Содержание к диссертации
ВВЕДЕНИЕ 6
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 11
Краткая характеристика процесса воспаления и методы лечения 11
Характеристика и применение босвеллии 12
1.2.1. Биологическая активность индивидуальных кислот, механизмы
действия 16
1.2.2 Применение хроматографических методов анализа для изучения
состава, фармакокинетики и биотрансформации экстракта босвеллии 19
1.3. Характеристика и применение куркумы 22
Биологическая активность куркуминоидов 23
Методы анализа куркумина и его производных 27
Характеристика и применение семян сосны кедровой сибирской (СКС).29
Лекарственные формы и терапевтическая эффективность лекарств 32
1.5.1 Методы оценки биологической доступности in vitro....-:. 34
1.5.2.Методы определения биологической доступности в опытах in vivo 37
1.6 Применение инструментальной ТСХ в анализе фитопрепаратов 39
ГЛАВА И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 43
Материалы исследования 43
Физико-химические методы исследования 44
2.2.1 Хроматографические методы анализа 46
2.3 Методы биофармацевтического и фармакологического анализа 49
Изучение фармакокинетики in vitro 49
Изучение фармакокинетики in vivo 50
Оценка противовоспалительного действия исследуемых образцов in vivo 52
Оценка противовоспалительного действия in vitro 55
ГЛАВА III. ИЗУЧЕНИЕ ЭКСТРАКТА БОСВЕЛЛИИ 57
3.1 Разработка методики количественного определения 4-х индивидуальных
(3-босвеллиевых кислот (БК, АБК, КБК и АКБК) методом ТСХ 57
Физико-химическая характеристика экстракта босвеллии 60
Изучение биофармацевтических свойств экстракта босвеллии 63
Исследование скорости высвобождения босвеллиевых кислот в эксперименте in vitro 63
Исследование фармакокинетики экстракта в эксперименте in vivo 68
Корреляция фармакокинетических данных, полученных для КБК и АКБК 74
3.4 Исследование противовоспалительных свойств экстракта босвеллии in
vivo 75
ГЛАВА IV. ФРАКЦИОНИРОВАНИЕ И ОЦЕНКА
ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ ФРАКЦИЙ ЭКСТРАКТА
БОСВЕЛЛИИ 79
4.1 Фракционирование экстракта босвеллии методом пошагового
градиентного элюирования и изучение физико-химических свойств
полученных фракций 79
4.1.1 Фракционирование экстракта босвеллии методом колоночной хроматографии и физико-химическая характеристика полученных фракций81
4.2 Изучение фармакологических свойств фракций экстракта босвеллии 86
Оценка противовоспалительного действия фракций экстракта босвеллии in vivo 86
Оценка противовоспалительного действия фракций экстракта
босвеллии in vitro 90
ГЛАВА V. РАЗРАБОТКА КОМПЛЕКСНОГО
ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА, СОДЕРЖАЩЕГО
ЭКСТРАКТ БОСВЕЛЛИИ И БАВ СЕМЯН СКС И КОРНЕВИЩ КУРКУМЫ
94
Выбор лекарственной формы 94
Разработка состава и технологии противовоспалительного средства, содержащего экстракт босвеллии и БАВ семян СКС и корневищ куркумы ..95
5.2.1 Получение масляного экстракта семян СКС, корневищ куркумы и
раствора экстракта босвеллии 95
5.2.2. Изучение противовоспалительной активности комплексного
противовоспалительного средства in vivo 98
5.2.3 Изучение антирадикальной активности в отношении радикала DPPH»
комплексного средства и его компонентов 105
5.2.3.1 Изучение антирадикальной активности куркуминоидов 108
5.2.4 Технология мягких желатиновых капсул, содержащих экстракт
босвеллии в масляном экстракте семян СКС и корневищ куркумы 112
5.3 Изучение биофармацевтических свойств Артро-Актива 121
Изучение скорости растворения босвеллиевых кислот и куркуминоидов в эксперименте in vitro 121
Изучение фармакокинетики Артро-Актива в эксперименте in vivo 123
5.3.2.1. Фармакокинетика куркумина 124
5.3.2.2 Фармакокинетика босвеллиевых кислот 128 \
5.3.3 Корреляция фармакокинетических данных, полученных для АКБК из
Артро-Актива 131
5.4 Анализ качества и выбор параметров стандартизации Артро-Актива.... 132
ВЫВОДЫ 135
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ Г. 137
ПРИЛОЖЕНИЯ 156
Список используемых сокращений
АБК - 3-0-ацетил-Р-босвеллиевая кислота;
АКБК - З-Оацетил-11-кето-р-босвеллиевая кислота;
АРА - антирадикальная активность;
БАВ - биологически активное(ые) вещество(а);
БАД - биологически активная добавка;
БК - (3-босвеллиевая кислота;
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография;
ВЭТСХ - высокоэффективная тонкослойная хроматография;
КБК - 11 -кето- р-босвеллиевая кислота;
5-ЛО - 5-липооксигеназа;
НПВП - нестероидные противовоспалительные препараты;
ПНЖК - полиненасыщенные жирные кислоты;
Стах - максимальная концентрация препарата в крови;
СКС - сосна кедровая сибирская;
СОЭ - скорость оседания эритроцитов;
Ті/2 - период полувыведения;
Ттах - время достижения максимальной концентрации.
