Содержание к диссертации
Введение
ГЛАВА I. Обзор литературы 12
1.1 Механизм действия гепатотоксинов на организм животных и человека , 12
1.2 Молекулярные механизмы метаболизма ксенобиотиков 16
1.3 Пути коррекции токсических поражений печени в эксперименте и клинике 24
ГЛАВА П. Материалы и методы исследования 32
2.1. Характеристика экспериментального материала 32
2.2 Характеристика клинического материала 34
2.3. Методика исследования хемилюминесценции биологического материала на приборе ХЛМ-003 35
2.4 Методы обследования больных с токсическим поражением печени 37
ГЛАВА III. Морфологические изменения и свободно-радикальное окисление в тканях и органах экспериментальных животных при интоксикации ТХМ
3.1. Морфологические изменения в организме крыс при тетрхлормета-новой интоксикации 40
3.2. Хемилюминесцентные свойства крови крыс при экспериментальной токсической гепатопатии 57
ГЛАВА IV. Морфофункциональные изменения в организме крыс при коррекции токсических поражений печени некоторыми гепатопротекторами
4.1. Морфологические изменения в организме крыс при интоксикации тетрохлорметаном и коррекции отваром расторопши, карсилом, окси-метилурацилом и их комбинацией 61
4.2. Исследование антиокислительной активности расторопши, карсила и оксиметилурацила 87
ГЛАВА V. Клинические аспекты коррекции токсических поражений печени 97
5.1 Причины развития и методы выявления токсических поражений печени 97
5.2 Методы хирургической коррекции и послеоперационного медикаментозного лечения токсических поражений печени 99
5.3 Влияние некоторых гепатопротекторов на функциональное состояние печени при её токсических поражениях 115
ГЛАВА VI. Анализ и обсуждение результатов исследований 121
Выводы 129
Практические рекомендации 130
Список использованной литературы 132
- Пути коррекции токсических поражений печени в эксперименте и клинике
- Морфологические изменения в организме крыс при тетрхлормета-новой интоксикации
- Морфологические изменения в организме крыс при интоксикации тетрохлорметаном и коррекции отваром расторопши, карсилом, окси-метилурацилом и их комбинацией
- Методы хирургической коррекции и послеоперационного медикаментозного лечения токсических поражений печени
Введение к работе
За последние годы возрос интерес исследователей к изучению воздействия ксенобиотиков на организм животных и человека (Блюгер А.Ф., 1975; Новиков КН., 1985; Подымова С.Д.,1993; Дунаев П.В., 1999; Савлуков А.И., 2000; Мышкин В.А., 2001; Волкова Е.С., 2004; Хуснутдинов Т.Р:, 2005; Zimmerman H.J., 1978). Изучению были подвергнуты самые разнообразные соединения: гелиотрин, тетрахлорметан, ацетон, аллилформиат, дубильная кислота, полихлорированные бифенилы, диоксин, перфторан, аллиловый и этиловый спирт, более 200 фосфороорганических соединений, более 300 лекарственных веществ (Венгеровский А.И., Маркова И.В., 1999). Особое значение приобретают техногенные и антропогенные воздействия на организм чужеродными химическими соединениями, которые потенциально могут воздействовать с водой, пищей, воздухом. В настоящее время число ксенобиотиков составляет 4-6 млн. и количество их увеличивается десятками тысяч в год. Практическое значение поражения печени, моделируемого тетра-хлорметаном, определяется тем, что он используется в промышленности, сельском хозяйстве, в виде растворителей, при» обработке кож, пушнины, обезжиривания деталей (Дунаев П.В. с соавт., 1999). По данным ряда авторов, при концентрации тетрахлорметана в воздухе 15 мг/л острое отравление человека возникает через 10 минут после ингаляции, при концентрации 2 мг/л - через 30 минут (Zimmerman HJ.,1978; Herbst Н. et all., 1992).
