Введение к работе
, В настоящее время ведется активное изучение роли цитоккнов в Физиологических и патологических реакциях организма.Показано, что данный класс веществ перспективен в использовании в качестве фармакологических средств для лечения различных заболеваний. Важной проблемой является поиск лекарственных средств, позволяющих регулировать регенераторные продессы: ускорять вялотекущее заживление рая и предотвращать образование грубых рубцов.Особую актуальность эта проблема приобретает в офтальмологии,поскольку посттравматкческое рубцевание даже при относительно небольшом повреждении глаза может вести к существенному нарушению зрения. При разработке лекарственных препаратов на основе иитоки-нов возникают две основные проблемы. Во-первых, исследователи часто вынуждены работать не с естественными цитокинами, а с им-мунопептидами, получаемыми с применением рекомбииантной технологии. Такие белки не только не всегда обладают необходимыми биологическими свойствами, но и зачастую являются токсичными. Во-вторых, цитокины вырабатываются в пнкомолярных количествах, поэтому процесс получения чистых препаратов индивидуальных ци-токииов крайне затруднен.
' нетод аутолимфокинотерапии,разработанный на кафедре иммунологии prw, позволяет успешно реаить обе проблемы.D качестве лечебного препарата используется комплекс кмиунопептидов, вырабатываемых клетками периферической крови пациентов при стимуляции ФГА. комбинация цитокиноз, секретируемых клетками после стимуляции,обладает более выраженным действием,чем каждый отдельный компонент, кроме того,поскольку источником нммунопептн-
лов служат аутологичкые клетки пациента, препарат требует минимальной очистки, показана эффективность применения естественного комплекса цитокинов в лечении воспалительных заболеваний че-люстно-лицевой области (Ковальчук Л.В.«Ганковская Л.В.,1990), кожно-фасциальных ран в эксперименте (Ковальчук Л.В..Ганковская Л.В.,Баярт Б.,1989).
Вышеизложенные данные свидетельствуют об актуальности разработки методов получения естественного комплекса цитокинов, и изучения его влияния на воспалительные и регенераторные процессы при повреждении роговицы.
Целью данного исследования явилось изучение механизмов влияния естественного комплекса цитокинов, секретируемых клетками периферической крови после стимуляции ФГА, на процессы заживления при повреждении роговицы, а также разработка оптимальной методики получения препарата на основе данного комплекса цитоканов. В связи с этим были поставлены следующие конкретные задачи:
1)Получение и частичная характеристика комплекса цитокинов, секретируемых клетками периферической крови, с использованием методов высокоэффективной жидкостной хроматографии и имму-ноферментного анализа.
2)Изучение механизмов влияния эндогенного комплекса'цито- ' кинов на процессы .заживления ранений роговицы.
3)Ограниченные клинические испытания метода аутолимфокино-
терапии в группе пациентов с повреждениями роговицы различной
этиологии. '''..'.
4)Определение содержания некоторых цитокинов (ШЫв.ФНОа,) в слезной жидкости в норме и при патологии.
В данной работе впервые проведено изучение влияния естественного комплекса цитокинов, вырабатываемого мононуклеарными клетками и лейкоцитами периферической крови, на заживление ран роговицы глаза. Показано, что применение комплекса цитокинов, содержащего ИЛ-1р, ИЛ-2, ФН(Ц, ИФН-У и другие иммунопептиды, способствует усилению миграции нейтрофилов к очагу повреждения, ускоренно резорбции Фибрина, изменению пролиферативной активности фибробластов и снижений выработки ими коллагена.Впервые проведено определение концентрации цитокинов - ИЛ-Ів и ФНОа, в слезной жидкости человека в норме и при патологии. Показана зависимость выработки фНОа^ от степени развития деструктивных изменения тканей глаза. Установлено, что наличие ФНСЦ в слезной жидкости до операции свидетельствует о повышении риска развития послеоперационного воспаления.
В данной работе показано, что естественный комплекс цитокинов является перспективным лекарственным средством, способным предотвращать образование грубых рубцов роговицы после травмы. Разработка лекарственного препарата, позволяющего ускорить заживление раны я подавить процессы фиброгенеза в очаге повреждения, является актуальной проблемой.Полученные в работе данные позволяют выработать оптимальну» схему производства лекарственного препарата на основе естественного комплекса цитокинов, секретяруемых лейкоцитами периферической крови.Автором получено положительное решение на изобретение " Способ предупреждения грубого рубцевания роговицы "(NO4950578/14 от 30.07.92 г.).
Диссертация апробирована на заседании секции Ученого совета института Иммунологии Министерства здравоохранения и медицинской промышленности РФ 12.04.94 г.
ПУБЛИКАЦИИ.По материалам диссертации опубликовано 4 работы.
ОВЬЕМ И СТРУКТУРА диссертации.Диссертация изложена Hajif? страницах машинописного текста,состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, 4 глав собственных исследований, заключения и выводов. Указатель литературы включает 215 источников, в том числе 11 отечественных и 204 зарубежных. Диссертация иллюстрирована 19 рисунками и в таблицами.
