Введение к работе
Актуальность проблемы
Трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) является единственным методом излечения многих гемобластозов. Однако ее проведение связано с развитием тяжелых осложнений. Одним из основных осложнений алло-ТГСК является реакция трансплантат против хозяина (РТПХ), влияющая на качество жизни и продолжительность жизни больных после алло-ТГСК.
С 1980 года за счет уменьшения смертности от инфекционных осложнений увеличилась выживаемость пациентов после алло-ТГСК, однако частота рецидивов и частота развития РТПХ не изменились. Смертность, связанная с трансплантацией, напрямую зависит от степени тяжести развившейся РТПХ. Следует учитывать также, что РТПХ тесно связана с реакцией трансплантат против опухоли, и ее развитие значительно снижает риск рецидива заболевания.
С целью профилактики РТПХ применяют различные препараты, включая ингибиторы кальциневрина (циклоспорин А, такролимус), антиметаболиты (метотрексат, микофенолата мофетил), глюкокортикостероиды (преднизолон, метилпреднизолон), сиролимус, антитимоцитарный глобулин (АТГ), моноклональные антитела (алемтузумаб, даклизумаб), циклофосфамид. Действие иммуносупрессивных препаратов только на одно звено развития РТПХ приводит к недостаточной эффективности профилактики одним препаратом. Следствием же сочетанного применения препаратов является увеличение токсичности. Несмотря на проводимую профилактику, у 19–74% пациентов после алло-ТГСК развивается острая РТПХ II–IV степени и у 30–76% – хроническая РТПХ.
Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК) обладают уникальными иммуномодулирующими свойствами, которые были подтверждены in vitro и in vivo. Эти клетки могут быть культивированы, их источником могут служить костный мозг, жировая ткань, эмбриональная печень и др. При введении в организм ММСК не вызывают иммунного ответа. Эти характеристики сделали возможным применение ММСК в клинике. В настоящее время проводятся исследования по применению ММСК при таких заболеваниях, как боковой амиотрофический склероз, рассеянный склероз, язвенный колит, болезнь Крона, системная красная волчанка, полимиозит и дерматомиозит, сахарный диабет 2 типа. Множество исследований посвящено лечению РТПХ с помощью ММСК. В данной работе представлены результаты проспективного рандомизированного исследования по профилактике РТПХ с помощью ММСК в сравнении с классическими режимами.
Цель работы
Изучить эффективность профилактики реакции трансплантат против хозяина у больных гемобластозами после трансплантации аллогенных стволовых гемопоэтических клеток с помощью мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток донора.
Задачи исследования
1. Оценить эффективность введения мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток больным гемобластозами после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток в дозе 1x106/кг массы тела в период восстановления количества лейкоцитов до 1x109/л для профилактики острой реакции трансплантат против хозяина.
2. Изучить побочные эффекты введения мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток с целью профилактики реакции трансплантат против хозяина.
3. Оценить влияние введения мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток в период восстановления числа лейкоцитов на частоту развития хронической реакции трансплантат против хозяина.
4. Определить влияние введения донорских мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток на частоту развития посттрансплантационных рецидивов, инфекционных осложнений и отторжения трансплантата.
5. Проанализировать экспрессию генов интерлейкина 6, интерлейкина 10, фактора комплемента Н, индолеамин-2,3-диоксигеназы, простагландин Е синтетазы, макрофагального колониестимулирующего фактора в мультипотентных мезенхимальных стромальных клетках, полученных от разных доноров.
Научная новизна
В данной работе впервые представлены результаты проспективного рандомизированного исследования, в котором показана эффективность профилактики острой РТПХ у реципиентов алло-ТГСК от HLA-идентичных родственных доноров с помощью ММСК, полученных от донора гемопоэтических клеток. Подтверждена безопасность (отсутствие долгосрочных и угрожающих жизни осложнений) введения ММСК. Показано, что введение ММСК с целью профилактики РТПХ не увеличивает частоту рецидивов, инфекционных осложнений и отторжения трансплантата. Установлено, что введение ММСК в период восстановления числа лейкоцитов не влияет на частоту развития хронической РТПХ. Доказано, что ММСК, полученные от разных доноров, существенно различаются по экспрессии генов ИЛ-6, ИЛ-10, фактора комплемента Н, IDO1, КСФ1, PTGES. Повышенный уровень экспрессии ИЛ-6 в сочетании с повышением уровня экспрессии пероксисомного активированного пролифератором рецептора (PPAR) и возрастом донора старше 40 лет могут являться факторами, снижающими уровень иммуномодулирующей активности ММСК.
Практическая ценность работы
Предложен новый метод профилактики реакции трансплантат против хозяина. Эффективность этого метода значительно выше, чем у ранее применявшихся. Эффективная профилактика реакции трансплантат против хозяина позволит снизить затраты на лечение больных с данным осложнением, сократить длительность госпитализации после алло-ТГСК.
Внедрение результатов исследования в практику
Предложенный метод профилактики применяется в отделении высокодозной химиотерапии и трансплантации костного мозга ФГБУ ГНЦ МЗ РФ. Получен Патент РФ № 2454247 «Способ профилактики острой реакции трансплантат против хозяина после аллогенной трансплантации костного мозга».
Основные положения, выносимые на защиту
1. Введение ММСК в дозе 1x106/кг массы тела в период восстановления количества лейкоцитов до 1x109/л является эффективным методом профилактики острой РТПХ.
2. Введение ММСК в дозе 1x106/кг массы тела в период восстановления количества лейкоцитов до 1x109/л не влияет на частоту развития хронической РТПХ, рецидивов, инфекционных осложнений и отторжения трансплантата.
3. ММСК, полученные от разных доноров, существенно различаются по экспрессии генов, участвующих в иммунном ответе.
Структура работы
Диссертация изложена на 90 страницах машинописного текста, иллюстрирована 17 таблицами и 5 рисунками. Работа состоит из введения, трех глав, заключения, библиографического списка, включающего 165 источников.