Печень, как центральный орган метаболизма, чаще страдает от эндо- и экзогенных токсинов в первую очередь. Это и закономерно, так как вся кровь, оттекающая от толстого и тонкого отделов кишечника, желудка и селезенки, через воротную вену попадает в печень (Подымова С.Д., 1993). В печени существует целая система детоксикации веществ различного происхождения путем их соединения с кислотами, буферами, глюкозой или конью-гируя их в пары. Например, аммиак превращается в мочевину (Блюгер А.Ф.,
1988). Наиболее изучен механизм действия тетрахлорметана на животных разного уровня организации (Шкурупий В.А., 1989; Uchida Т., Peters K.L., 1983; Ariosto R. et all., 1989). Используя ультраструктурные методы исследования печени у мышей, авторы показали, что в процессе детоксикации тетрахлорметана большое значение имеет состояние гипоталамо-гипофизарной системы. Так, при стрессе значительно снижается действие токсина на организм, из-за угнетения монооксигеназ и действия глюкокортикоидов. Отравление экспериментальных животных этим ксенобиотиком по морфологической характеристике и биохимическим изменениям близко к острым поражениям печени различной этиологии у человека (Brattin W. I. et all., 1994).
Комплексный подход к раскрытию патогенеза токсической гепатопа-тии позволяет выяснить ключевые звенья нарушенных функций субклеточных структур и в дальнейшем целенаправленно воздействовать на них (Блю-гер А.Ф., 1989; Czaja. М. I. et all., 1989).
Разносторонние процессы при патологии печени изучены в Башкирском республиканском центре хирургической гепатологии (Галеев М.А., 2000; Сафин И.А., 2002; Нартайлаков М.А., 1994-2005). Предложены методы прогнозирования исходов лечения печеночной патологии различной этиологии (Багаманова Р.К., Лутфарахманов И.И., 2000; Богданов Е.Н., 2000; Ванеев И.Г. с соавт., 2000; Галимов О.В. с соавт., 2000; Плечев В.В. с соавт., 2002; Тимербулатов В.М., 2002).
Изучены молекулярные механизмы развития патологических процессов и внедрены в клинику новые патогенетические принципы лечения (Бобрик И.И. с соавт., 1987; Вакулин Г.М., 1993; Волкова Е.С., 2004; Geisler A. et all., 1994). Доказано, что гепатозащитное действие оказывают никотиновая кислота, кокарбоксилаза, липоевая кислота (Алехин Е.К. с соавт., 2002; Vaishwanar I. et all, 1972). По данным Вакулина Г.М. (1993), Алехина Е.К. с соавт. (2002), витаминные препараты не дают существенного положительно-
го эффекта при химическом поражении печени, вероятно вследствие нарушения их использования ферментными системами митохондрий.
На данный момент недостаточно расшифрованы молекулярные основы токсической патологии и ключевые звенья биологического действия ксенобиотиков, позволяющие представить патобиохимические изменения в гепа-тоцитах, коррелирующие с ультраструктурными нарушениями клетки. Стало актуальным направлять все исследования для создания единой теоретической концепции, в рамках которой можно объяснить главные закономерности развития химического поражения печени (Владимиров Ю. А., 2000; Алехин Е.К. с соавт., 2002; Brattin W. I. et all, 1985; Chen M. F., Hwang T.L., 1994). В ее основе может лежать представление о первичном изменении физико-химических свойств липидов мембранных структур гепатоцитов. Химическое поражение печени, вызванное такими распространенными гепатотоксинами, как этанол, тетрахлорметан, приводят к различной степени выраженности изменений центролобулярных и периферических гепатоцитов, что связано с анатомическими особенностями строения печеночной дольки (Лебедев СП., 1980).
Несмотря на достаточно разносторонний подход к изучению многообразных функций печени, многие патогенетические механизмы компенсаторно-восстановительных процессов остаются недостаточно изученными (Завадская Е.Э., 1989; Громов А.Г.,1992, Мышкин В.А., 1998, Савлуков А.И., 2000). Актуален вопрос применения антиоксидантов с широким спектром фармакологической активности, оказывающих терапевтический эффект и положительное влияние на сопряженные с ПОЛ процессы у больных с гепатитами токсической и вирусной этиологии (Савлуков А.И., Хуснутдинов Т.Р., 2005). Особенно это относится к методам хирургической коррекции заболеваний печени, что послужило основанием для продолжения исследований морфофункциональных нарушений печени в экспериментальных и клинических условиях.
Цель исследования:
Клинико-экспериментальное обоснование коррекции морфофункцио-нальных нарушений внутренних органов и свободно-радикального окисления в комплексе хирургического лечения токсического поражения печени.
Задачи исследования:
Для реализации цели исследования были поставлены следующие задачи:
Изучить морфологические изменения во внутренних органах крыс при экспериментальной тетрахлорметановой интоксикации.
