Содержание к диссертации
Введение
2 Обзор литературы 9
2.1 Тяжелые металлы, как техногенный фактор воздействия на животных 9
2.2 Микотоксины, как природный фактор воздействия на животных 18
2.3 Комбинированные поражения животных 29
3 Собственные исследования 34
3.1 Материалы и методы исследований .. 34
3.2 Результаты собственных исследований 3 8
3.2.1 Острая токсичность кадмия хлорида и Т-2 токсина при их раздельном и сочетанном воздействии на крыс 38
3.2.2 Острая токсичность кадмия хлорида 38
3.2.3 Острая токсичность Т-2 токсина 39
3.2.4 Острая токсичность кадмия хлорида и Т-2 токсина при совместном введении белым крысам 41
3.3 Сочетанное действие кадмия хлорида и Т-2 токсина в среднесмертельных дозах 43
3.4 Субхроническая токсичность кадмия хлорида и Т-2 токсина при сочетанном воздействии на крыс 45
3.5 Острая токсичность кадмия хлорида и Т-2 токсина при их раздельном и сочетанном воздействии на кроликов 52
3.5.1 Острая токсичность кадмия хлорида для кроликов 52
3.5.2 Острая токсичность Т-2 токсина для кроликов 54
3.5.3 Острая токсичность кадмия хлорида и Т-2 токсина при сочетанном воздействии на кроликов 55
3.6 Раздельное и сочетанное воздействие кадмия хлорида и Т-2 токсина на овец на уровне ПДК 57
3.7 Лечебно-профилактическая эффективность бентонита при сочетанном поражении сельскохозяйственных животных кадмия хлоридом и Т-2 токсином 62
3.8 Определение содержания кадмия и Т-2 токсина при сочетанном поражении овец на фоне применения бентонита 73
3.9 Ветеринарно-санитарная экспертиза мяса овец при сочетанном поражении кадмия хлоридом и Т-2 токсином и на
фоне применения бентонита 76
3.10. Изучение биологической полноценности мяса при сочетанном поражении животных кадмия хлоридом и Т-2 токсином 78
3.11 Изучение эмбриотоксических и тератогенных свойств мяса опытных овец 79
4 Обсуждение результатов исследований 85
5 Выводы 95
6 Практические предложения 96
7 Список использованной литературы 9
- Микотоксины, как природный фактор воздействия на животных
- Острая токсичность кадмия хлорида и Т-2 токсина при их раздельном и сочетанном воздействии на крыс
- Острая токсичность кадмия хлорида и Т-2 токсина при сочетанном воздействии на кроликов
- Изучение биологической полноценности мяса при сочетанном поражении животных кадмия хлоридом и Т-2 токсином
Введение к работе
Актуальность темы. Антропогенное воздействие на окружающую среду во многих регионах в настоящее время достигло громадных размеров. В этой связи все чаще в кормах обнаруживаются токсиканты как природного, так и техногенного происхождения.
Ситуация еще более осложняется тем, что загрязнение окружающей среды и накопление токсикантов в пищевых цепях носит, как правило, обширный и многокомпонентный характер. Однако суммарный токсический эффект этих токсикантов на живые организмы при совместном поступлении недостаточно изучен.
Среди природных экотоксикантов наиболее распространенными и опасными являются микотоксины, вырабатываемые микроскопическими грибами. Наиболее токсичным для птиц, свиней, овец, крупного рогатого скота является Т-2 токсин, который вырабатывается грибами рода Fusarium (Тутельян В.А., Кравченко Л.В., 1985; Хмелевский Б.Н. и др., 1985; Петрович СВ., 1991; Смирнов A.M., Таланов Г.А. и др., 1999; Кузнецов А.Ф., 2001; Тремасов М.Я, 2002; Иванов А.В., Тремасов М.Я., Папуниди К.Х. и др., 2008).
К токсикантам техногенного происхождения относится группа тяжелых металлов, среди которых наиболее токсичным является кадмий. Основными источниками загрязнения природных экосистем кадмием являются сталелитейные и сталеплавильные заводы, автомобильные выхлопы, сжигание разнообразных отходов, использование фосфатных удобрений и т.д. (Lantzy R.J., 1979; Никаноров A.M., 1991; Шакиров В.З., 1997; Жуленко В.Н. и др., 2002; Новиков В.А. и др., 2006).