ТИ - терапевтический индекс;
ТСХ - тонкослойная хроматография;
2-ЦОГ - 2- циклооксигеназа;
ЦРБ - Ц-реактивный белок;
AUCco - полная площадь под кривой;
О - общий клиренс;
DPPH - 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил;
IL-lb, IL-6, IL-8 - интерлейкин-1 бета, интерлейкины 6 и 8;
LTB4 - лейкотриен В4;
MRT - среднее время удержания препарата до элиминации;
NFkB - ядерный фактор кВ;
PGE2 - простогландин Е2;
TNF а - фактор некроза опухоли а;
Vss - стационарный объем распределения;
Введение к работе
Природные соединения, выделяемые из лекарственных растений, используются в традиционной медицине в течение сотен лет, и интерес к ним не угасает (Самылина И.А., Баландина И.А., 2004). В настоящее время, с развитием рынка биологически активных добавок к пище, интерес к природным соединениям обусловлен их несомненными преимуществами перед синтетическими лекарственными средствами. Преимуществами природных средств являются мягкое, постепенное воздействие на организм, отсутствие тяжелых побочных эффектов и осложнений, что дает возможность длительного применения природных средств для профилактических целей.
В последнее время отмечается повышенный интерес к комплексным растительным препаратам, содержащим нативный комплекс как биологически активных, так и сопутствующих компонентов растения, которые зачастую усиливают фармакологическое действие препарата.
Расширение ассортимента современных эффективных и безопаных лекарственных средств может быть достигнуто с внедрением в отечественную медицинскую практику новых лекарственных препаратов природного, в том числе растительного происхождения.
Актуальность темы
Одним из основных направлений развития современной фармацевтической науки является расширение ассортимента и поиск эффективных лекарственных средств природного, в том числе растительного происхождения. Актуально при этом создание новых препаратов на основе известных лекарственных растений, действие и состав которых хорошо изучены.
Нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) относятся к числу наиболее важных «симптоматических» лекарственных средств, особенно при лечении ревматических болезней (Насонов Е.Л., 2000, 20026). Это определяется уникальным сочетанием противовоспалительных, анальгетиче-ских, жаропонижающих и антитромботических свойств. Многообразие лечебных свойств этой группы препаратов, а также большая распространен-
ность клинических ситуаций, где они эффективны, вывели НПВП в разряд препаратов, наиболее часто назначаемых больным. Каждый третий житель планеты использует НПВП. Особенно возрастает потребность в НПВП у лиц пожилого возраста, то есть у контингента лиц, нередко имеющих сопутствующие заболевания и часто использующих медикаменты для их лечения (Насонов Е.Л., 2002а, 20026). Несмотря на выраженную противовоспалительную активность при использовании синтетических НПВП возникает ряд осложнений, что создает серьезные проблемы для их рационального использования в реальной клинической практике (Машковский М.Д., 2000).
