Введение к работе
Актуальность темы. Обеспечение фармацевтического производства растительным сырьём является важным фактором повышения рентабельности данной отрасли. Учитывая, что многие растения, традиционно используемые в пищевой промышленности, содержат значительный запас биологически активных веществ (БАВ), часть которых остаётся в отходах пищевого производства, представляет значительный интерес исследование этих отходов с целью дополнительной обработки с максимальным использованием биологически активных компонентов и получением лекарственных средств на их основе.
Плоды калины обыкновенной являются официнальным сырьем (ГФ XI "Fructus Viburni") и используются как противовоспалительное и потогонное средство. В пищевой промышленности из плодов калины обыкновенной получают сок. Отходом такого производства является жом плодов, который не подвергается дальнейшей переработке, хотя содержит богатый комплекс невостребованных БАВ как гидрофильного, так и лшюфилыюго характера.
Расширение сырьевой базы производства лекарственных препаратов за счёт использования отходов пищевой промышленности носит ресурсосберегающий характер: позволяет рационально использовать лекарственные растения (ЛР), способствует удовлетворению возрастающего спроса на лекарственные средства (ЛС) па основе лекарственного растительного сырья (ЛРС). Вещества, продуцируемые растениями, физиологически близки организму человека, препараты на их основе обладают мягкостью действия, характеризуются отсутствием побочных явлений и осложнений при длительном применении, что особеїгно важно в профилактике и лечении хронических воспалительных процессов.
В последние годы сформировалась устойчивая тенденция к росту заболеваний мочеполовой сферы у людей репродуктивного возраста. В связи с этим актуально создание лекарственных средств на основе фитокомплексов, обладающих противовоспалительной и репаративной активностью.
Цель исследования. Основная цель настоящей работы - стандартизация жома плодов калины обыкновенной, липидного комплекса жома плодов калины обыкновенной, суппозиториев с ли-
ппдным комплексом жома плодов калины обыкновенной. Основные задачи исследования:
-
Провести исследование лшшдного комплекса жома плодов калины обыкновенной
-
Провести фармакогностическое изучение жома плодов калины обыкноновенной (ЖПКО).
-
Разработать показатели качества и их нормы для лшшдного комплекса жона плодов калины обыкновенной, суппозиториев с лнпидным комплексом жома плодов калины обыкновенной и сырья.
-
Выявить степень терапевтической активности суппозиториев с липидным комплексом жома плодов калины обыкновенной.
5. Разработать проекты Временных Фармакопейных Статей на
жом плодов калины обыкновенной, лнпидпый комплекс
ЖПКО, суппозитории с лииидиым комплексом ЖПКО.
Научная новизна. Впервые показана возможность комплекс
ной переработки отходов пищевого производства - жома плодов
калины обыкновенной с созданием в итоге лекарственного сред
ства - суппозиториев, содержащих липпдиый комплекс ЖПКО.
Впервые проведено фармакогностическое изучение ЛРС - жома плодов калины обыкновенной как источника липидпого комплекса, содержащего биологически активные компоненты, охарактеризованы диагностические признаки сырья, определено содержание лшшдного комплекса в жоме плодов семи сорто-форм калины обыкновенной.
Впервые проведено исследование лшшдного комплекса ЖПКО. Разработаны показатели качества для ЖПКО, липидпого комплекса ЖПКО, суппозиториев с липидным комплексом ЖПКО.
Впервые изучена стабильность в процессе хранения ЖПКО, липидпого комплекса ЖПКО и суппозиториев с липидным комплексом ЖПКО
Установлена безвредность липидпого комплекса жома плодов калины обыкновенной, терапевтическая активность суппозиториев с лнпидным комплексом ЖПКО при лечении эидоцерви-цптов.
Степень новизны проведенных исследований подчёркивается получением приоритетной справки по заявке № 96114235 (от 10.
07. 96 г.) "Средство для лечения эндоцервицитов".
Практическая значимость работы. Разработаны показатели качества и их нормы для липидного комплекса жома плодов калины обыкновенной, суппозиториев с лшшдным комплексом жома плодов калины обыкновенной и сырья - жома плодов калины обыкновенной, которые включены в соответствующие проекты ВФС, переданные на рассмотрение в Фармакологический и Фармакопейный Комитеты.
Наработана опытная партия суппозиториев с лшшдным комплексом ЖПКО в АОЗТ "Садко-Ц". Получены заключения о проведении на базе городской клинической больницы № 50 апробации суппозиториев с лшшдным комплексом ЖПКО, в которых указывается, что данное лекарственное средство обладает выраженным репарационным действием при лечении эндоцервицитов и может использоваться в комплексном лечении.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научной конференции, посвященной 50-летию ботанического сада ММА им. Сеченова (декабрь 1996 г.), на межкафедральпой научной конференции ММА им. Сеченова (аирсль1997 г.).
Публикации. По материалам исследования опубликовано 7 работ. Получена справка о приоритете по заявке № 96114235 от 10. 07. 96 г. "Средство для лечения эндоцервицита".
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ММА им. Сеченова по теме: " Оценка качества и сертификация биологически активных соединений синтетического и природного происхождения, лекарственных препаратов, изделий медицинской техники (технологические и экологические аспекты)". Номер государственной регистрации 05 14003 0193 0006971.
Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (глава 1), описания материалов и методов исследований (глава II), представления результатов и их обсуждения (глава III, IV, V, VI ), выводов, библиографического указателя и приложений. Работа содержит 23 таблицы, 32 рисунка. Библиографический указатель включает 147 источников, из них иностранных -33.
В обзоре литературы охарактеризована изученность рода
Viburnum ( калина ), приведены данные о химическом составе Viburnum opulus (калина обыкновенная) и его использовании в отечественной официальной и народной медицине. Описана фармакологическая активность различных классов соединений, входящих в состав липидных комплексов.
Глава II содержит описание изучаемого материала и методик, которые были использованы для выделения, идентификации и определения содержания комплексов БАВ и конкретных соединений.
В главе III приводятся результаты изучения химического состава липидного комплекса ЖПКО, результаты исследования по вопросам стандартизации сырья и липидного комплекса.
IV глава посвящена получению и стандартизации суппозиториев с лнппдным комплексом ЖПКО.
В V главе изложены результаты исследований микробиологической чистотіл и безвредности ЖПКО, липидного комплекса ЖПКО и суппозиториев с лппидным комплексом ЖПКО.
В VI главе приводятся результаты исследования стабильности в процессе хранения ЖПКО, липидного комплекса ЖПКО и суппозиториев с липидиым комплексом ЖПКО. НА ЗАЩИТУ ВЫНОСЯТСЯ:
-результаты стандартизации жома плодов калины обыкновенной, липидного комплекса ЖПКО, суппозиториев с липидиым комплексом ЖПКО и данные по исследованию острой и хронической токсичности липидного комплекса ЖПКО и его лекарственной формы.
Объекты и методы исследования. Основные объекты исследования - жом плодов дикорастущих форм калины обыкновенной, собранных осенью 1994-1995 г. в Наро-Фоминском районе Московской области, жом плодов калины обыкновенной семи номерных сортоформ, собранных на сортоучастке совхоза им. Ленина осенью 1996 г. Жом получали в АОЗТ "Садко-Ц", отжимая сок из плодов на ручном прессе с червячным механизмом и высушивая пресс-остаток в изотермическом режиме при температуре 85-90С.
В процессе стандартизации ЖПКО учитывали требования к исходному сухому цельному сырью - плодам калины обыкновенной, требования общих статей ГФ XI "Плоды" и "Семена" и особенности технологии получения.
С целью выявления условии максимального обезжиривания ЖПКО изучали зависимости выхода липидного комплекса от времени, измельчённое. сырья, соотношения сырьё : экстра-гент. Варьируя экстрагепт, методом циркуляционного экстрагирования установили содержание липидного комплекса в семи номерных сортоформах.
Физико-химические показатели липидного комплекса жома плодов калины обыкновенной анализировали согласно указаниям общей статьи "Масла жирные" ГФ X и соответствующим методикам ГФ XI. При получении и стандартизации суппозиториев с лииидным комплексом ЖПКО учитывались требования общей статьи ГФ XI "Суппозитории".
С целью определения устойчивости к окислению проводили тест па окислительную стабильность. Для этого линидный комплекс помещали в условия, провоцирующие окисление (1 = 60 С, свободный доступ воздуха), и определяли перскисиое число через каждые 24 часа в течение 16 суток. Анализу подвергали липидные комплексы ЖПКО, полученные экстракцией хлороформом или "Нефраксом" из сортовой смеси, а также липидные комплексы жома плодов калины обыкновенной, стабилизированные добавлением 0,5% антиоксиданта "Controx VP" фирмы Geunau. Для сравнения но той же схеме анализировали фармакопейные масла - оливковое и подсолнечное, соответствующие всем требованиям ГФ X, а также свиной жир.
Перскисиое число липидного комплекса жома плодов калины обыкновенной определяли по ГОСТу 2G593-85.
Жирные кислоты липидного комплекса анализировали методом газо-жидкостной хроматографии в виде метиловых эфиров в стандартных условиях на приборе ЛХМ-8м с пламенпб-иони-зационным детектором и металлической колонкой.
Каротипоиды, токоферолы, фитостсрины, фпллохиноны идентифицировали в неомыляемой фракции липидного комплекса ЖПКО методом ТСХ, сравнивая величину Rf с литературными данными и используя стандартные растворы "свидетелей".
Определение содержания каротипоидов проводили спектро-фотомстри чески.
Содержание стеролов определяли колориметрическим методом, основанном на реакции Либермана-Бурхарда.
Изучение состава трптерпеповых соединений жома плодов ка-
липы обыкновенной проводили методом ТСХ,' содержание определяли гравиметрически.
Острую токсичность определяли на 60 белых беспородных мышах-самцах одного возраста (масса 18 -20 г) и 60 крысах обоего пола (масса 120 - 170 г). Испытание проводили в дозах 5, 10, 15, 20, 25, 50 г/кг. Хроническую токсичность изучали в течение 6 месяцев на крысах опытной и контрольной групп. Животным опытной группы вводили 20 г/кг препарата.
Микробиологические исследования проводили по методикам общей статьи ГФ XI "Испытания на микробиологическую чисто-ту". _ _
Все по'лученные результаты обрабатывали статистически в соответствии с требованиями общей статьи ГФ XI.