В последние годы все чаще встречаются сочетанные загрязнения кормов Т-2 токсином и кадмием. Опасность отравлений этими токсикантами заключается как в острой токсичности, так и в проявлении их высокой биологической активности при многократном поступлении животным в малых дозах. Важной особенностью сочетанного поражения животных является то, что при совместном поступлении они оказывают значительное токсическое воздействие на организм, даже если содержание каждого из них не превышает ПДК. В то же время патогенез сочетанного поражения животных Т-2 токсином и кадмием полностью не изучен и не разработаны средства профилактики и лечения этих отравлений, что является одной из задач ветеринарной фармакологии и токсикологии.
Работа является частью комплексных исследований ФГУ «ФЦТРБВНИВИ» по заданию: «Экологический мониторинг» (№ гос. регистрации 01200202603) Цель и задачи исследований. Основной целью наших исследований было изучение токсичности кадмия хлорида и Т-2 токсина при совместном поступлении, влияние их на организм, а также применение лечебнопрофилактических средств при отравлении животных этими токсикантами.
В соответствии с указанной целью перед нами были поставлены следующие задачи:
• определить параметры острой и хронической токсичности кадмия и Т-2 токсина при сочетанном их поступлении в организм животных; изучить клинико-гематологические, биохимические и патологоанатомические показатели у животных при сочетанном отравлении кадмием и Т-2 токсином; исследовать лечебно-профилактические свойства бентонита Биклянского месторождения РТ при сочетанном поражении животных кадмием и Т-2 токсином;
• провести ветеринарно-санитарную экспертизу и изучить биологическую полноценность мяса овец при сочетанном отравлении кадмием и Т-2 токсином и на фоне применения бентонита.
Научная новизна работы. Впервые изучены токсические свойства кадмия хлорида и Т-2 токсина при совместном их поступлении в организм; получены данные по суммарному влиянию изучаемых токсикантов на клиникогематологические, биохимические показатели крови лабораторных и сельскохозяйственных животных.
Определены патоморфологические изменения во внутренних органах и тканях животных при раздельном и сочетанном воздействии кадмия хлорида и Т-2 токсина.
Впервые научно обоснована и экспериментально доказана лечебнопрофилактическая эффективность применения бентонита при сочетанном отравлении животных кадмия хлоридом и Т-2 токсином.
Практическая ценность работы заключается в том, что на основании проведенных исследований дана комплексная токсикологическая оценка сочетанного воздействия кадмия хлорида и Т-2 токсина на лабораторных и сельскохозяйственных животных, что следует учитывать при санитарной оценке кормов и диагностике отравлений животных.
В качестве лечебно-профилактического средства при сочетанном воздействии кадмия хлоридом и Т-2 токсина на животных, предложен для внедрения в ветеринарную практику бентонит Биклянского месторождения в количестве 2% от рациона.
Результаты исследований использованы при составлении нормативных документов: «Рекомендации по борьбе со смешанными микотоксикозами животных в Республике Татарстан», утвержденные МСХиП РТ; «Методические указания по профилактике микотоксикозов животных в республике Марий Эл», утвержденные Начальником ГУВ РМЭ. Апробация материалов диссертации Основные материалы диссертационной работы доложены, обсуждены и одобрены на научных сессиях ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» по итогам НИР за 2003- 2008 гг., межрегиональных, международных научно — практических конференциях и симпозиумах (Казань 2005; 2006; 2008).
Публикации По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ, в которых отражено основное содержание диссертации, в том числе 3 - включенные в перечень рецензируемых изданий, рекомендованных ВАК РФ: «Ученые записки КГАВМ им.Н.Э.Баумана» и научно-производственный журнал «Ветеринарный врач».
Основные положения диссертации, выносимые на защиту:
• токсикологическая оценка кадмия хлорида и Т-2 токсина при сочетанном поступлении их в организм животных; клинико-гсматологические и биохимические показатели крови животных при сочетанном воздействии кадмия и Т-2 токсина;
• лечебно-профилактическая эффективность бентонита при сочетанном отравлении животных кадмием и Т-2 токсином.
