Введение к работе
Актуальность темы. В связи с широким распространением аллергических заболеваний во всем мире, с тенденцией к их увеличению, тяжелым течением и специфичностью лечения данной патологии (Гущин И.С., 2005; Ганонюк П.Я., 2008; Новиков Д.К., Выхристенко Л.Р., Смирнова О.В., 2008) совершенствование фармакотерапии аллергии по-прежнему является одной из приоритетных задач современной фармакологии (Балаболкин И.И., Ксензова Л.Д., Лукина О.Ф., 2008). В настоящее время аллергическими заболеваниями страдает от 10 до 20% населения развитых стран (Пухлик Б.М., 2007; Reisberg В., 2006), а в связи с развитием химической промышленности, урбанизацией, появлением огромного количества новых аллергенов, лекарственных средств, изменением характера питания людей, а также формированием наследственной предрасположенности к аллергическим заболеваниям во всем мире отмечается рост заболеваемости аллергией (Пухлик Б.М., 2007; Хаитов Р.М, 2008). В лечении атонических заболеваний применяют лекарственные средства различных фармакологических групп (Ельский В.Н., Зяблищев СВ., Селезнев К.Г., 2008), однако они не всегда являются достаточно эффективными, поэтому поиск веществ с высокой противоаллергической активностью сохраняет свою актуальность и сегодня (Новиков Д.К., Выхристенко Л.Р., Смирнова О.В., 2008; Хаитов P.M., Пинегин Б.В., 2003; Reisberg В., Boody R., Stofflcr А., 2006).
Существуют сведения о наличии тесной взимосвязи между иммунной и нервной системами (Boldyrev А.А., Kazey V.I., Leinsoo Т.А., 2004). Известно, что в развитии аллергических процессов принимает участие центральная нервная система (Абрамов В.В., 1988-2006; Лисяный Н.И., 2007). Имеются данные о том, что нарушения нормальных взаимоотношений между нейроэндокринной и иммунной системами способствуют возникновению аутоиммунных и аллергических заболеваний или определяют характер течения этих болезней (Абрамов В.В., 2006; Лисяный Н.И., 2007). Описано участие в аллергическом процессе ГАМК-, глутаматергиче-ских и опиоидергических механизмов (Takahashi J.L, Giuliani F., Power С., 2003; Аб-дурасулова И.Н., Сердюк С.Е., Кмиро В.Е., 2007; Костанян И.А. и соавт., 1997). Рецепторы различных нейромедиаторов, в том числе и нейроаминокислот обнаружены на мембранах иммунокомпетентных клеток (Лисяный Н.И., 2007). Наличие рецепторов глутаминовой кислоты на клетках иммунной системы позволяет считать глу-таминовую кислоту не только нейро-, но и иммунномедиатором (А.А.Болдырев с соавт., 2005).
В процессе аллергизации организма наряду со специфическими иммунологическими изменениями развивается выраженная тканевая гипоксия (Адо А.Д., 1998;
Александрова А.Е., 2005; Демидова М.А., Шатохина Н.А., Шнеур С.Я., 2006) и происходят существенные метаболические сдвиги. В частности, наблюдается активация реакций свободнорадикального окисления на фоне понижения активности антиоксидантних систем (Вахтерова Т.В., Сбоева С.Г., Давыдова О.Н., 2005; Демидова М.А., 1997-2006). Регистрируются выраженные изменения мембранных липидов клеток-мишеней аллергического процесса (Гущин И.С., 2003), в том числе фосфои-нозитидов и продуктов их метаболизма (Айтбаева Ж.Б., Тажибаева Д.С., Кобдуа-лиева Н.Б., 2008). Между тем известно, что фосфоинозитиды и их метаболиты принимают участие в реализации действия нейромедиаторов на молекулярном уровне (Суняйкина О.А., Павлова М.В., Суняйкин К.И., 2008; Reisberg В., Boody R., Stofflcr А., 2006), а также в процессах активации клеток-мишеней аллергического процесса (базофилов, тучных клеток) и иммунокомпетентных клеток (Слюсарь Н.Н., 1992-2007). При гидролизе полифосфоинозитидов происходит образование вторичных мессенджеров диацилглицеролов и инозитолтрифосфатов. Кроме того, эти липиды являются одними из поставщиков арахидоновой кислоты и эйкозаноидов (Ковалева В.Л., Чучалин А.Г., 1997; Айтбаева Ж.Б., Тажибаева Д.С., Кобдуалиева Н.Б., 2008). На метаболизм мембранных фосфоинозитидов оказывают влияние различные ней-ромедиаторы, в том числе нейроаминокислоты и их производные (Воронина Т.А., Гарибова Т.Л., 2004; Шнеур С.Я., 2007). Однако эффекты новых производных ней-роаминокислот в этом отношении изучены недостаточно.