Множественность неблагоприятных реакций, свойственная современным противовоспалительным средствам, указывает на актуальность поиска новых малотоксичных препаратов. Более всего таким требованиям удовлетворяют препараты растительного происхождения. У ряда соединений растительного происхождения выявлены многочисленные виды биологической активности: противовоспалительная, антиоксидантная, мембраностабилизи-рующая, капилляроукрепляющая, иммунорегуляторная и ряд других. Выраженность названных эффектов биологически активных веществ отдельных растений, в большинстве своем, недостаточна и экспериментально мало обоснована. Очевидно, что активность фитопрепаратов может быть значительно усилена при рациональном, целенаправленном подборе биологически активных соединений ряда растений, что обеспечит патогенетически направленное действие.
Учитывая данные литературы о противовоспалительном действии бос-веллиевых кислот (Amnion Н.Р.Т., 2006), экстрактов куркумы (Araujo С.А.С., Leon L.L., 2001), сведения о благоприятных биологических эффектах препаратов из семян сосны кедровой сибирской (СКС) и имея в виду возможность потенцирования эффектов названных источников и ряд других положительных биологических сторон их действия, отсутствующих у официнальных противовоспалительных средств перспективным является разработка нового
комплексного противовоспалительного средства растительного происхождения.
С целью повышения биодоступности актуальным является выбор оптимальной лекарственной формы для липофильных соединений с учетом физико-химических и технологических свойств и особенностей технологии в условиях современных фармацевтических производств.
В связи с вышеизложенным актуальной проблемой является создание новой лекарственной формы на основе сухого экстракта босвеллии и масляных экстрактов корневищ куркумы и семян СКС, обеспечивающих длительное поддержание и регулирование уровня терапевтических концентраций БАВ в крови, удобных в применении и стабильных при хранении.
Цель работы
Теоретическое и экспериментальное обоснование, разработка техноло
гии и изучение биофармацевтических свойств препарата на основе экстракта
босвеллии, корневищ куркумы и семян СКС. ,
Задачи исследования
Исследование физико-химических свойств, противовоспалительной активности и биофармацевтических свойств экстракта босвеллии.
Фракционирование экстракта босвеллии с целью поиска наиболее активных в отношении противовоспалительного действия компонентов.
Разработка состава и технологии комплексного средства, содержащего БАВ экстракта босвеллии, корневищ куркумы и семян СКС.
Исследование противовоспалительной и антирадикальной активности комплексного средства и его биофармацевтических свойств.
Выбор параметров стандартизации и разработка нормативной документации на комплексное средство.
Научная новизна
Теоретически и экспериментально обосновано создание противовоспалительного средства в форме мягких желатиновых капсул, заполненных ли-пидной матрицей, содержащей БАВ корневищ куркумы, семян СКС и экстракт босвеллии.
Для оценки фармакокинетики босвеллиевых кислот и куркуминоидов-впервые применен метод тонкослойной хроматографии.
Впервые изучена и определена антирадикальная активность индивидуальных куркуминоидов в отношении радикала DPPH» методом ТСХ с применением постхроматографической дериватизации.
Практическая ценность
В результате проведенных исследований разработаны методы анализа и технология, составлена и утверждена нормативная документация на производство БАД Артро-Актив в мягких желатиновых капсулах, заполненных липидной матрицей, содержащей экстракт босвеллии и БАБ корневищ куркумы и семян СКС (ТУ 9197-020-17664661-2004; ТИ 020-17664661-2004). Разработан проект ФСП на сухой экстракт босвеллии.
Проведены доклинические испытания, подтвердившие противовоспалительную активность разработанного препарата.
Основные положения, выносимые на защиту
На защиту выносятся результаты исследования физико-химического состава экстракта босвеллии, и его биофармацевтических свойств; данные по изучению противовоспалительного действия экстракта босвеллии; состав и технология комплексного препарата; результаты фармкологических и фарма-кокинетических исследований разработанного препарата.
Апробация работы
Основные положения диссертации доложены и обсуждены на IX и X Международных съездах «Актуальные проблемы создания новых лекарственных средств природного происхождения, Санкт-Петербург, 2005 и 2006; 5 международном симпозиуме по хроматографии природных продуктов, Люб-
лин, Польша, 2006, 3 Всероссийской конференции «Новые достижения в химии и химической технологии», Барнаул, 2007.
Публикации
По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ.
![Исследования по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе плодов и семян лимонника китайского [Schizandra chinensis (Turcz.) Baill.].](/i/i/4228/373472.png "Исследования по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе плодов и семян лимонника китайского [Schizandra chinensis (Turcz.) Baill.]. Сатдарова Фарида Шамильевна")