• ветеринарно-санитарная экспертиза мяса животных, отравленных кадмием и Т-2 токсином и на фоне применения бентонита.
Объем и структура работы Диссертация изложена на 116 страницах компьютерного текста и состоит из общей характеристики, обзора литературы, материалов, - методов, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и практических предложений. Работа содержит 28 таблиц и 2 рисунка. Список литературы включает 188 литературных источников, в том числе 53 зарубежных авторов.
Микотоксины, как природный фактор воздействия на животных
Согласно данным Организации по продовольствию и сельскому хозяйству при ООН (ФАО), более 25% всего производимого в мире зерна поражено микотоксинами. Экономические потери, вызванные заражением кормов микотоксинами, ежегодно оцениваются миллиардами долларов (Devegonda, 2002). В некоторые, особенно неблагополучные годы, например в России 1992-1993 гг., экономический ущерб возрастал в несколько раз (Галкин А.В., 2003).
Микотоксины считаются наиболее опасными контаминантами кормов и пищевых продуктов в естественных условиях. Корма и пищевые продукты, содержащие микроскопические грибы с продуцируемыми микотоксинами оказывают неблагоприятное влияние на здоровье сельскохозяйственных животных и человека. На сегодняшний день безусловно доказана их реальная опасность, установлено, что они чрезвычайно широко распространены в природе и наносят глобальный экономический ущерб экономике. В результате поедания животными кормов, содержащих токсические метаболиты жизнедеятельности микроскопических патогенных грибов (микотоксины), развиваются специфические заболевания — микотоксикозы.
Проблема микотоксикозов изучается более чем в 130 странах мира. Дмитриевой И.В. (1991) дан обзор микотоксинов и микотоксикозов в разных странах мира. Экономический ущерб, наносимый микотоксинами, значителен и определяется высокой летальностью и вынужденным убоем животных, заметным снижением их продуктивности, нарушением воспроизводства, материальными затратами на лечение, профилактику, труд специалистов; выбраковкой значительного количества зерна, концентрированных кормов, продуктов животноводства, в которых имеются микотоксины.
Эта проблема имеет и серьезное военное значение в связи с тем, что основные наиболее распространенные фузарио- и афлатоксины - сильные мутагены и канцерогены, а также вещества, нарушающие психическую деятельность и поведение человека (фузариотоксин, Т-2 токсин) (Монастырский О.А., 1993).
Изучение распространения, уровня загрязненности продукции сельскохозяйственного и пищевого назначения является важным при прогнозировании отравлений микотоксинами, разработке методов профилактики и лечения микотоксикозов. Известно, что уровень загрязнения микотоксинами и распространенность их зависит от географических, сезонных факторов, от условий выращивания, уборки, хранения сельскохозяйственной продукции. Накапливание микотоксинов в зерне может происходить в период вегетации растений, после уборки урожая до обмолота - в валках, во время хранения. Постепенная замена «полевых плесеней» на другую группу микромицетов - «плесеней хранения» происходит в зерне, просушенном до кондиционной влажности. При нарушении правил хранения зерна, комбикормов, отрубей, которое сопровождается вторичным увлажнением, происходит интенсивное развитие «плесеней хранения» и накопление микотоксинов.
В настоящее время известно более 1000 штаммов, относящихся к 350 видам различных микроскопических грибов, продуцирующих около 300 токсичных для животных и человека соединений (Тутельян и соавт., 1987).
Из всех описанных плесневых грибов, химическая природа токсинов установлена у 60, и только для 25 видов разработаны методы диагностики при отравлении сельскохозяйственных животных и человека (Аргунов М.Н. и др., 2007).
Основным местопребыванием плесневых грибов является почва, которая служит для них своеобразным резервуаром, т.к. споры грибов могут длительное, время сохранять в ней свою жизнеспособность. В 1 г поверхностной почвы выявляется до 100 видов спор грибов, которые при благоприятных для них условиях (теплая и дождливая погода и др.), попадая в кормовые субстраты, прорастают, образуя мицелий, заражающий корм.