Изучить в эксперименте состояние свободно-радикального окисления в печени при её токсическом поражении и возможности его коррекции.
Исследовать влияние на морфофункциональное состояние внутренних органов эксперименальных животных гепатопротекторов (отвара расторопши, карсила, оксиметилурацила) при тетрахлорметановой интоксикации.
Оценить возможности исследования хемилюминесценции крови и гомогената печени в клинике в определении тяжести токсического поражения печени и эффективности его комплексного хирургического лечения.
Провести анализ эффективности клинического применения отвара расторопши, карсила и оксиметилурацила в комплексе хирургического лечения больных с токсическим поражением печени.
Научная новизна.
Впервые с использованием морфологических и биофизических методов исследования показаны сочетанные морфофункциональные изменения в организме крыс при экспериментальном тетрахлорметановом токсикозе, проявляющиеся нарушением структуры и функции внутренних органов. Эффективность лечения токсических поражений печени предложено оценивать по
регистрации хемилюминесценции крови или пунктата печени с определением активных форм кислорода и/или перекисного окисления липидов. Показано, что при экспериментальном отравлении животных тетрахлорметаном ок-симетилурацил по антиоксидантным свойствам превосходит отвар расто-ропши и карсил. Экспериментально на животных обосновано, что при коррекции токсических поражений печени следует учитывать сочетанные нарушения в почках, селезенке^ легких, желудке и кишечнике. Рекомендован новый подход в комплексном хирургическом лечении токсического поражения печени, включающий хирургическую коррекцию патогенетического фактора токсического гепатита и применение в раннем послеоперационном периоде отвара расторопши, карсила и оксиметилурацила.
Практическая значимость.
Впервые при токсическом поражении печени установлены изменения в организме человека активных форм кислорода, что является одним из ключевых моментов патогенетических изменений и в выборе метода их коррекции. Использованные для комплексной терапии растительные (расторопша пятнистая, карсил) и синтетический (оксиметилурацил) препараты обладают разной гепатотропной и антиоксидантной активностью. Полученные данные расширяют и дополняют тактические приемы при консервативной и хирургической коррекции токсического поражения печени.
Основные положения, выносимые на защиту:
При токсическом поражении организма животных и человека возникают морфофункциональные изменения не только в печени, но и в легких, селезенке, почках, желудке.
При воздействии тетрахлорметана на организм животных и человека возникают метаболические нарушения в крови и внутренних органах, проявляющиеся ускорением реакции перекисного окисления липидов с накоп-
лением активных форм кислорода, диеновых конъюгатов и ТБК-активных продуктов.
При экспериментальной тетрахлорметановой интоксикации животных отвар расторопши, карсил, оксиметилурацил и комплекс названных препаратов оказывают положительное влияние на гистологическую структуру внутренних органов и процессы свободно-радикального окисления в крови и печени.
При тяжелой хирургической патологии, сопровождающейся токсическим поражением печени, расторопша, карсил, оксиметилурацил и комплекс препаратов снижают содержание активных форм кислорода, диеновых конъюгатов, ТБК-активных продуктов.
При токсическом поражении печени у больных с гнойно-септическими процессами брюшной полости хирургическая коррекция его патогенетического фактора в комплексе с применением отвара расторопши, карсила и оксиметилурацила способствует нормализации лабораторных'показателей функции печени (АлАТ, АсАТ, билирубина, ЩФ, холестерина).
Апробация работы.
Основные положения диссертационной работы доложены, обсуждены и одобрены на:
Международной конференции «Болезни мелких животных», Уфа, 2001;
Всероссийской научно-методической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины, Уфа, 2003;
Заседании кафедры общей хирургии БГМУ, Уфа, 2004;
VII Конгрессе Международной ассоциации морфологов, Казань, 2004;
Третьем Российском конгрессе по патофизиологии «Дисрегуляционная патология органов и систем», Москва, 2004;
Заседании Ассоциации хирургов РБ, Уфа, 2005.
Публикации.
Основные научные положения, выводы и разработки диссертации изложены в 19 научных статьях, из них 5 в центральной печати.
Структура и объем диссертации.
Диссертация изложена на 156 страницах компьютерного набора. Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов исследования, выводов и практических предложений. Работа иллюстрирована 76 рисунками, 13 таблицами. Список литературы включает 161 отечественных и 68 работ зарубежных авторов.
