категории больных.
3. Провести исследование липидного обмена и уровня эндогенной интоксикации у больных васкулитами кожи.
4. Установить взаимосвязь интенсивности процессов ПОЛ с активностью фермента антиоксидантной защиты супероксиддисмутазы (СОД) у больных васкулитами кожи.
5. Разработать патогенетические вариантв терапии и внедрить в практику.
Научная новизна.
Впервые на основе комплексного подхода к изучению патогенеза васкулитов кожи выявлена взаимосвязь степени тяжести дерматоза с особенностями иммунного статуса, состояния системы «перекисное окисление липидов - антиоксидантная защита» («ПОЛ - АОЗ») и эндогенной интоксикации.
Установлено, что на фоне однотипных иммунологических сдвигов, обнаруживаются различия в формировании иммунного ответа в виде резкого увеличения супрессорной субпопуляции Т-лимфоцитов при поверхностной и снижения при глубокой форме дерматоза.
Обнаружена зависимость тяжести течения заболевания от степени выраженности дисбаланса в системе «ПОЛ - АОЗ», проявляющийся высокой интенсивностью ПОЛ при одновременном снижении ферментативной активности супероксиддисмутазы. Впервые в комплексном лечении больных васкулитами кожи использованы синтетический индуктор эндогенного интерферона циклоферон и синтетиченский антиоксидант эмоксипин, позволившие повысить эффективность терапии.
Практическая значимость.
Доказана значимость изучения иммунного статуса, показателей системы «ПОЛ - АОЗ» у больных васкулитами кожи. Разработан комплексный метод лечения больных поверхностными и глубокими васкулитами кожи, который способствует клиническому выздоровлению подавляющего числа пациентов, сокращению длительности стационарного лечения, предупреждению рецидивов заболевания и увеличению сроков ремиссий.
Внедрение результатов.
Разработанный комплексный метод лечения больных внедрен в практическую деятельность Белгородского областного, Воронежского областного и городского кожно-венерологических диспансеров. Материалы диссертации используются в учебном процессе при обучении студентов и подготовке врачей дерматовенерологов на кафедре дерматовенерологии Воронежской государственной медицинской академии им. Н. Н. Бурденко.
Апробация работы.
Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на:
Научно-практической конференции молодых ученых и студентов Воронежской государственной медицинской академии им. Н. Н. Бурденко (1996, 1998, 2000 гг).
Республиканской научно-практической конференции "Внедрение и развитие лазерной медицины" [Воронеж, 1999, 2000 г. г.].
Заседаниях Воронежского филиала Российского научного общества дерматовенерологов (1997, 1999, 2001 гг).
Материалы диссертации в завершенном виде заслушаны и обсуждены на совместном заседании кафедр дерматовенерологии, пропедевтики внутренних болезней, микробиологии с клинической иммунологией и биологии с экологией.
Публикации.
По теме диссертации опубликовано 15 научных работ. Разработаны два рационализаторских предложения № 2398 и № 2399 от 28.06.99 г., которые зарегистрированы в патентном бюро Воронежской государственной медицинской академии им. Н. Н. Бурденко.
Структура и объем работы.
Диссертация состоит из введения, шести глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы, включающего 363 источника (из них 240 на русском и 123 на иностранных языках). Работа изложена на 139 страницах, включает 34 таблицы и 43 рисунка.
