Введение к работе
Актуальность работы. За последние десятилетия стало ясно, что битва с инфекционными болезнями никогда не будет выиграна В этот период были выявлены новые инфекции, появились вирулентные штаммы давно идентифицированных возбудителей, и значительно расширилась географическая представленность ранее известных инфекционных агентов Совокупность этих инфекций была объединена новым термином — «возникающие» заболевания (от англ слова emerging — возникающий) (Morens DM et al 2004) Появление возникающих и вновь возникающих инфекций обусловлено социально-экономическими факторами, изменяющими мировое устройство рост темпов урбанизации, проникновение человека в новые экосистемы, расширение международных торгово-экономических связей, а вместе с этим увеличение объема путешествий Вирусы гриппа А относят к одним из самых значимых для человечества возбудителей возникающих инфекционных болезней Появление высокопатогенных субтипов вируса в популяции домашних птиц и увеличивающееся количество зарегистрированных случаев прямой передачи возбудителей птичьего гриппа человеку ставят проблему новой пандемии перед мировым здравоохранением Основные эпидемии гриппа 20-го века были вызваны вирусами, произошедшими непосредственно от птичьих вирусов путем генетической реассортации между штаммами гриппа птиц и людей (пандемии 1957 и 1968 гг ) или адаптации птичьего штамма к человеку («испанка» 1918-1919 гг) (Wright PF, Webster RG, 2001) В последнее время все большее значение приобретает прямая передача вирусов гриппа, циркулирующих среди птиц Долгое время существовавшая концепция об ограниченности круга хозяев для возбудителей гриппа птиц рушится на глазах Доказательством тому служат два подтвержденных случая инфицирования вирусом A/H9N2 в Гонконге (Peins М, et al, 1999), вспышка А/Н7Ы7-инфекции в Нидерландах в 2003 году и регистрирующиеся с 1997 года вспышки птичьего гриппа A H5N1-субтипа среди людей (Koopmans М , et al, 2004) Особый интерес представляет возбудитель гриппа A H5Nl-cy6na в связи с тем, что можно провести некоторые параллели между данным вирусом и вирусом «испанки» (подтип H1N1), явившемся причиной гибели до 40 миллионов людей во время пандемии 1918-1919 гг Подобно вирусу «испанки», вирус гриппа А Н5Ш-субтипа может передаваться непосредственно от инфицированных птиц людям, обладает необычайно высокой патогенностью и способностью вызывать генерализованную инфекцию в отсутствии ранее сформировавшегося специфического иммунитета в человеческой популяции, по крайней мере, в определенных возрастных группах Исследования циркулирующих возбудителей демонстрируют продолжающуюся эволюцию вируса и увеличение видового спектра организмов хозяев Нужно отметить угрожающую динамику каждый год происходит удвоение числа заболевших и погибших людей Все эти обстоятельства заставляют рассматривать вирус А Н5Ш-субтипа в качестве наиболее вероятной причины будущих пандемий гриппа В 2005 году в с Суздалка был зафиксирован падеж домашней птицы, который был вызван вирусом Н5Ш-субтипа В кратчайшее время вирусы распространились по территории Западной Сибири, а в
последствии в Центральных регионах и Юго-запада России В результате распространения погибло и было забито более 1 млн голов домашней птицы (Г Г Онищенко, 2006) Происходил контакт населения и больной птицы, который мог привести к заболеванию и гибели людей Поскольку это были первые случаи выявления вирусов высокопатогенного гриппа птиц H5N1-субтипа на территории России, актуальным являлось получение данных о фенотипических особенностях — патогенности для птиц и млекопитающих, филогенетическом положении, серологических свойствах Также было необходимо разработать животные модели гриппа птиц H5N1-субтипа для использования их при разработке вакцин и лекарственных препаратов Решению этих проблем была посвящена данная работа
Цель и задачи исследования.