Пути коррекции токсических поражений печени в эксперименте и клинике
Предприняты попытки для коррекции токсических отравлений у животных и человека. Так, Блюгер А.Ф. [15], Подымова С.Д. [104], Волкова Е.С. с соавт. [35] исследовали действие целого ряда гепатопротекторов. Авторы выделили основные внутриклеточные биоантиоксидантные системы, протекторное действие которых имеет место при химическом поражении печени. Об этом также сообщают и другие авторы [50, 174]. Так, токоферола ацетат уменьшает токсичность галактозамина, акриламида, адриамицина; диметилнитрозарина, индометацина, сульфата меди [25]. Получены данные о том, что токоферола ацетат препятствует вызванной тетрахлорметаном патологии в миокарде. Недостаток этого витамина в рационе животных повышает токсическое действие тетрахлорметана [35]. Гепатозащитными свойствами при химическом поражении печени обладают аскорбиновая кислота, пролал-галлат, коэнзим А, тиоловые соединения, цистеин, цистамин, ретинола паль-митат, а также обладающие антиокислительными свойствами in vitro синтетические антиоксиданты - тиоридин, этидин, левомизол, этоксихин [53, 104]. Фармакотерапевтический эффект при экспериментальном гепатите оказывает калефлон, соцветия календулы лекарственной, представляющий собой, группу полифенольных соединений. Они близки по фармакологическому действию к верцетину. Вопросы фармакотерапии заболеваний печени с использованием растительных флавоноидных препаратов освещены Алехиным Е.К. и соавт. [32], Фархутдиновым P.P. [152], Волковой Е.С. [35].
При химическом поражении печени изменяется состав жирных кислот микросомальных фосфолипидов. Большинство авторов указывают на снижениє содержания арахидоновой кислоты в микросомах печени крыс, отравленных тетрахлорметаном [22, 50].
В митохондриях печени крыс, пораженных тетрахлорметаном, снижается активность дегидрогеназ, уменьшается способность митохондрий окислять пируват, цитрат, малат, глутамат, сукцинат [22, 177]. Поражения печени сопровождаются нарушением транспорта электронов в цитохромах, тогда как терминальный оксидазныи участок дыхательной цепи менее чувствителен к повреждающему действию тетрахлорметана [87, 119]. Повреждение гепато-цитов тетрахлорметаном сопровождается также снижением редуктазной активности митохондрий [50, 163]. В этих условиях нарушается фосфорилиро-вание аденозинтрифосфата и структура мембраны [15]. В регуляции клеточного метаболизма, в частности активности процессов биосинтеза белка и клеточного деления, определяющую роль играют не столько абсолютные концентрации циклических нуклеотидов, сколько величина их соотношения. В печени животных, через 2 часа после введения тетрахлорметана, концентрация монофосфатов увеличивается в 4 раза, а через 24 часа - в 2,7 раза. При этом снижаются циклические нуклеотиды и аденилатциклазная активность. После интоксикации тетрахлорметаном возникает накопление тригли-церидов в печени [162]. На лизосомальные мембраны стабилизирующее действие оказывают стероидные гормоны - кортизон и гидрокортизон. Глюко-кортикоиды используют в комплексе терапевтических мероприятий при токсическом поражении печени и почек [16, 104, 163]. Альдактон увеличивает гепатотоксическое действие тетрахлорметана, а защитное его действие обнаруживается при введении за 3 дня до интоксикации [104]. По мнению Лужникова Е. А. (1982), глюкокортикоидную терапию можно проводить только в период экзотоксического шока и в начальной фазе развития пече-ночно-почечной недостаточности. В зависимости от дозы гепатотоксичные ксенобиотики могут оказывать различное влияние на структурно-функциональное состояние мембран пероксисом [127]. Гепатоциты обладают высокой активностью белкового синтеза, проявляющейся в большой скорости обновления белков, быстрым восстановлением ферментативной активности субклеточных структур после химического и радиационного поражения, выраженной способностью к генетической индукции при введении ксенобиотиков и стероидных гормонов [24, 104, 218]. Биологическая роль бело-ксинтезирующего аппарата гепатоцитов заключается в образовании ферментных и структурных белков клеточных мембран, растворимых белков клетки, синтезе белков крови [15]. Химическое поражение печени приводит не только к изменениям каталитической активности ферментных комплексов эндоплазматического ретикулума, митохондрий и плазматических мембран, но и к нарушению белкового синтеза, связанному с повреждением белоксин-тезирующего аппарата гепатоцитов [127]. Поэтому в целом ряде работ предприняты попытки стимулировать эту функцию путем введения различных веществ [4, 24, 146, 125, 196, 197, 195, 194, 202]. Повышение активности биосинтеза белка у отравленных тетрахлорметаном крыс соответствовало коррекции молекулярной организации белоксинтезирующего аппарата гепатоцитов [133, 163].
