Введение к работе
Актуальность темы. Одной из наиболее актуальных проблем созре?' іной онколошн остается разработка методов рациональной хнмнотс-іии злохачественньїх новообразований.
К числу основных недостатков большинства известных в настоящее гмя цитостатнчесхнх лекарств, лимитирующих их применение в кли-се, относится токсичность действия данных препаратов на кроветво-іие и иммунопоэз (Ларионов Л.Ф., 1962, Балнцкий К.П. и соавт., 1970; riler, 1980; Забиров И.И.. 1984; Лазарева Д.Н.Алехші Е.К., 1985; іьдберг ЕЛ- Новицкий В.В., 1986; Nikkels, 1987; Гольцберг В.Е., Ды-і Л.М.. Новицкий В.В., 1992).
Возникающее вследствие этого снижение резерва клеточньи и гумо-гьных факторов иммунитета проявляется в последствиях, потешшоль-опасных, по крайней мере, в трех направлениях: повышением вос-ишчивостн к инфекции, диссгминацисй уже существующей опухати, ннкновеннем новых (вторичных) злокачественных новообразований. и этом установлено, что снижение нммунолопіческой реактивности аннзма при действии противоопухолевых препаратоз является прн-юй развития вторичной инфекции у 50 - 75 % онкологических боль-с (Гершанович МЛ., 1932; Блохин Н.Н., Перезодчикова Н.И., 1984; magna М.Т.. Larossa A.M.Y., Barbuti S., 1987; Булкина З.П., 1991; [ьдберг В.Е., Дыгзй A.M., Новицкий В.В., 1992).
З езязн с этим изучение особенностей течения инфекционного про-;а на фоне действия цитостзтичесхих препаратов имеет не только тео-іческое, но и большое практическое значение. Особый интерес в об-даемом аспекте представляет, на наш взгляд, определение функцио-ыюго состояния клеток СМФ и разработка эффективных способов рекцни и профилактики нарушений функций макрофагального им-итетз, возникающих при применении шггостатических препаратоз.
С целью хоррекцпи нммунодефпцнтных состояний в клинике ис-ьзуют самые различные препараты иммуномодулнрующгго действия амизол, зимозан, продигиозан, пнрогенал и др.) (Закеифсльд Г.К., 5; Лазарева Д.Н., Алехин Е.К., 1985, 1987; Рахмилевич А.И., 1990; ринский B.C., Жук ЕЛ., 1990; Абрамова Е.В., Дыгай А.М., Гольд-- В.Е., 1991: Агафоноз В.И., 1993; Гольдбфг ЕЛ- Дыгай А.М., Лнт-:ихо В.И., Попова Т.П., Суслов Н.И., 1994), большинство из кото-. однако, не обладают строгой специфичностью действия и воздей-ют не на патолопіческнй эффект или возбудителя заболевания, а на іецифическую активацию популяций макрофагов, Т- и В-лнмфсшггов
субпопуляций (Растунова ГЛ. и соавт., 1981; Ширннсхпй B.C., Жук . 1990). Известно также, что большинство используемых з длинной практике нммуномодулятороз является малоэффективными и сб-jot достаточно широким спектром побочных эффектов (головная
боль, лихорадка, диарея, тромбощпопения, лейкопения и др.) (Зак« фельд Т.К., 19S5; Лазарева Д.Н., Алехин Е.К., 1985; Земсков В.М., 199! Булкнна З.П., 1991), которые регистрируются -у 20 - 30 % пациснто (Ширинсхнй B.C., Жук Б А., 1990).
В связи с этим важным управлением исследований в области пс
ВЫШСННЯ эффеКТИВНОСТИ НСПОЛЬЗуеМОЙ В ОНКОЛОГИЧЄСКОЙ ПраКТИКе НІН
муномодулирующей терапии является поиск высокоэффективных И ОД повременно малотоксичных препаратов или их комбинаций, обла дающих менее выраженными побочными эффектами и способных повы снть резистентность организма к действшо инфекционных возбудителе* Одним из перспективных направлений в этой области являете», на паї взгляд, использование естественных биологически активных веществ.
Из созданных в последние годы препаратов лммуномодулирующеп типа действия весьма перспективным, по нашему мнению, является глю куронат натрия (соль ілюкуроновой кислоты, биологически высокоак тивного соединения углеводного характера), полученный в Институт органического синтеза АН Латвии. В предварительных исследования; по изучению свойств данного препарата сотрудниками Института фар маколопш Томского научного центра РАМН (неопубликованные дан ные) было установлено, что глюкуронат натрия оказывает стимулирую щее действие на функции нейтрофнлов крозн — более -выраженное і пролонгированное, чем широко применяемый в клинической практикі иммуномодулятор продигнозан. При этом показано, что пиохурона: натрия относится к числу малотоксичных препаратов и повышает устой чиеость мышей к стафилококковой инфекции (неопубликованные данные).
Исходя из полученных данных, а также, учитывая, что влияние глю-куроната натрия на клетки СМФ до сих пор не изучалось, нам представлялось актуальным изучить возможность использования данного препарата как хоррсктора нарушений в клетках СМФ при цнтостатическої: болезни и инфекционном процессе, возникающем на фоне, применения гїитостатиков.
ХЬдь исследований. Изучить в эксперименте возможности коррекции и профилактики функциональных нарушений в клетках СМФ при листе-риозе и лнетернйной инфекции, протекающей на фоне действия цитоста-тического препарата.