В большинстве случаев заражение грибками происходит во время уборки урожая, транспортировки и неправильного хранения ингредиентов корма или комбикорма. Достаточно высокое содержание влаги в кормах (12% и более), относительная влажность воздуха (80-90%) и диапазон температур (от 10 до 42С) благоприятствуют обильному росту грибов. Температура ниже 10С и даже близкая к 0С, не препятствует поражению кормов грибами (Хмельницкий ГЛ. и др., 1985).
Наибольшую опасность для организма животных представляют корма, загрязненньге микотоксинами, условно относящиеся к двум группам. Первая группа (рода Aspergillus и Penicillium) - так называемые складские грибы, сапрофиты, попадающие в зерновые и грубые корма, главным образом, в период их уборки, но интенсивно развивающиеся в «мертвой» массе корма, особенно при нарушении режимов хранения. Ко второй группе относятся полевые грибы. Они поражают живые растения в период их вегетации и при хранении.
Острая токсичность кадмия хлорида и Т-2 токсина при их раздельном и сочетанном воздействии на крыс
При введении кадмия хлорида в дозе 100мг/кг наблюдалось незначительное возбуждение и саливация, отказ от корма, взъерошенность шёрстного покрова. Клинические признаки отравления проявлялись через 4-5 ч и исчезали спустя 13-20ч. У крыс, которым задавали кадмия хлорид в дозе 120 мг/кг, клинические признаки наступали через 3-4 ч и характеризовались возбуждением, саливацией, жевательными движениями, отказом от корма и воды, взъерошенностью шёрстного покрова, наблюдалось нарушение координации движения. Через 6 ч одно животное пало, у оставшихся живых крыс состояние нормализовалось через 24 ч. При увеличении дозы кадмия хлорида до 160 мг/кг, клинические признаки отравления появились через 3 ч после затравки и проявлялись тяжёлым дыханием, сильным возбуждением, саливацией, нарушением координации движения, тремором, парезом и параличом задних конечностей. Внешнее состояние выживших животных нормализовалось через 30 ч. У крыс, получавших кадмий в дозе 200мг/кг, уже через 2,5 ч проявлялись все выше перечисленные признаки интоксикации. Гибель всех животных с нарастающими признаками интоксикации наступала в течение 4-5 ч от момента поступления кадмия хлорида.
Патологоанатомические изменения павших животных характеризуются точечными кровоизлияниями на эпикарде, очагами кровоизлияний в головном мозге, дегенеративными изменениями в печени и почках, явлениями гастроэнтерита с очагами некроза на слизистой оболочке желудка, а также катаральным воспалением слизистой оболочки кишечника.
Животные, получавшие Т-2 токсин, были разделены на 6 групп по 6 крыс в каждой. Т-2 токсин задавали в 5%-ном водно-спиртовом растворе в дозах от 2,5 доЗ,5мг/кг. Результаты экспериментов по определению острой токсичности Т-2 токсина для крыс представлены в таблице 3.
При введении крысам Т-2 токсина в дозе 2,5 мг/кг видимых клинических изменений в их поведении и в общем состоянии не наблюдалось. У крыс, получавших Т-2 токсин в дозах 2,7 и 2,9 мг/кг, первые клинические признаки отравления появились через 2-3 ч и проявлялись угнетением, отказом от корма и воды, а также учащением дыхания. Через 5 и 6 ч две крысы пали, а у оставшихся в живых состояние нормализовалось через 10-12 ч.
При затравке большими дозами (3,1 и 3,3мг/кг) микотоксина у крыс отмечалось сильное угнетение, понижение тактильной и болевой чувствительности, пищевая возбудимость отсутствовала, животные лежали забившись в угол клетки (погибло 3 и 4 крысы соответственно). При введении крысам Т-2 токсина в дозе 3,5мг/кг, все животные в группе погибли в течение 18-20 часов с момента поступления Т-2 токсина.
При патологоанатомическом вскрытии павших животных отмечены следующие изменения: трупное окоченение хорошо выражено, слизистые оболочки анемичны. В грудной полости обнаружен серозно-геморрагйческий экссудат красного цвета. Сердце тёмно-вишнёвого цвета, лёгкие плотной консистенции, пёстрой окраски. Брюшная полость содержала серозный экссудат светло-красного цвета. Печень плотная, от тёмно-вишнёвого до жёлтого цвета.
