Введение к работе
Актуальность темы, В современном промышленном животноводстве и птицеводстве для увеличения производства продукции нередко используются различные гормональные стимуляторы роста (естественные и синтетические стероиды, тиреостатики, бета-агонисты и др.), что может приводить к их избыточному накоплению в мясе и мясопродуктах. Это представляет серьезную опасность для здоровья человека, поскольку данные соединения нарушают обменные процессы и гормональный статус организма, влияют на сердечную деятельность, могут обладать канцерогенным эффектом. (Неклюдов А. Д. и др., 1999; Huseby R. А., 1980; ОГпегР. etal, 1992; Сао К. etal, 1988, и др.)
13 связи с этим во многих странах мира ужесточаются требования по контролю за содержанием гормональных препаратов в продуктах животного происхождения, что предусмотрено соответствующими Директивами ЕЭС 89/662/ЕЕС, 90/425/ЕЕС, 96/23/ЕС. В нашей стране Департаментом ветеринарии МСХ РФ издано соответствующее указание по организации Государственного ветеринарного надзора за содержанием гормональных стимуляторов роста и тиреостатнков в продуктах животного происхождения (№10-7-1/900 от 04.10.99 г.), в котором отражены требования по предупреждению попадания гормонов в продовольственное сырье; требования, критерии и мероприятия, касающиеся их применения в ветеринарной практике, а также лабораторный контроль за содержанием этих веществ в продуктах и кормах. Был утвержден также план мероприятий по усилению контроля качества и безопасности продукции животного происхождения, ведению контроля и учета за ее движением и использованием, в котором определены организации и лаборатории, осуществляющие мониторинг импортного продовольственного сырья на наличие ксенобиотиков, в том числе и гормональных стимуляторов роста (Московская горветлаборатория, ЦНМВЛ МСХ И
ГнАОИОШСТЬНАЯ |
БИБЛИОТЕКА I
cHeTtfAprpf ,q% \
Для определения содержания гормонов используются различные
инструментальные методы исследований (радиоиммунные,
хроматографические, спектрометрнческие и др.), которые отличаются трудоемкости, необходимостью иметь дорогостоящую аппаратуру, сложны в постановке и могут использоваться только в лабораторных условиях. С практической ючки зрения наиболее приемлемым является иммуноферментный метод анализа (ИФА), который обладает высокой чувтвительностью, малыми за фатам и времени и средств (Галкин А. В. и др., 1998; Мафёшин Л. 13., 1999; Белоусов А. В., 2002 и др.; Commission Decision 93/257/ЕЕС, 1993, и др.)
Дальнейшее усовершенствование данною метода позволит расширить облаем, ею применения как для научных целей, так и для проведения мониторинговых исследований продукции животного происхождения, чю является в настоящее время актуальной задачей.
Цель и задачи исследовании. Целью работы являлось изучение содержания гормональных стимуляторов роста (прогестерона, тестостерона, эстрадиола-17В) в мясе и усовершенствование метода их определения.
В задачи исследовании входило:
1. Изучить содержание гормональных стимуляторов роста (прогестерона, тестостерона, эстрадиола-17В) в мясе отечественного и импортного происхождения.
2. Определить методические подходы к усовершенствованию
иммуноферментного анализа гормонов в мясе.
3. Офабогагь условия очистки и концентрации полученных экстрактов
из проб мяса, содержащих гормональные стимуляторы роста.
4. Провести сравнительную оценку усовершенствованного метода
определения содержания в мясе прогестерона, тестостерона, и эстрадиола-
17В с общепринятым методом.
5. Изучить влияние температурной обработки мяса на содержание в
нем гормональных стимуляторов роста.
6. Разработать методические рекомендации по определению
гормональных стимуляторов роста (прогестерона, тестостерона, эстрадиола-
17В) в мясе и мясопродуктах с помощью ИФА.
Научная новизна. Изучено содержание гормональных стимуляторов роста (прогестерона, тестостерона, эстрадиола-17В) в мясе отечественного и импортного происхождения. Показано, что в отечественной продукции содержание гормонов не превышало максимально допустимых уровней, в то время как в ряде образцов импортного мяса выявлены превышения МДУ, в некоторых случаях значительные.
Усовершенствована методика определения прогестерона, тестостерона и эстрадиола-17В в мясе с помощью ИФА. Установлено, что применение жидкостно-твердофазной экстракции позволяет увеличить процент выхода гормональных стимуляторов роста из проб мяса и другой продукции животного происхождения в среднем до 45-90% в зависимости от вида гормона, что гораздо выше, чем при использовании общепринятой методики.
Показано, что влияние температурной обработки мяса (варка) снижает уровень содержания в нем гормонов пропорционально длительности температурного воздействия, что позволяет рекомендовать предложенные нами режимы для практического применения.
Практическая ценность работы. На основании результатов исследований разработаны:
- "Методические рекомендации по определению прогестерона в мясе и мясопродуктах методом иммуноферментного анализа" (утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН, 2003 г.);
"Методические рекомендации по определению тестостерона в мясе и мясопродуктах методом иммуноферментного анализа" (утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН, 2003 г.);
"Методические рекомендации по определению эстрадиола- 17В в мясе и мясопродуктах меюдом иммуноферментного анализа" (утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН, 2003 г.).
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на: - 4-ой Международной научно-практической конференции "Актуальные проблемы ветеринарной медицины и ветеринарно-санитарного контроля сельскохозяйственной продукции" (Москва, 2002 г.);
Международной научной конференции "Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных" (ВИЖ, Дубровицы,2002 г.);
пятой Международной научно-технической конференции "Пища. Экология. Человек."(Москва, 2003 г.);
Международной научной конференции "Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных" (ВИЖ, Дубровицы, 2003 г.);
- II Международной научно-практической конференции "Научно-
технический прогресс в животноводстве России — ресурсосберегающие
технологии производства экологически безопасной продукции
животноводства" (ВИЖ, Дубровицы, 2003 г.);
заседаниях Ученого совета ВНИИВСГЭ (2001-2003 г.г.);
межлабораторном совещании ВНИИВСГЭ (2004 г.).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 научных статей.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на ПО стр. машинописною текста и состоит из введения, обзора литературы,
собственных исследовании, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Список литературы включает 136 источников (79 отечественных и 57 зарубежных авторов). Работа иллюстрирована 14 таблицами и 2 рисунками.