В соответствии с поставленной целью в работе решались следующие
задачи: х
-
Опредсгппъ LDsb Listeria monocytogenes для иитактных животных и мышей, инфицированных на фоне действия глюхуроната натрия.
-
Установить особенности действия глюкуроизта натрия на функциональную активность клеток СМФ у і інтактних яошотных.
-
Определить xapa>rrq) влияния возбудителя лисгериоза на функциональное состояние клеток СМФ у ннтактных животных.
_5 —
4. Выявить основные эффекты действия циклофосфана па фужцио-
яальный статус клеток СМФ у интактпых ясивотных.
-
Установить особенности функционального состояния клеток СМФ у мышей, инфицированный Listeria monocytogenes поете предварительного введения циклофосфана.
-
Установить особенности функционального сосгояния клеток СМФ при действии культуры Listeria monocytogenes в условиях профн-гактического и терапевтического введения глюкуроната натрій.
7. Изучить особенности функционального станса клеток СМФ при
действии циклофосфана в условиях профилактического и терапевтнчг-
жого введения ппокуроната натрия.
3. Выявить особенности сочетаиного действия культуры Listeria monocytogenes и циклофосфана на фагоцитарную активность л ферментативный статус клеток СМФ в условиях профилактического и тердпез-шческого введения ппокуроната натрия.
Нпупіггя нознзпа. Впервые изучено функциональное состояние кле-гск СМФ при введении нового лекарстх енного препарата иммуномоду-інруквдего типа действия — пкокурсната натрия. Установлено, '.то трехкратное ежедневное внутривенное введение тшокуронзта натрия в юзе 50 мг/кг (суммарная доза 150 \\гк:г) зызьшаег у пптакшых жзпзст-іьгх повышение фагоцитарной и цитохимической (кислая фосфатаза, ке-;пецнфпческая эсгераза) активности клеток СМФ.
Впервые показано таккг, что профилактическое введение гшокуро-tara натрия (50 мг/кг х 3 ежедневно) приводит к увеличению величины LDjo возбудителя листернозз в 2 раза. Обосновано, тго как терапелтиче-жое, так и профилактическое введение ппокуроната натрия жгаотпым с жеперимеитальныч лнетсриозем приводит к увеличению фунхцно?:-;'П'>-ЮІІ активности клеток СМФ, что сопровождается сокращением периода зысеваемости микроорганизмов и уменьшение?.! их количества в селгзен-сс, печени и крови.
Установлено также, что введение возбудителя лпетерноза мышам с иггостатнческой' болезнью (индуцированной одногератпым введение.: віклофосфапа в МПД) приводит к более выра:кеппому и продслжигель-іому во времени (но сравнению с действием цитостатика) угнетению фл,-"оцнтарной активносш перитоиеальных макрофагов и активности кне-ісй фосфатазы и нссненифнческой эсгеразы моноцитов периферической срови, а таїглее к более длительно!! во времени циркуляции листернй в эргаихх и крови, чем при инфицировании интактпых ;ч-,іпол«ьіх. Профн-іактическое и терапевтическое введение ппоігуроната натрия (50 мг/гсг -) ежедневно) животным, инфицированным лнетергкдш па фоке применена циклофосфана, приводит к выра;;;енпой спімуля'^ин 0".ункцисналъ-гой активности клеток СМФ и умепьшешио количества микроорганчз-,?ов в оргаїсах и крови подопытных "атотных. Установлено, что терз-іезтическое введение лгюкуропата натрия (50 мг.'кг ' 3 етеднезпо) >:п<-
~6—
вотным с листсрнозом, цігтостатической болезиыс и мышам, инфицированным Listeria monocytogenes на фоне действия цитостатика, приводит к более выраженному увеличению функциональной активности клеток СМФ и сокращению числа и продолжительности времени циркуляции микроорганизмов в органах и крози, чем при его профилактическом воздействии в аналогичном режиме введения.
Научно-практическая значимость. Экспериментально обоснована и доказана возможность применения глгохуроната натрия в качестве высокоэффективного стимулятора клеток системы мононуклеарных фагоцитов (Заявка № 9400142 на изобретение «Протнвоикфекциокное средство» с приоритетом от 12.01.94 и Заявка № 94007979 на изобретение «Средство, стимулирующее функции клеток системы мононуклеарных фагоцитов» с приоритетом от 05.03.1994).
Аи]юбация работы. -Материалы диссертации докладывались и обсуждались на заседаниях кафедры микробиологии СГМУ (Томск, 1993 — 1995).. на итоговых конференциях ЦНИЛ СГМУ (Томск, 1993 - 1995), на заседании комиссии по апробации кандидатских диссертаций НИИ фармакологии ТНЦ РАМН (1995).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ.
Об>ем » структура работы. Диссертация изложена на 148 страницах машинописного текста и состоит из введения, четырех глав, выводов и списка литературы, включающего 279 источников, из которых 192 отечественных и 87 иностранных. Диссертация иллюстрирована 27 таблицами, 3 рисунками.
Автор выражает глубокую благодарность руководителю лаборатории патофизиологии НИИ фармакологии ТНЦ РАМН, член-корреспонденту РАМН, профессору Александру Михайловичу Дыгаю за предоставленную возможность экспериментального изучения нового препарата иммуноыодулирующего типа действия — глюкуронатз натрия и первичную документацию по этому препарату.