С учетом роли центральной нервной системы и метаболических нарушений в патогенезе аллергии целесообразным представляется изучение влияния нейроами-нокислот и их производных на течение аллергических реакций. Многие производные нейроаминокислот наряду с центральным действием обладают рядом свойств, которые могут быть ценны для коррекции метаболических нарушений при аллергических реакциях. Известно, что ряд производных нейроаминокислот (глицина, у-аминомасляной и глутаминовой кислоты) обладают выраженной аитиоксидантной, мембраностабилизирующей и антигипоксической активностью (Макарова Л.М., 2006; Шнеур С.Я., 2007). Так, например, новый отечественный оригинальный препарат глутаминовой кислоты - нооглютил оказывает выраженное противогипокси-ческое действие на модели гиперкапнической гипоксии (Воронина Т.А., Гудашева Т.А., Островская Р.У., Воронина Т.А., Гарибова Т.П., 2004,2006). Производные глутаминовой кислоты (в частности новые отечественные препараты нооглютил, глу-таргин, акатинол, семакс) обладают целым рядом положительных эффектов, а именно — улучшают энергетический обмен через первичное накопление креатинфосфа-та, корригируют кислотно-основное состояние за счет нормализации щелочного за-
паса крови, оказывают антиоксидантное и мембраностабилизирующее действие благодаря угнетению перекисного окисления липидов, а также стабилизируют мембраны гепатоцитов за счет снижения активности цитолитических ферментов (Гарибова Т.Л., Воронина Т.А., Литвинова С.А., 2007). Таким образом, известные фармакологические свойства глутаминовой кислоты и ее производных дают основания для изучения их эффектов при экспериментальных аллергических реакциях.
Работа выполнена по плану научно-исследовательской работы ГОУ ВПО Тверской государственной медицинской академии (ТГМА) Росздрава в рамках научного направления "Фармакология аллергии". Тема исследования утверждена на заседании ученого совета ТГМА (протокол №10 от 12.12.2006г.).
Цель работы. Исследование влияния производных нейроаминокислот на течение экспериментальных аллергических реакций (in vivo и in vitro).
Задачи исследования. Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие конкретные задачи:
Исследовать влияние нейроаминокислот и их производных (нооглютил, но-опепт, пикамилон, нооклерин, глутаргин, семакс) на течение местной анафилактической реакции в эксперименте на животных (реакция активной кожной анафилаксии у крыс).
Оценить влияние нейроаминокислот и их производных на развитие анафилаксии in vitro (в тесте прямой реакции дегрануляции базофилов крови кроликов).
Исследовать влияние нооглютила на течение анафилактического шока у кроликов, системной анафилаксии у крыс и кожной аллергической реакции замедленного типа у мышей.
Провести сравнительный анализ антигипоксической активности производных нейроаминокислот и соединений с антиоксидантной активностью (натрия окси-бутират, мексидол) при экспериментальной анафилаксии.
Исследовать изменения содержания фосфоинозитидов и продуктов их метаболизма в крови, лимфоцитах и моноцитах крови аллергизированных животных под влиянием нооглютила.