Одно из характерных патобиохимических проявлений химического поражения печени - жировая дистрофия с накоплением в гепатоцитах значительных количеств нейтральных липидов [104, 130]. Полагают, что к наиболее важным молекулярным механизмам увеличения содержания липидов в гепатоцитах при патологии относится нарушение белоксинтезирующей функции этих клеток с угнетением формирования липопротеидных комплексов, поступающих в кровь [78, 104, 145]. При отравлении тетрахлорметаном индукторы белкового синтеза, например эстрадиол, препятствуют уменьшению уровня гликогена в печени [50, 147].
Таким образом, при химическом поражении печени, наряду с угнетением каталитических активностей мембраносвязанных ферментов, снижается суммарная ферментативная активность субклеточных структур гепатоцитов вследствии редукции мембран и уменьшения количества их белковых компонентов.
Однако эксперименты с введением животным перед отравлением тет-рахлорметаном полициклических углеводородов дали противоречивые результаты. В некоторых экспериментах предварительное введение животным полициклических ароматических углеводородов усиливает действие тетрахлорметана и парацетамола [15]. Уменьшение токсичности тетрахлорметана в условиях предварительного введения антиоксидантов некоторые авторы объясняют изменением путей метаболизма тетрахлорметана в мембранах эн-доплазматического ретикулума гепатоцитов [152]. Другие авторы отмечают, что тетрахлорметан блокирует метаболические пути, ведущие к образованию токсических соединений, и ведет к жировому перерождению [153, 150, 191]. Полагают, что биосинтез белка при действии тетрахлорметана нарушается, а ингибирование микросомального окисления не всегда дает результаты [117]. Действие тетрахлорметана на гепатоциты происходит с активацией метаболических реакций на уровне цитохрома, что позволяет предположить возможность уменьшения биотрансформации ксенобиотика со снижением функциональной активности микросомальных оксигеназ [87]. Отравленные тетрахлорметаном крысы меньше выделяют СгНб, который является показателем перекисного окисления липидов, и СНСІз, характеризующий метаболизм тетрахлорметана [152, 169, 201].
Морфологические изменения в организме крыс при тетрхлормета-новой интоксикации
Проведенные нами в первой серии опытов исследования показывают, что при интоксикации животных тетрахлорметаном отмечаются выраженные морфологические изменения в паренхиматозных и иммунокомпетентных органах.
В печени под действием ксенобиотика отмечаются нарушения микроциркуляции, застой желчи в канальцах и нарушение структуры печеночных пластинок и гепатоцитов. Однако соединительнотканные структуры печени остаются без изменений, междольковая соединительная ткань выражена слабо и определяется только в зоне расположения триады печени.
На рис.1 показано выраженное увеличение диаметра междольковой вены в результате застоя крови, тогда как междольковая артерия остается без изменений. В то же время выявлен застой крови и во внутридольковых сину-соидных капиллярах, иногда в печени определяются очаговые кровоизлияния (рис. 2). Особенно выраженным изменениям подвергаются гепатоциты (рис. 3). При этом границы клеток выявляются недостаточно четко, а цитоплазма заполняется мелкими и крупными жировыми включениями. Крупные жировые капельки вытесняют ядро к периферии клетки, и тогда они приобретают овальную форму. Хроматин ядра становится плотным, во многих случаях ядрышки в них не выявляются. Довольно часто определяются скопления лим-фоидной ткани как в междольковой соединительной ткани, так и внутри дольки печени, однако все они небольшого размера, имеют округлую или овальную форму. Чаще всего небольшие скопления лимфоидной ткани со I провождают междольковые кровеносные сосуды печени. При интоксикации животных четыреххлористым углеродом в печени количество гликогена рез ко снижается (рис.4,5). В результате застоя крови сильно расширяются меж дольковые вены, а междольковая артерия проявляет умеренную реакцию на гликоген, тогда как гепатоциты имеют слабую реакцию. Это закономерная реакция в токсогенезе, так как углеводы дают не только энергию для процес сов метаболизма, но и являются основой для образования глюкуроновой ки слоты, играющую важную роль в процессах детоксикации. Аналогичная ре акция отмечается и в количестве кислых гликозаминогликанов. Так, на рис. 6 показана слабая реакция на них в гепатоцитах и эндотелиоцитах синусоид ных капилляров. Тогда как располагающиеся около центральной вены гепа тоциты имеют умеренную реакцию на этот показатель (рис.7). Гликозами ногликаны в печени животных контрольной группы (рис.6) имеют умеренную реакцию (гепатоциты, эндотелиоциты и макрофаги портальных трактов).