Целью работы является изучение разнообразия фенотипических, молекулярно-генетических, филогенетических и серологических свойств 7 штаммов вируса гриппа птиц Н5Ш-субтипа, выделенных в России в 2005-2006 годах
В соответствии с поставленной темой необходимо было решить следующие задачи
Определить нуклеотидную последовательность геномов следующих штаммов вирусов гриппа A A/turkey/Suzdalka/12/05, A/chicken/Suzdalka/06/05, A/goose/Suzdalka/10/05, A/chicken/Krasnodar/123/06, A/chicken/Reshoty/02/06 A/duck/Tuva/01/06, A/goose/Krasnoozerskoye/627/05
Провести анализ функционально значимых районов генома
Определить филогенетические отношения изучаемых штаммов и их положение среди вирусов гриппа A H5N1-субтипа
Определить патогенность изучаемых штаммов для модельных животных (кур, мышей линии BALB/c, беспородных хорьков)
Определить серологическую кросс-реактивность антигенов изучаемых штаммов с поликлональными референс сыворотками, полученными на вирусы гриппа птиц H5N1-субтипа, выделенных в период с 1997 по 2004 годы
Определить динамику изменения системной продукции IFN-gamma, TNF-alpha, IL-lbeta, IL-6, IL-10, IL-18 при экспериментальной инфекции BALB/c мышей
Научная новизна и практическая значимость.
В данной работе проведено комплексное изучение молекулярно-генетических, филогенетических, серологических и фенотипических свойств семи штаммов вируса гриппа A H5N1-субтипа, выделенных на территории России в 2005 и 2006 годах
Впервые в мире было показано теоретически и подтверждено экспериментами на животных моделях, что вирусы, принадлежащие кладе 2 субкладе 2, обладают различной патогенностью для млекопитающих
Впервые в мире описано развитие геморрагического синдрома при экспериментальном заражении штаммом гриппа A H5N1-субтипа A/duck/Tuva/01/06 мышей BALB/c
Впервые в России описаны характеристики экспериментальной инфекции у мышей линии BALB/c и беспородных хорьков
Фактически были разработаны модели гриппа птиц H5N1-субтипа, которые могут быть использованы для определения алгоритмов лечения, проверки эффективности существующих и новых противогриппозных препаратов Также эти модели могут быть использованы для проверки иммуногенных и протективных свойств вакцин гриппа птиц H5N1-субтипа
Положения, выносимые на защиту.
Молекулярно-генетический анализ нуклеотидных последовательностей семи штаммов вируса гриппа, выделенных в России в 2005-2006 годах
Результаты исследования патогенных свойств исследованных штаммов на животных моделях (мыши линии BALB/c, беспородные хорьки, куры)
Системная гиперпродукция IFN-gamma, IL-6, IL-lbeta отягчает течение заболевания, вызванного вирусом гриппа птиц H5N1- субтипа
Апробация работы и публикации Материалы диссертации были представлены на Международной конференции «2006 Keystone Symposia Conference Е7 Respiratory Viruses of Animals Causing Disease in Humans» (Сингапур, 2007), на Международной конференции «4th Vaccines All Things Considered» (Вашингтон, 2007), на Международном конгрессе общества по изучению инфекционных заболеваний (ISID) «12 International Congress on Infectious Diseases» (Лиссабон, 2006) и др (11 конференций) Опубликовано 7 статей в ведущих российских и международных журналах За изучение вирусов высокопатогенного гриппа птиц Н5М-субтипа автор удостоен премии "Novartis Vaccine Award for Epidemiology of Infectious Diseases" общества по изучению инфекционных заболеваний (International Society for Infectious Diseases, 2006) Объем и структура диссертации Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, раздела «Результаты и обсуждение», заключения, выводов и списка использованной литературы (6 источников на русском языке и 103 на английском) Диссертация изложена на 124 страницах машинописного текста, включает 8 таблиц, 24 рисунка и одно приложение
![Чувствительность эпидемических штаммов вирусов гриппа А и В к химиопрепаратам [Электронный ресурс]](/i/i/4453/177401.png "Чувствительность эпидемических штаммов вирусов гриппа А и В к химиопрепаратам [Электронный ресурс] Шевченко Елена Сергеевна")