Провести сравнительный анализ эффектов действия производных нейроаминокислот при экспериментальной анафилаксии с действием глюкокортикостероидов (преднизолона) и кромолин-натрия.
Научная новизна работы. Впервые на различных экспериментальных моделях анафилаксии обнаружено наличие противоаллергической активности у нового отечественного препарата из группы производных нейроаминокслот - нооглютила. Показано, что нооглютил обладает способностью уменьшать частоту развития позд-
ней фазы анафилактической реакции у кроликов. Наибольший эффект нооглютила отмечен в отношении кожных проявлений аллергических реакций (активная кожная анафилаксия у крыс, кожная аллергическая реакция замедленного типа у мышей). Впервые показана способность нооглютила повышать устойчивость подопытных животных к гипоксии при экспериментальной анафилаксии. Впервые показано, что нооглютил оказывает корригирующее влияние на метаболизм фосфоииозитидов в крови, лимфоцитах и моноцитах крови при экспериментальной анафилаксии.
Научно-практическая значимость работы. Результаты работы имеют как теоретическое, так и практическое значение. Впервые экспериментальным путем фармакологически доказана возможность применения нооглютила в комплексной, патогенетически обоснованной терапии аллергических заболеваний. Выявлены изменения содержания фосфолипидов, в том числе фосфоииозитидов и продуктов их метаболизма, в крови, лимфоцитах и макрофагах при анафилаксии. Показана возможность фармакологической коррекции нарушений гомеостаза фосфоииозитидов при аллергических реакциях немедленного типа с помощью нейроаминокислот и их производных. Показана возможность использования нооглютила при анафилактическом шоке для повышения устойчивости организма к гипоксии. Результаты исследования позволяют рекомендовать 1Ч-5-оксиникотиноил-Ь-глутаминовую кислоту (нооглютил) для расширенных доклинических испытаний в качестве противоаллергического средства.
По материалам диссертации было сделано 3 рационализаторских предложения.
Положения, выносимые на защиту:
Нооглютил (1Ч-5-оксиникотиноил-Ь-глутаминовая кислота) в изученной дозе и режиме введения обладает антианафилактической активностью и увеличивает выживаемость подопытных животных в поздней фазе анафилактического шока, а также уменьшает выраженность реакции активной кожной анафилаксии и кожной аллергической реакции замедленного типа.
>ї-5-оксиникотиноил-Ь-глутаминовая кислота восстанавливает содержание фосфоииозитидов и их метаболитов (диацилглицеролы, арахидоновая кислота, про-стагландины группы F2oc и группы Е) в крови и иммунокомпетентных клетках крови при экспериментальной анафилаксии.
Применение К-5-оксиникотиноил-Ь-глутаминовой кислоты в изученной дозе и режиме введения повышает устойчивость подопытных животных к гипоксии в условиях анафилаксии.
Внедрение. Результаты исследований используются на кафедрах фармации, фундаментальной и клинической фармакологии Тверской государственной меди-
цинской академии, Пензенского государственного университета, Смоленской государственной медицинской академии, Ярославльскои государственной медицинской академии в учебном процессе при проведении занятий и лекций по следующим темам: "Противоаллергические средства", "Иммунотропные средства", а также в научных исследованиях, проводимых в НИЦ Тверской государственной медицинской академии.
Апробация работы. Основные положения диссертации обсуждены на XV Всероссийском конгрессе "Человек и лекарство", на областных научно-практических конференциях (Тверь, 2007, 2008).
Публикации: по теме диссертации опубликовано 9 работ, из них 1 в журнале «Фармация», и 3 рационализаторских предложения.
Объем и структура диссертации
Работа изложена на 134 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований, обсуждения, заключения, выводов, научно-практических рекомендаций и списка литературы, включающего 178 источников, в том числе 135 отечественных и 43 иностранных. Диссертация иллюстрирована 22 рисунками и документирована 11 таблицами.
