Введение к работе
Актуальность темы. Одним из перспективных источников биологически активных веществ (БАВ), является уникальное растение Сибирского региона - облепиха крушино-видная HippophaS rhamnoides L., сем. лоховые (Elaeagnaceae), традиционным сырьем которой являются плоды. В последние годы сотрудниками кафедры фармацевтической технологии АГМУ, НИИ фармакологии г. Томска и ЗАО «Алтайвитамины» в качестве источников получения препаратов противоопухолевого и противоязвенного действия предложены кора и побеги указанного растения. В ходе экспериментальных исследований был разработан ряд жидких и сухих экстракционных препаратов, в основе которых лежат вещества, содержащие в своей структуре свободные фенольные гидроксилы, такие как алкалоид серотонин и конденсированные дубильные вещества [Турецкова В.Ф., Зуева Е.П. с соавт., 2001].
Установлено, что выраженным противоопухолевым действием обладает только жидкий экстракт побегов и коры облепихи Включение стадии сушки в технологическую схему получения экстракционных препаратов из данных видов сырья приводит к потере противоопухолевого действия при сохранении противоязвенной активности [Турецкова В.Ф. с соавт., 2001], что, по-видимому, обусловлено разрушением нативного комплекса БАВ. Вместе с тем, жидкий экстракт побегов и коры облепихи, несмотря на высокую эффективность действия, как и все жидкие экстракты, имеет ряд недостатков: непортативность и трудность использования в процессе изготовления дозированных лекарственных форм; выпадение осадка при длительном хранении ввиду большой насыщенности БАВ и сопутствующими веществами; недостаточно приятный вяжущий и горьковатый вкус.
Из данных литературы известно, что современное развитие фармацевтической технологии позволяет устранить перечисленные недостатки различными способами. Так, одним из перспективных направлений в настоящее время является использование процесса иммобилизации БАВ на сорбентах разнообразной химической природы в процессе изготовления различных, в том числе и твердых, лекарственных форм Иммобилизация БАВ не только повышает стабильность препарата за счет включения в разветвленную структуру полимера или в результате адсорбции на носителе, но и в значительной мере увеличивает эффективность препарата за счет возможности потенцирования действия активных компонентов и носителя.
Наличие в побегах и коре облепихи комплекса соединений, содержащих в своей структуре свободные фенольные гидроксилы, позволяет предположить в отношении экстракта побегов и коры облепихи крушиновидной жидкого и другие виды фармаколо-
4 гической активности, так как одним из механизмов действия фенольных соединений является способность иигибировать свободнорадикальные реакции в организме. Обращает на себя внимание тот факт, что антиоксидантные свойства являются предпосылкой разнообразных видов действия, в том числе и гепатопротекторного, и то, что многие энтеросорбенты, в том числе СУМС-1 и'полифепан [Поспелова Т.И. с соавт., 1999; Чучалин B.C. с соавт., 2003], используются в комплексном лечении токсических повреждений печени.
Учитывая широкое распространение в настоящее время заболеваний, вызванных токсическими поражениями печени, проведение исследований по разработке гепатопротекторного препарата в виде твердых лекарственных форм за счет использования процесса иммобилизации БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной на энтеросорбенте, является актуальной проблемой.
Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования является создание оригинального иммобилизованного препарата с гепатопротекторной активностью на основе биологически активных веществ побегов и коры облепихи крушиновидной и энтеросор-бента.
Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
Изучить кинетику сорбции и десорбции БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной на эптеросорбентах СУМС-1 и полифепан.
Выбрать оптимальный носитель для иммобилизации БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной.
Разработать оптимальную технологию иммобилизованного препарата БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной, а также его таблетированной и капсулированной лекарственных форм с высокой фармацевтической и биологической доступностью
Провести стандартизацию, изучить стабильность иммобилизованного препарата и разработанных лекарственных форм.
Изучить антиоксидантную и гепатопротекторную активность иммобилизованного препарата.
Разработать проекты нормативной документации на иммобилизованный препарат и лекарственные формы.
Научная новизна работы. Теоретически обоснована и экспериментально подтверждена целесообразность использования коры и побегов облепихи крушиновидной как источника БАВ с антиоксидантной и гепатопротекторной активностью.
Впервые проведены исследования по иммобилизации алкалоида серотонина, суммы конденсированных дубильных веществ и катехинов на сорбентах СУМС-1 и полифепан. Выявлено, что сорбция изучаемых БАВ возможна в обоих случаях.
Установлено, что процесс сорбции на сорбенте СУМС-1 подчиняется мономолекулярной теории Ленгмюра, на сорбенте полифепан - полимолекулярной теории БЭТ. Изучены процессы десорбции БАВ коры и побегов облепихи с сорбентов СУМС-1 и полифепан в кислую, щелочную и нейтральную среды. Доказано, что практически полная десорбция иммобилизованных БАВ с сорбента СУМС-1 осуществляется только в кислую среду. Установлено, что оптимальным носителем для БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной является гранулированная фракция энтеросорбента СУМС-1.