Известно, что гликозаминогликаны играют важную роль во взаимоотноше- нии макро- микроорганизма, регенерации, регуляции ферментных реакций и проницаемости клетки.
В почках животных при интоксикации четыреххлористым углеродом также определяются выраженные деструктивно-дегенеративные процессы, но они различны и зависят от функциональной активности отдельных ее участков. Прежде всего выявляются очаговые кровоизлияния в мозговом веществе почки (рис. 8), или местами кровеносные капилляры сильно переполнены кровью. Особенно заметно деструктивно-дегегенеративным процессам подвергаются нефроны почек. Отдельные почечные тельца сильно уплотняются в результате их инфильтрации лимфоидной тканью (рис. 9). Лимфоид-ная ткань может быть не только среди сети кровеносных капилляров почечных телец, но и в непосредственной близости от почечного тельца. В результате инфильтрации лимфоидной тканью почечные тельца уменьшаются в размерах, кровеносные капилляры сильно суживаются и отмечается наруше 42
ниє циркуляции крови. В канальцах нефрона, особенно в проксимальном отделе, прежде всего коркового вещества имеются белково-углеводные гранулы различного размера, которые заполняют весь просвет канальцев, расширяя их (рис. 10). Они имеют разную плотность расположения и, как правило, заполняют все отделы нефрона. При этом нефроны сильно расширяется, и клетки канальцев приобретают кубическую или даже плоскую форму за счет отрыва апикального конца нефроцитов. Так, в почечных тельцах отмечается умеренная реакция на гликоген, в проксимальных и дистальных отделах нефрона она слабая (рис. 11). При этом только апикальный конец отдельных нефроцитов проявляет умеренную реакцию на гликоген. Изменяется содержание в почечных тельцах кислых гликозаминогликанов: высокая или очень высокая реакция в деструктивно измененных, тогда как в различных участках канальцев нефрона - низкая (рис.12). В то же время гомогенная структура, расположенная в просвете почечных канальцев, проявляет умеренную, а в некоторых участках - высокую реакцию на эти компоненты (рис. 13,14).
При интоксикации животных четыреххлористым углеродом в легких также определяются выраженные гистологические изменения. Особенно характерно наличие разного размера и конфигурации лимфоидных клеток, которые прежде всего концентрируются по ходу бронхов и их сопровождающих кровеносных сосудов (рис. 15). При этом лимфоидные клетки вплотную прилегают к бронхам или кровеносным сосудам, инфильтрируют их наружные оболочки. Довольно часто венозные сосуды переполнены кровью (рис. 16). Лимфоидные клетки и эритроциты могут скапливаться в интерстици-альной соединительной ткани (рис. 17), оказывая сдавливая бронхиолы и альвеолы легкого (рис. 18). Эти светооптические изменения хорошо выражены у всех животных по сравнению с контролем.
Визуально селезенка у животных, подвергшихся интоксикации, увеличена в размерах, отмечается ее полнокровие и отечность. На гистологических препаратах в первую очередь обращает на себя внимание венозное полнокровие (рис. 19), а также периваскулярный отек и миграция лимфоцитов через тонкостенные посткапиллярные вены. Для определения функциональной активности макрофагов селезенки ставили реакцию на наличие железа. Нами установлено, что гранулы железа у животных, отравленных тетрахлормета-ном, выявляются в красной пульпе, гистохимическая реакция на железо слабая, но наблюдается полнокровие органа (рис.20). В красной пульпе венозные синусы сильно расширены в результате полнокровия, в других участках селезенки лимфоидные клетки в красной пульпе распределяются равномерно и плотно ее инфильтрируют (рис.21). Гранулы железа имеются в макрофагах, они мелкозернистые и равномерно распределяются по всей цитоплазме, тогда как в красной пульпе его распределение неравномерное, местами плотное, а в отдельных участках железо в макрофагах встречается в небольшом количестве или вообще не содержится (рис.22).
