Введение к работе
Актуальность темы:
Врожденная дисфункция коры надпочечников (ВДКН) занимает одно из лидирующих мест по частоте распространенности среди наследственных заболеваний. Одна из ее наиболее частых форм: дефицит 21-гидроксилазы встречается в среднем 1 случай на 1:10.000-15.000, достигая в отдельных этнических фуппах 1:128. Такая частота встречаемости ВДКН наряду с вариабельностью ее клинической картины - от острого надпочечникового криза в раннем перинатальном периоде и ложного гермафродитизма с ошибочным установлением паспортного пола до незначительного гирсутизма и дисменореи у девочек в подростковом возрасте - требует от современной эндокринологии усовершенствования методов диагностики заболевания.
В настоящее время принято выделять 6 вариантов ВДКН: 1) дефицит StAR-протеина (липоидная гиперплазия надпочечников, синдром Прадера); 2) дефицит Зй-стероиддегидрогеназы, 3) дефицит 17-а-гидроксилазы/17,20-лиазы [Р450с17] (синдром Беглиери); 4) дефицит 21-гидроксилазы [Р450с21]; 5) дефицит 11-й -гидроксилазы [Р450с11]; и 6) дефицит Р450 оксидоредуктазы. До начала 90-х годов их диагностика основывалась только на клинико-гормональных маркерах. Однако, степень клинических проявлений ВДКН, особенно редко встречающихся форм и, соответственно, гормональные изменения могли значительно варьировать в рамках одной и той же формы заболевания, что приводило к ошибочной постановке диагноза и неправильному лечению.
Внедрение за последние годы в клиническую практику методов молекулярно-генетического анализа позволило значительно улучшить диагностику ВДКН. В настоящее время, в ряде развитых стран мира, анализ генов, приводящих к развитию различных форм ВДКН, является одним из наиболее значимых методов в диагностическом поиске при подозрении на наличие той или иной формы заболевания. Знание мутации в гене, кодирующем дефектный фермент, позволяет не только предсказать тяжесть течения заболевания, но и проводить пренатальную диагностику, при наличии в семье отягощенной наследственности. В серии популяционных исследований стран Европы и Америки молекулярно-генетический анализ гена СУР21, дефекты в котором приводят к развитию дефицита 21-гидроксилазы, позволил выявить ряд наиболее распространенных мутаций в этом гене, что легло в основу разработки и внедрения скрининга дефицита 21-гидроксилазы в этих странах.
РОС. НЛ!|<Ю!!ЛЛЬНАЯ
Г,ИЬ.!!'0ТГКЛ С.Петербург
В России до последнего времени методы молекулярно-генетического анализа при диагностике ВДКН не использовались. Из всех форм заболевания в нашей стране диагностировался только дефицит 21-гидроксилазы на основании клинических и гормональных данных, маркеры диагностики других форм заболевания разработаны не были. В этой связи представляется актуальным изучение клинических особенностей различных форм ВДКН, разработка алгоритма их гормональной верификации и внедрение методов молекулярно-генетического анализа для усовершенствования дифференциальной диагностики ВДКН с другими формами нарушения стероидогенеза. Разработка и внедрение в клиническую практику методов молекулярно-генетического анализа также позволит осуществлять пренатальную диагностику заболевания в семьях с отягощенным по данному заболеванию анамнезом.
Учитывая распространенность дефицита 21-гидроксилазы, представляется актуальным изучение встречаемости различных мутаций в гене СУР21 в Российской популяции и разработка методов молекулярной скрининговой диагностики для наиболее частых мутаций.
Цель исследования:
Разработка критериев клинической, гормональной и молекулярно-генетической диагностики различных форм ВДКН. Проведение популяционного анализа частоты распространенности молекулярных дефектов СУР21 в России, и разработка методов молекулярно-генетического скрининга для наиболее распространенных в Российской популяции мутаций в гене СУР21
Задачи исследования:
-
Изучить клинические характеристики и особенности нарушений надпочечникового стероидогенеза при различных формах ВДКН
-
Сравнить диагностическую значимость различных гормональных показателей при проведении дифференциальной диагностики различных форм ВДКН
-
Исследовать характер мутаций в генах, кодирующих StAR протеин, фермент 11--гидроксилазу и фермент 17-<г-гидроксилазу/17,20-лиазу
-
Оценить характер и частоту различных мутаций в гене СУР21 среди Российской популяции
-
Разработать методы скрининговой молекулярно-генетической диагностики для наиболее распространенных мутаций в гене СУР21
Научная новизна
Впервые в России проведена комплексная оценка и проанализированы особенности стероидогенеза при различных формах ВДКН, использован мультистероидный анализ плазмы крови для дифференциальной диагностики ВДКН Впервые в нашей стране исследованы молекулярно-генетические основы дефекта StAR протеина, дефицита ферментов: 11-0-гидроксилазы, 17-а-гидроксалазы/17,20-лиазы и 21-гидроксилазы. Описаны 12 новых мутаций в генах StAR, СУР11В1, СУР17 и СУР21.
Впервые в России проведен анализ спектра мутаций в гене СУР21, выявлены наиболее распространенные мутации и определена частота их встречаемости в Российской популяции. Внедрен в практику метод аллель-специфической ПЦР для их скрининговой диагностики.
Практическая значимость
Проведенный анализ позволил изучить клинические особенности и определить критерии гормональной диагностики различных форм ВДКН, разработать алгоритм их дифференциальной диагностики.
Внедрены в клиническую практику методы молекулярно-генетической диагностики различных форм ВДКН
Проведенные исследования позволили оценить распространенность наиболее часто встречаемой формы ВДКН - дефицита 21-гидроксилазы в нашей популяции, выделить 8 наиболее частых мутаций, приводящих к его развитию. На основании полученных данных разработан скрининговый метод молекулярно-генетической диагностики дефицита 21-гидроксилазы для этих мутаций.
Впервые в России проведена молекулярно-генетическая пренатальная диагностика заболевания в семье уже имевшей больного ребенка.
Апробация работы.
Основные результаты исследования по материалам диссертации были доложены на Съездах Европейского Общества Детских Эндокринологов (1997, 1998, 2001, 2202), межотделенческих научных конференциях ЭНЦ РАМН (Москва, 1997,1998, июнь 2004г), ежегодной конференции молодых ученых «Актуальные проблемы эндокринологии» в ГУ ЭНЦ РАМН (Москва, апрель 2004г.).
Публикации:
По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ.
Объем и структура работы.
Похожие диссертации на Клиническая, гормональная и молекулярная характеристика различных форм врожденной дисфункции коры надподчечников
