Получение иммунопотенциирующей системы на основе липосомальной формы бактериального липополисахарида Кошкина, Надежда Владимировна

Введение к работе

Актуальность проблемы. В натоящее время получили развитие исследования по разработке вакцин на основе липополисахарида (ЛПС) грамотрицателышх бактерий. Однако использование нативного ЛПС в качестве иммуногена затруднено из-за его высокой токсичности. При включении ЛПС в липосомы можно значительно снизить токсичность ЛПС, сохранив при этом его адъювантную активность. Возможность снижения токсичности или аллергических реакций антигенов при включении их в липосомы показана в ряде исследований (Gregoriadis G. 1990, Dijkstra J. 1989, Alving 0. 1992).

Кроме того, известно, что для индукции иммунного ответа на короткие синтетические пептиды их необходимо ковалентно связывать с белковым носителем (Ida G. 1988). Попытки усилить иммунный ответ на пептидный антиген при включении его в липосомы проводились ранее. К сожалению, собственного адъювантного действия липосом в таких конструкциях не обнаруживалось или этот эффект был слабо выражен. Включением в липосомы одновременно мощного адъюванта, в частности ЛПС, и неиммуногенных в свободном состоянии синтетических или рекомбинантных пептидов, возможно индуцировать иммунный ответ на пептидный антиген. Цель и задачи исследования.

Цель работы состоит в разработке метода получения липосомальной формы бактериального ЛПС и изучешш возможности использования такой конструкции в качестве иммунопотенциирущей системы.

Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:

I

1. Разработать метод, позволяющий полностью включать ЛПС,
выделенный из бактерий менингококков серогругшы В, в мембрану
липосом.

1. Изучить физико-химические характеристики липосомалыюго ЛПС.

2. Оценить иммунобиологические свойства липосомального ЛПС.

3. Создать иммунопотенциирующую систему на основе липосомальной формы ЛПС.

Научная новизна и практическая значимость проведенных

исследовании.

В результате проведенных исследований Сил разработан метод дегидратащш-регидратации (ДРВ), позволяющий практически полностью включать ЛПС, выделенный из бактерий Neisseria meningitidis серогрушш В, в лигшдный бислой липосом. Также разработаны методы контроля эффективности включения антигена в липосомы, и получен препарат в высушенном состоянии. Это позволяет длительно использовать его в стандартизованном виде.

Впервые было показано, что при включении ЛПС в липосомы происходит снижение его токсичности в системе in vitro в 1000 раз.

Показана возможность применения липосомальной формы ЛПС в качестве иммунопотенциирущей системы. Одновременное включение ЛПС и неиммуногенного пептида в липосомы способствовало развитию иммунного ответа на пептидный антиген.

Полученные данные могут быть использованы для получения липосомальной менингококковой вакцины, а также мультивалентных профилактических средств против инфекций, вызываемых грамотрицательными бактериями и малярийным плазмодием.

Положения, выносимые на защиту.

Разработанный метод получения лигосомальной формы ЛПС позволяет полностью.включать антиген в липосомы, и изменяет его физико-химические и иммунобиологические свойства.

Иммунопотенциирующий комплекс на основе лигосомальной формы бактериального ЛПС способствует индукции иммунного ответа на неиммуногенный синтетический пептид при одновременном включении .ЛПС и пептида в липосомы.

Апробация работы.

Результаты исследований, представленных в данной работе, доложены на всероссийских и международных конференциях: на всесоюзной конференции по проблемам менингококковой инфекции и гнойных менингитов (Новосибирск, 1990), на VII международной конференции по патогенным нейссериям (Берлин, 1990), на международной конференции по лшюсомам (Санкт-Петербург, 1993).

Диссертация апробирована на научной конференции отдела средств и методов иммунопрофилактики и .иммунодиагностики НИИ вакцин и сывороток им И.И.Мечникова РАШ.

Объеи и структура диссертации

диссертация включает введение, три главы обзора литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы и список литературы. Работа содержит 89 страниц машинописного текста, 9 таблиц и 9 рисунков. Список литературы содержит 172 источника.

Похожие диссертации на Получение иммунопотенциирующей системы на основе липосомальной формы бактериального липополисахарида

Получение и характеристика моноклинальных антител к трийодтиронину и создание тест-системы на их основеОкунева, Татьяна Олеговна

Получение моноклональных антител к адгезивному антигену К88 E. Coli и разработка на их основе диагностической тест-системыОспанова, Сауле Гельмановна

Разработка технологии получения растворимой формы тромбопластинового реагентаРепнякова Евгения Михайловна

Оптимизация технологии получения жидкой формы иммуноглобулина для внутривенного введенияМостовская Елена Викторовна

Природные \Na-интерферон и антибактериальный пептидный комплекс: технология получения, новые лекарственные формы, оценка эффективностиВолкова Лариса Владимировна

Получение иммунохимических реагентов для определения Сl-ингибитора и Clq компонетов системы комплемента человека и некоторые аспекты их клинического примененияРозина, Марина Николаевна

Конструирование иммуноферментных тест-систем на основе авидин-биотинового взаимодействия для определения антителВязникова Татьяна Владимировна

Конструирование иммуноферментных тест-систем на основе авидин-биотинового взаимодействия для определения антител (дифтерийных, столбнячных, коклюшных, анти-HBs) [Электронный ресурс]Вязникова Татьяна Владимировна

Разработка системы оценки иммунотропных препаратов природного и синтетического происхождения на основе анализа взаимосвязи иммунной и антиоксидантной защитыТутельян Алексей Викторович

Научные основы создания системы реабилитации лиц с различными формами зависимости (никотиновая, алкогольная, наркомания, токсикомания) и медико-экономические оценки ее эффективности [Электронный ресурс]Кулагин Алексей Владимирович