Крысы, получавшие совместно кадмий и Т-2 токсин, были также разделены на 6 групп по 6 животных в каждой. Кадмий задавали в диапазоне доз от 50 до 75 мг/кг, Т-2 токсин от 0,5 до 2,0 мг/кг. Результаты определения токсичности кадмия и Т-2 токсина при сочетанном воздействии на крысах представлены в таблице 4.
После введения крысам кадмия и Т-2 токсина в дозах 50 и 0,5 мг/кг, соответственно, возникали лишь незначительные признаки отравления, которые характеризовались вялостью и сонливостью. Клиническое состояние животных восстанавливалось через 24 ч. При введении крысам кадмия и Т-2 токсина в дозах 55 и 0,8 мг/кг соответственно, клинические признаки
проявлялись через 3-4 ч и характеризовались угнетением, саливацией, нарушением координации движения, отказом от корма и воды. Через 8 ч одно животное пало. Клиническое состояние выживших животных нормализовалось через 24 ч. При дозах кадмия и Т-2 токсина 65 и 1,4 мг/кг соответственно, клиническая картина характеризовалась: резким возбуждением животных, которое быстро сменялось угнетением, учащённым и тяжёлым дыханием. По мере развития клинической картины у крыс наблюдали мышечную слабость, шаткость походки и парез, преимущественно, задних конечностей. Затем возникали парезы и передних конечностей. В этот период у них наблюдали резко выраженные признаки легочной недостаточности, проявляющиеся одышкой и гибелью в стадии судорог. Восстановление выживших животных происходило в течение 1,5-2 сут. Гибель всех животных в группе происходила при дозах кадмия и Т-2 токсина 75 и 2,0 мг/кг соответственно, с выше перечисленными признаками интоксикации.
При патологоанатомическом вскрытии павших животных в грудной и брюшной полостях обнаружили несвернувшуюся кровь тёмно-красного цвета. Полости сердца кровенаполнены. Отёк легких. Печень, тёмно-вишнёвого цвета, увеличена в объёме. Отмечены многочисленные точечные кровоизлияния в подкожной клетчатке и на слизистых оболочках тонкого и толстого отделов кишечника. Наблюдали отёк и кровоизлияния в головном мозге.
Острая токсичность кадмия хлорида и Т-2 токсина при сочетанном воздействии на кроликов
Для изучения острой токсичности сочетанного воздействия кадмия и Т-2 токсина кролики были также разделены на 6 групп по 6 животных в каждой. Кадмия хлорид задавали в водном растворе в интервале доз от 40 до 60 мг/кг, а Т-2 токсин в 5%-иом водно-спиртовом растворе от 0,34 до 0,44 мг/кг. Результаты опытов по определению среднесмертелыюй дозы кадмия и Т-2 токсина при их сочетанном воздействии на кроликов представлены в таблице 13.
Проведенные эксперименты показали, что после введения кроликам кадмия хлорида и Т-2 токсина в дозах 40 и 0,34 мг/кг соответственно, возникали лишь незначительные признаки отравления, которые характеризовались слабостью и сонливостью. При введении кроликам кадмия хлорида и Т-2 токсина в дозах 44 и 0,36 мг/кг соответственно, клинические признаки проявлялись через 4-5 ч и характеризовались нарушением координации движения, отказом от корма и воды.
Через 8 ч одно животное пало. Клиническое состояние выживших животных нормализовалось через 24 ч. При дозах кадмия хлорида и Т-2 токсина 52 и 0,40 мг/кг соответственно, клиническая картина характеризовалась: резким возбуждением животных, которое быстро сменялось угнетением, учащённым и тяжёлым дыханием. По мере развития клинической картины у кроликов наблюдали мышечную слабость, парез, преимущественно, задних конечностей. Затем возникали парезы и передних конечностей. Таблица этот период у них наблюдали одышку и гибель трех кроликов в стадии судорог. Восстановление выживших животных происходило в течение 2-2,5 суток. Гибель всех животных в группе происходила при дозах кадмия хлорида и Т-2 токсина 60 и 0,44 мг/кг, соответственно, с выше перечисленными признаками интоксикации.