Теоретически и экспериментально обоснованы оптимальный состав и технология получения таблеток «ЭкоСорб» методом прямого прессования. Установлены оптимальные технологические параметры для получения капсулированной лекарственной формы, обеспечивающие высокие показатели фармацевтической доступности.
Впервые разработаны методики качественного и количественного определения алкалоида серотонина методом ВЖХ в гранулах, таблетках и капсулах «ЭкоСорб».
Выявлены антиоксидантная и гепатопротекторная активность разработанного препарата «ЭкоСорб». Установлено, что иммобилизация БАВ побегов и коры облепихи приводит к повышению их антиоксидантного и гепатопротекторного действия.
Практическая значимость. Разработана рациональная технология получения гранул «ЭкоСорб» способом пропитки, в основе которой лежит иммобилизация БАВ побегов и коры облепихи крушиновидной на энтеросорбенте СУМС-1.
Выявлен способ повышения антиоксидантного и гепатопротекторного действия БАВ побегов и коры облепихи за счет их иммобилизации на энтеросорбенте СУМС-1.
В результате проведенных экспериментов созданы стабильные иммобилизованные препараты на основе БАВ коры и побегов облепихи и энтеросорбента СУМС-1 в виде капсулированной и таблетированной лекарственных форм, которые после дополнительных доклинических и клинических испытаний могут быть предложены в качестве гепатопро-текторных средств.
По результатам исследований разработаны следующие проекты ФСП: «ЭкоСорб гранулы», «ЭкоСорб капсулы 500 мг», «ЭкоСорб таблетки 500 мг» и проекты лабораторных регламентов. «ЭкоСорб гранулы», «ЭкоСорб капсулы 500 мг», «ЭкоСорб таблетки 500 мг». В ЦЗЛ ЗАО «Алтайвитамины» проведена апробация предлагаемых технологий гранул, капсул и таблеток «ЭкоСорб» по схемам лабораторных регламентов. Установлена стабильность показателей качества гранул в течение 3,5 лет, таблеток и капсул «ЭкоСорб» -2,5 лет.
Результаты исследований по разработке технологии и стандартизации гранул, капсул, таблеток «ЭкоСорб» используются в лекционном курсе, на лабораторных занятиях по фармацевтической технологии и фармацевтической химии (акты внедрения)
На защиту выносятся результаты экспериментального и теоретического обоснования получения иммобилизованного препарата «ЭкоСорб» на основе БАВ коры и побегов облепихи, изучения его антиоксидантной и гепатопротекторной активности и разработки таблетированной и капсулированной лекарственных форм.
Апробация работы. Основные положения диссертации обсуждались на Городской конференции «Молодежь-Барнаулу», медицинский раздел (Барнаул, 2003, 2004, 2005), Всероссийской конференции «Молодые ученые-медицине» (Самара, 2003); 59-й, 61-ой региональной конференции по фармации и фармакологии (Пятигорск, 2004, 2006); Конференции студентов и молодых ученых «Международный форум молодых ученых и студентов» (Ан-талия (Турция), 2004); Научной конференции, посвященной 50-летию Алтайского государственного медицинского университета (Барнаул, 2004); II конференции студентов, молодых ученых и специалистов «Современные проблемы науки и образования» (Хургада (Египет), 2005); Всероссийской научно-практической конференции «Современные проблемы фармакологии и фармации» (Новосибирск, 2005); Юбилейной научной конференции, посвещенной 30-летию фармацевтического факультета АГМУ (Барнаул, 2005); Всероссийской научно-практической конференции «Современные принципы и технологии разработки лекарственных средств» (Москва, 2006).
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет Росздрава» по медико-биологическим проблемам, раздел «Фармация» (№ Гос регистрации 01200301413).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 16 печатных работ, в том числе 2 - в зарубежной (Турция, Египет) и 1 статья в ведущем рецензируемом журнале.
Автор выражает благодарность сотрудникам Сибирского государственного медицинского университета (г. Томск), в частности зав кафедрой фармацевтической технологии, доктору фарм наук, профессору B.C. Чучалину, за содействие в проведение фармакологических испытаний разработанных иммобилизованных препаратов, сотрудникам кафедры фармакологии АГМУ (доктору мед. наук, профессору, Я.Ф. Звереву) за помощь в проведении фармакологических исследований, а также сотрудникам ООО «Сорби-Фарм», г. Новосибирск (И.И. Фроловой) за помощь в проведении некоторых физико-химических исследований.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 176 страницах машинописного текста, содержит 28 таблиц и 28 рисунков. Работа состоит из введения, обзора литературы, 3 глав экспериментальных исследований, выводов, списка литературы и приложения. Список литературы включает 169 источников, из которых 21 на иностранных языках.
