Введение к работе
Актуальность темы. Настоящий период развития российской медицины и фармации характеризуется отчетливой тенденцией к более интенсивному использованию лекарственных средств растительного происхождения. Изыскание новых растительных источников биологически активных веществ и создание на их основе эффективных лекарственных препаратов является одной из актуальных проблем [Маслов, Гузарова, 2007].
Представители семейства Камнеломковые, такие как бадан толстолистный широко известны как ценные лекарственные растения. Особенное значение придается черным листьям бадана. В состав черных листьев бадана входят вещества, обладающие адаптогенными, анти-стрессорными и иммуномодулирующими свойствами [Лубсандоржиева, 2002].
Наноструктуры являются высоко эффективными переносчиками лекарственных веществ [Назаров, Галан, Назарова, 2009]. Разработка липосомальных структур, содержащих природные полиненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК), которые усиливают функциональный потенциал транспортных средств, является весьма перспективным направлением. Создание липосомальных форм биологически активных соединений необходимо как для повышения биологической активности, так и для адресной доставки средств.
Цель настоящей работы - разработка способа получения липосо-мальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного, содержащего полиненасыщенные жирные кислоты, и оценка его эффективности на модели холодового стресса.
Для достижения указанной цели были сформулированы следующие задачи:
разработать технологическую схему получения экстракта из черных листьев бадана толстолистного в липосомальной форме, содержащей ПНЖК;
оценить качественные характеристики и мембраностабилизи-рующую активность при хранении включенного в липосомы экстракта из черных листьев бадана толстолистного;
исследовать влияние липосомальной формы исследуемого фи-тоэкстракта на показатели иммунного статуса животных при холодовом воздействии;
оценить активность ферментов монооксигеназной системы печени крыс, подвергавшихся холодовому стрессу, при введении им экс-
тракта из черных листьев бадана толстолистного, включенного в липосомальные структуры;
изучить нейропротекторную активность липосомальной формы фитоэкстракта у экспериментальных животных на фоне холодового стресса;
оценить эффективность действия включенного в липосомы экстракта из черных листьев бадана толстолистного на физическую работоспособность лабораторных животных в условиях холодового стресса;
исследовать молекулярно-клеточный механизм адаптогенного действия исследуемого средства.
Научная новизна. Разработана технологическая схема получения липосомальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного. Впервые установлено, что включенный в липосомы экстракт из черных листьев бадана толстолистного обладает выраженным имму-номодулирующим действием; индуцирует активность микросомальных ферментов, ответственных за детоксикацию ксенобиотиков; обладает выраженной нейропротекторной активностью и повышает физическую выносливость при воздействии холодового стресса. При введении исследуемого средства животным на фоне холодового воздействия снижается интенсивность свободнорадикального окисления липидов, восстанавливается функциональная активность эндогенной антиоксидантной системы организма и индуцируются восстановительные процессы в биологических мембранах, которые способствуют повышению защитно-компенсаторных реакций организма. Показано, что при включении экстракта из черных листьев бадана толстолистного в липосомальные структуры, содержащие ПНЖК, усиливается его биологическая эффективность.
Практическая ценность работы. На липосомальную форму экстракта из черных листьев бадана толстолистного разработаны ТУ 9214-083-0206947311. Разработанная форма фитоэкстракта может быть использована как биологически активная добавка к пище в качестве профилактического средства, снижающего выраженность стресс-синдрома и повышающего устойчивость организма к воздействию холода.
Теоретические и прикладные результаты работы используются в учебном процессе при проведении занятий по биологической и пищевой химии, при подготовке студентов специальности «Биотехнология», бакалавров и магистров направления «Технология продуктов питания».
Основные положения, выносимые на защиту:
способ получения липосомальной формы фитоэкстракта;
экстракт сухой из черных листьев бадана толстолистного, включенный в липосомальные структуры, оказывает иммуномодули-
рующее, нейропротекторное, адаптогенное действие на фоне холодового стресса;
в основе молекулярно-клеточного механизма действия липосо-мальной формы экстракта из черных листьев бадана толстолистного лежит ингибирование свободнорадикального окисления липидов, восстановление функций эндогенной антиоксидантной системы и стабилизация биологических мембран;
включение фитоэкстракта в липосомальные структуры, содержащие ГТНЖК, способствует усилению его биологической эффективности.
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены: на ежегодных научных конференциях преподавателей, научных работников и аспирантов Восточно-Сибирского государственного технологического университета на секции «Химия биологически активных веществ» (Улан-Удэ, 2008, 2009, 2010); на международной научно-практической конференции «Пищевая промышленность: состояние, проблемы, перспективы» (Оренбург, 2009); на III Международной научно-технической конференции молодых ученых: «Актуальные проблемы технологии живых систем» (Владивосток, 2009); на международной школе-семинаре «Current Problems of Food Engineering and Biotechnology» (Ulan-Ude, 2010).
Публикации. По результатам проведенных исследований опубликовано 8 работ, в том числе две статьи в журналах из перечня, рекомендуемого ВАК РФ.
Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 114 страницах, состоит из введения, главы обзора литературы, главы, посвященной материалам и методам исследований, главы собственных исследований, выводов, списка литературы, приложения, содержит 16 рисунков и 18 таблиц. Список использованной литературы (173 наименования) включает наименования публикаций российских и иностранных авторов.