При патологоанатомическом вскрытии павших животных наблюдали следующую картину: полости сердца кровенаполнены, печень тёмно-вишнёвого цвета, увеличена в объёме, на слизистых оболочках желудочно-кишечного тракта многочисленные кровоизлияния. Наблюдали отёк головного мозга и кровоизлияния в подкорковом слое. Расчётная среднесмертельная доза при сочетанном отравлении кроликов кадмием и Т-2 токсином равняется: 2(z d) 48 (7) п Для кадмия: ДЦ,0 =ЛДШ = 60—- = 52мг/кг Для Т-2 токсина: ЛД0 =щт-=к—1 = 0944-- — = 0,40л1г/кг (8) п
Таким образом, опыты, проведённые на кроликах, также свидетельствуют о том, что кадмий и Т-2 токсин при сочетанном воздействии на животных вызывают смертельный исход в меньших дозах, чем при их раздельном введении.
Токсическое влияние кадмия и Т-2 токсина при их раздельном и сочетанном воздействии в дозах, соответствующих предельно-допустимым концентрациям (ПДК) исследовали на овцах.
Из девяти животных были сформированы три группы по три головы в каждой. В течение всего эксперимента (30 сут) овцы перорально, в виде болюсов получали кадмия хлорид в дозе 0,3 мг/кг (первая группа), Т-2 токсин в дозе 0,1 мг/кг (вторая группа), сочетано кадмия хлорид и Т-2 токсин в аналогичных дозах (третья группа). В течение 30 суток за животными вели наблюдение, отмечая их поведение, клинические признаки, исследуя гематологические и биохимические показатели.
Исследования показали, что раздельное введение токсикантов в первые дни не сопровождалось заметными изменениями со стороны общего состояния животных. В дальнейшем, отмечалось беспокойство, ослабление аппетита, повышение болевой и тактильной чувствительности.
Раньше всех клинические признаки отравления начали проявляться у овец, получавших сочетано кадмия хлорид и Т-2 токсин. Через 16 сут с начала опыта у этих овец отмечалось угнетение, снижение аппетита; спустя еще четверо суток (20-й день эксперимента) появились диарея, эрозии кожи губ и слизистой оболочки ротовой полости. У животных первой и второй групп угнетение, снижение аппетита и диарея проявились на 21-й и 24-й день. Данные по количеству гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов, а также СОЭ представлены в таблице 15, из которых следует, что у животных, получавших
кадмий, количество эритроцитов, на 10-е сут опыта несколько снизилось, к 20 суткам это снижение составило 8,4%), а к 30 дню - 10,2% от фоновых данных. У овец второй группы этот показатель снижался незначительно в течение всех 30 суток наблюдений. При сочетанном воздействии кадмия и Т-2 токсина спустя 30 суток этот показатель снизился с 7,7 10 "г/л до 6,3 10 "г/л. Таблица 15 - Гематологические показатели у овец при воздействии кадмия хлорида и Т-2 токсина на уровне ПДК (п=3)
Изучение биологической полноценности мяса при сочетанном поражении животных кадмия хлоридом и Т-2 токсином
Белки являются основой жизни: они выполняют роль пластического материала, необходимого для построения клеток, входят в состав ферментов, гормонов, антител; служат источником энергии; из них могут образовываться углеводы и жиры; они обладают буферными свойствами и поэтому поддерживают кислотно-щелочное равновесие, создают онкотическое давление плазмы крови и этим регулируют обмен воды в организме (Мелехин Г.П. и др., 1977).
Именно поэтому исследование отдельных показателей обмена белков в сыворотке крови имело большое значение для определения влияния бентонита на течение интоксикации животных опытных групп.
Количество общего белка в крови всех контрольных (сочетанная затравка кадмием и Т-2 токсином) и опытных (сочетанная затравка кадмием и Т-2 токсином на фоне применения бентонита) овец снижалось. У контрольных животных снижение этого показателя было существенным и составило на 10-15 сутки 19 и 17% соответственно. С 15 сут наблюдалось постепенное повышение количества общего белка, и к 40 сут этот показатель достигал фоновых величин. При использовании бентонита изменения носят подобный характер, но менее значительны и к 30 сут отмечено полное восстановление этого показателя.