Следовательно, интоксикация животных сопровождается прежде всего сосудистой реакций как легкого, так и селезенки, а также выраженной реакцией иммунокомпетентных клеток исследованных органов.
Морфологические изменения в организме крыс при интоксикации тетрохлорметаном и коррекции отваром расторопши, карсилом, окси-метилурацилом и их комбинацией
При одновременной интоксикации животных тетрахлорметаном и лечении расторопшей пятнистой в междольковых кровеносных сосудах, а также внутридольковых синусоидных капиллярах застойных явлений не выявляется, сосуды умеренно кровенаполнены (рис.28). В зоне триады печени определяются небольшие скопления лимфоидных клеток. Цитолемма гепатоци-тов выявляется четко, а в цитоплазме клеток не обнаруживаются жировые включения. Однако она имеет пенисто-ячеистое строение, что возможно связано с накоплением кислых гликозаминогликанов и усиление репаративнои регенерации. В то же время в некоторых гепатоцитах отмечаются деструктивные явления в ядрах, они все еще остаются интенсивно окрашенными и оптически более плотными.
В результате токсикоза и одновременного лечения экспериментальных животных расторопшей очаговые кровоизлияния в почках не определяются. В просвете канальцев различных отделов нефрона можно увидеть белково-углеводные гранулы, имеющие небольшие размеры, или они окрашиваются диффузно. Одновременно встречаются свободные от белково-углеводных гранул участки (рис. 29). Кровеносные капилляры, расположенные вокруг канальцев нефрона, остаются переполненными кровью. Нефроциты, образующие стенку нефрона, содержат гранулы, заполненные гомогенной массой, они остаются кубической формы. Тогда как нефроциты канальцев, не содержащие плотную секреторную массу, приобретают низко цилиндрическую или цилиндрическую форму. В меньшем количестве при этом встречаются почечные тельца, инфильтрированные лимфоцитами, макрофагами и плазматическими клетками.
При использовании расторопши с лечебной целью в легочной ткани обнаруживаются гораздо меньшие скопления лимфоидных клеток, в то же время они небольшого размера (рис. 30). Скопления лимфоидных клеток располагаются вокруг артериол, капилляров и венул. При этом заметно увеличивается просвет альвеол. При интоксикации животных с одновременным лечением расторопшеи определяется некоторое увеличение гистохимической реакции на гликоген (рис. 31, 32). В то же время в зоне расположения центральной вены других долек печени появляются единичные гепатоциты с умеренной реакцией на гликоген (рис. 33,34), и в процессе лечения происходит постепенное увеличение количества гепатоцитов, имеющих такую реакцию на полисахарид (рис.35), и даже затем выделяются целые печеночные пластинки (рис. 36).
При лечении экспериментальных животных расторопшеи пятнистой реакция на кислые гликозаминогликаны становится более высокой не только в гепатоцитах, но и в эндотелиоцитах синусоидных капилляров (рис.37). Причем гранулы кислых гликозаминогликанов распределяются равномерно по всей цитоплазме гепатоцитов и эндотелиоцитов капилляров.
При лечении животных расторопшеи реакция на железо в селезенке повышается и соответствует показателям крыс контрольной группы. На рис. 38 отмечается умеренная реакция на железо, макрофаги заполнены им равномерно и распределяются как в макрофагах, так и по всей красной пульпе. Отмечено, что железо в этом случае чаще скапливается крупными гранулами и заполняет всю цитоплазму клетки. Отдельные макрофаги с гранулами железа выявляются в красной пульпе около центральной артерии и маргинальном синусе. Около центральной артерии макрофаги чаще содержат большое количество гранул, они также увеличены в размерах. В маргинальном синусе селезенки макрофаги содержат мелкозернистые гранулы. Полученные данные показывают, что изученные препараты стимулируют активность макрофагов селезенки, повышают элиминацию поврежденных эритроцитов.
Появление избыточного количества эозинофильных клеток в рыхлой соединительной ткани собственной пластинки слизистой оболочки желудка следует объяснить возможной аллергической реакцией организма на токсическое вещество. Однако после применения расторопши у крыс значительно улучшаются морфологические показатели эпителия. Появляется достаточное количество слизи на поверхности, которая имеет умеренную реакцию на гликоген и кислые гликозаминогликаны. Следовательно, интоксикация животных тетрахлорметаном сопровождается прежде всего сосудистой реакций в печени, почках, легком, селезенке и желудке, а также выраженной реакцией иммунокомпетентных клеток исследованных органов. Отвар расторопши пятнистой оказывает выраженное противовоспалительное действие и стимулирует процессы репаративной регенерации.
