Введение к работе
_ /
.Актуальность проблемы. Прошло 15 лет после "ДЕ ЮРЕ" признания *ротавирусов,.как основных этиологических агентов острых гастроэнтеритов, "ДЕ ФАКТО" эти вирусы были открыты значительно раньше у некоторых видов млекопитающих, однако медицинские вирусологи, в течение почти двух десятилетий игнорировали или, по всей вероятности, не замечали этих сообщений, считая ротавирусы патогенами исключительно животных. Ирония заключается в том, что в дальнейшем благодаря морфологической идентичности и близкого антигенного родства с ротавирусами человека, а также единого механизма патоиішуногекеза, именно ротавирусы животных и вызываемые ими инфекции стали модельными объектами для широких исследований в этой области. Этому во многом способствовал и тот факт, что ротавирусы человека при применении традиционных методов культивирования ке размножались в клетаках in vitro и в течение нескольких лет их поддерживали в гетерологической
СИСТеМе ІП 1/ivO
В настоящее время на вызэдает сомнекзя, что ротавирусы являются важными патогекамп человека, особенно детей, проявляя строго дифферакцнровагашй тропззи в отнопеиия энтероцатсв тонкого отдела кишечника. Известно, что около 50-всех случаев гастроэнтерита у детей в экономически развитых странах вызываются ротавирусами. Убикватсрная природа этих вирусов обуславливает их шарокую циркуляцию в природе. Она поражают не только человека, но н молодняк сацых различных вздов яавоткых. В связи с этим разработке эффективных вакцинных препаратов против ротаваруснзх нкфекцяй прадается исключительно важное значение.
Наряду с разработкой средств профилактика вирусных гастроэнтеритов необходимо изыскание высокочувствительных T6CV-CSC-
тем, пригодных как для идентификации вируса и вирусного антигена, так и для обнаружения специфических антител в сыворотке крови и различных биологических секретах. Эти же методы пригодны для оценки иммунного статуса.
В последние годы в самых различных областях медицины стали широко применять методы иммуноферментного анализа (ИФА), позволяющие определить широкий спектр биологических соединений - от низко молекулярных гормонов, до вирусных и бактериальных антигенов. ИФА - наиболее специфичный и универсальный тест, отличающийся шсокой чувствительностью, удобный для автоматизации и стандартизации реагентов. Возможность визуального учета реакции делг.зт его доступным для лабораторий любого класса.
Лишний раз подчеркивая актуальность разработки высокоэффективных средств экспресс-диагностики вирусных гастроэнтеритов, следует уделить особое внимание дальнейшему усовершенствованию аналитических тест-систем необходимых для широкомасштабного скрининга исследуемых проб, а также для оптимизации различных схем и способов иммунизации животных. Это направление исследований активно развивается в настоящее время.
Цель и задачи исследования. Цель диссертационной работы разработка эффективных средств экспресс-диагностики ротавирус-ных инфекций.
В соответствии с этим в задачи исследования входило: -Изучить структурно-топографическую организацию ротавирусов. Для этого необходимо было предварительно отработать высокоэффективные и хорошо воспроизводимые методы культивирования, концентрирования и очистки ротавирусов и их субъединичных компонентов .
-Разработать высокоспецифические, высокочувствительные
тест-системы иммуноферментного анализа для выявления ротавирус-ных антигенов, пригодных для контроля вирусного сырья. -Разработать высокочувствительные, высокоспецкфяческие тест-
-системы для количественного определения ротавирусоспецифичес-
ких антител.
![Конструирование иммуноферментных тест-систем на основе авидин-биотинового взаимодействия для определения антител (дифтерийных, столбнячных, коклюшных, анти-HBs) [Электронный ресурс]](/i/i/4438/210884.png "Конструирование иммуноферментных тест-систем на основе авидин-биотинового взаимодействия для определения антител (дифтерийных, столбнячных, коклюшных, анти-HBs) [Электронный ресурс] Вязникова Татьяна Владимировна")