Изучение процентного содержания фракций белка показало, что количество альбуминов у всех опытных овец снижалось. Особенно это заметно у контрольных овец (без бентонита), у них эта фракция снизилась к 10 суткам на 26%. В то же время, при применении бентонита снижение составило лишь 13%.
Поскольку синтез альбумина, в основном, осуществляется в печени, то снижение количества данной фракции вызвано, вероятно, нарушением белоксинтезирующей функции этого органа. Эти данные подтверждаются и другими исследователями (Suneja S. et al., 1983; Кравченко Л.В. и др., 1995). Другим важным физиологическим свойством альбумина является транспорт азота в ткани организма, и снижение этого показателя приводит к дефициту азотистых продуктов, влекущего за собой распад белков в тканях и органах и, как следствие, нарушению белкового обмена у животных. Дефицит белка в организме, как доказали Кравченко Л.В., Хвыля СИ. и др. (1983), нарушает образование SH-глутатиона и понижает активность глутатионтрансферазы, играющих важную роль в детоксикации микотоксинов, в частности Т-2 токсина.
Снижение количества альбуминов, особенно некомпенсированное, является, по-видимому, одной из причин нарушения деятельности сердечнососудистой системы, так как альбумины сохраняют объем крови путем энергичного связывания воды (Троицкий Г.А., 1962). Снижение их содержания приводит к уменьшению объема воды в крови, повышению вязкости плазмы и увеличению нагрузки на сердце.
Такая же тенденция сохраняется и по глобулиновым фракциям: в состав а-глобули нов входят гликопротеины и мукопротеины, состоящие из углеводов ковалентно связанных с белком.
Некоторые белки участвуют в свертываемости крови, например, гаптоглобулин, образует с гемоглобином комплекс, который поглощается ретикулоэндотелиальной системой, что препятствует уменьшению содержания в организме железа, входящего в состав гемоглобина; гликопротеин, который содержит почти всю медь плазмы; церулоплазмин катализирует окисление кислородом аскорбиновой кислоты, ароматических диаминов. В составе а-глобулиновой фракции находятся полипептиды брадикининоген и каллидиноген, активируемые протеолитическими ферментами плазмы и тканей. Их активные формы - брадикинин и каллидин образуют кининовую систему, регулирующую проницаемость стенок капилляров и активирующую систему свертывания крови. Процентное содержание а-глобулинов в результате затравки незначительно увеличилось. Достоверное увеличение отмечалось у контрольных овец и на 10 сут составило 31,0%.
Содержание Р-глобулинов также увеличилось у всех опытных овец, но в различной степени. Наиболее значительные изменения отмечены у животных контрольной группы и составили к 10 сут 120,5%. При применении бентонита, увеличение этого показателя было менее значительным и составило на данный срок 49,5%.
Количество у-глобулинов у опытных овец уменьшалось незначительно. Только у контрольных животных на 10 сут отмечено достоверное снижение этого показателя на 22,0%.
Изменения протеинограммы в наших экспериментах, подтверждаются данными других исследователей, которые отмечали при микотоксикозах цыплят, свиней, овец, телят, обезьян снижение общего белка крови, фракций альбумина, у-глобулина (Рухляда В.В., 1983; Романов Г.А., 1991; Красников Г.А. и др., 1992; Madhyastha М., 1992).
Активность щелочной фосфатазы, которая может служить показателем состояния печени и кишечника, увеличилась без применения бентонита на 100%. При применении бентонита увеличение активности фермента было менее значительным и составило 53,0% по сравнению с фоном.
Изучение активности таких ферментов, как АЛТ, ACT и ЛДГ, имеет важное значение для диагностики болезней печени. Кроме того, ACT и ЛДГ характеризуют и работу сердца. Результаты исследований показали значительное увеличение уровня активности аланинаминотрансферазы в крови всех опытных овец. У затравленных животных без применения бентонита активность фермента увеличилась более, чем на 100%. Введение в рацион опытных животных адсорбента увеличивало активность АЛТ менее значительно - на 52,0%.