Методы хирургической коррекции и послеоперационного медикаментозного лечения токсических поражений печени
Анализ данных литературы и собственные экспериментальные исследования на крысах позволили сформировать рабочую гипотезу о роли процессов перекисного окисления липидов и свободно-радикального окисления в генезе токсического гепатита у людей. В клинике наиболее частыми причинами, вызывающими токсическое поражение печени, являются: осложненный деструктивный панкреатит с. острой печеночной недостаточностью; алкогольные гепатиты, циррозы и отравления; суррогатами алкоголя, лекарственные гепатиты; производственные токсические поражения печени, острый токсический гепатит неустановленной этиологии (табл.,8). Основой выявления токсического гепатита является обследование больных с использованием клинико-лабораторных (гематологических, биохимических, иммунологических исследований), инструментальных (ультразвуковое исследование, ультразвуковая доплерография сосудов печени, сцинтиграфия, реогепатография, лапароскопия, биопсия), рентгенологических и функциональных (скенирование печени) методов. Контроль за эффективностью лечения проводили каждые 7 дней с использованием клинического, биохимического методов исследования и анализа данных хемилюмино-грамм.
У 52 из 94 наблюдающихся у нас больных состояние при поступлении в стационар было удовлетворительным, у 34 — средней тяжести и у 8 - тяжелое. Наиболее частой жалобой (56,3%) при поступлении была общая слабость, в ряде случаев (41%) носившая постоянный характер. Наряду с этим больные предъявляли жалобы на недомогание и быструю утомляемость. Чувство тя- \ жести в животе отмечали 53,5% больных, боли различного характера (тянущие, тупые, распирающие) в правом подреберье - 63,7%, в левом подреберье - 42,8%, или одновременно в обоих подреберьях - 28,8%, похудание - 37,5%.
При объективном исследовании у 84,9% больных выявлена желтуш-ность кожных покровов, у 15,1% - видимых слизистых оболочек. При этом выраженная желтушность кожных покровов наблюдалась у 13,9% больных, кожный зуд — у 22,4%.
У ряда больных наблюдались нарушения со стороны желудочно-кишечного тракта: метеоризм - у 18%, диспепсические расстройства - у 42%, обложенный беловато-коричневым налетом влажный язык - у 44%.
Гепатомегалия была установлена у 75% больных, чаще наблюдалось равномерное увеличение обеих долей печени. У 25% больных печень была уменьшена и/или не пальпировалась. Асцит мы наблюдали у 12% больных. При значительном асците, как правило, наблюдалось учащенное дыхание и уменьшение диуреза.
У 24% больных имелись нарушения сердечно-сосудистой системы в виде неприятных ощущений в области сердца, глухости тонов и тахикардии. У больных с асцитом; как правило, наблюдались довольно значительные нарушения на электрокардиограмме.
Спленомегалию мы отметили у 23% больных, в основном с циррозом печени. У 8 больных селезенка была значительно увеличена, у И она не пальпировалась.
Для оценки применявшихся: методов хирургического лечения изучали портальный кровоток в динамике (при поступлении больных в клинику, в различные сроки после операции — через 7 - 14 дней).
Комплексное рентгенологическое обследование произведено у 78 больных токсическим гепатитом: расширение вен пищевода обнаружено у 1-І больных, желудка - у 2, и тех и других - у. 8: На.рентгенограммах пищевода; и желудка остальных больных не выявлено отклонений от нормы. Указанные изменения пищевода и желудка подтверждены при последующей ФГДС.
Общеклинические исследования выявили у 48% больных лейкоцитоз и у 12% - тромбопению.
![Клинико-морфологическая характеристика и оптимизация хирургического лечения узловых эутиреоидных поражений щитовидной железы (клинико-анатомическое исследование) [Электронный ресурс]](/i/i/4705/208959.png "Клинико-морфологическая характеристика и оптимизация хирургического лечения узловых эутиреоидных поражений щитовидной железы (клинико-анатомическое исследование) [Электронный ресурс] Мирошников Сергей Владимирович")