Введение к работе
Актуальность проблемы. Эймзриозы наносят большой экономический ущерб птицеводству, который складывается из потерь продуктивности, отхода птицы, дополнительных затрат на корма и медикаменты. У переболевших эймериозом кур-несушек уменьшается яйценоскость на 10-80 %, задерживается яйцекладка. Экономические потери в птицеводстве яичного направления, при пересчете на I млрд.птиц, достигают 230 млн.руб. Ущерб мясной продуктивности составляет по 270 г на бройлера, выход цыплят первой категории снижается до 20 %, затраты корма на 5-15 % (Крылов, 1980; Илюшечкин с соавт., 1981; Парре, 1985; Ruff , 1976; Long , 1982). Кроме этого, эймериозы создают благоприятный фон для развития вторичных инфекций (Лавре-нов, Чурсина, 1981; Поживил, 1983; ВаЬа et al. , 1987).
Наиболее эффективным и рентабельным методом борьбы с эймерио-зами считается подавление развития паразитов в организме хозяина, путем применения антисокцидийных препаратов, а также иммунизации птиц. В настоящее время в птицехозяйствах страны все большее применение находит метод иммунохимиопрофилактики кокцидиозов кур. Наряду с этим отсутствует возможность объективно и быстро осуществлять контроль за формированием поствакцинального иммунитета при данном заболевании. Следует также отметить, что существующие методы лабораторной диагностики эймериоза (обнаружение различных стадий паразита в слизистой оболочке кишечника и помете, определение вида) являются трудоемкими, длительными в проведении. В тоже время, в зарубежной и отечественной литературе имеются сообщения о все возрастающей роли в диагностике инфекционных и паразитарных болезней животных и птиц иммуноферментного метода (ЙФМ), обладающего высокой специфичностью и чувствительностью (Marquardt, 1986; Onaga et al. , 1989). Придавая важное значение данному вопросу Государственный Комитет СССР по науке и технике в 1983 году принял постановление № 6 "О расширении научно-исследовательских работ в области создания диагностических препаратов и оборудования для иммуноферментного анализа и их применение в медицине, сельском хозяйства, промышленности и научных исследованиях".
Поэтому разработка современных, высокочувствительных и ускоренных методов лабораторной диагностики и контроля напряженности иммунитета птицепоголовья при эймериозах кур является актуальной и имеет .большое научное и практическое значение.
Цель и задачи работы. Учитывая экономические потери наносимые эймериозами птицеводству и важность в связи с этим разработки средств и методов борьбы при этом заболевании, мы поставили своей целью разработать ускоренный метод видовой диагностики и оценки поствакцинального иммунитета при эймериозе кур с помощью ША. В соответствии с поставленной целью в задачи наших исследований., входило:
1. Обосновать эффективность применения ИФМ для определения
специфичных антител к эймериям в сыворотка крови цыплят.
2. Отработать методику постановки ИФМ при выявлении сывороточ-
них антиэймерийных иммуноглобулинов.
3. Изучить диагностическую ценность ИФМ для серологической
идентификации различных видов эймерий кур и при контроле поствакци
нального иммунитета.
4. Апробировать ИФМ в производственных условиях при применении метода иммунохимиопрофилактики кокцидиозов кур.
Научная новизна. Разработан способ получения эймерийных анти-' генов для видоспецифической серодиагностики эймериозов кур. Сущ-' ность способа составила содержание заявки на изобретение t (J* 65964/20 от 23.09.91.). Отработана схема получения видоспецифи-
ЧеСКИХ, ВЫСОКОаКТИВНЫХ СЫВОРОТОК К ТРЄМ ВИДаМ ЭЙМерИЙ: Eimerla
tenella , Eimerla acervulina , Eimeria maxima. Показана принципиальная возможность проведения видовой диагностики и оценки напряженности поствакцинального антиэймерииного иммунитета с помощью непрямого варианта иммуноферментного метода. Установлена положительная корреляционная связь.между титром специфических сывороточных антител и резистентностью к контрольному заражению на примере возбудителя Е. tenella.
Практическая ценность. Оптимизированы условия получения основных компонентов иммуноферментной тест-системы (антиген для сорбции, положительный и отрицательный контроля, иммунопероксидазный конъю-гат). Обоснованы иммуно-химические и физико-химические критерии определяющие чувствительность, специфичность и воспроизводимость исследований. Апробация тест-системы в производственных условиях
показала перспективность применения данного метода при массовых серологических исследованиях с целью определения напряженности антикокцидийного имглунитета. Простота постановки ИФМ позволяет считать целесообразным внедрение его в широкую производственную практику.
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены, обсуждены и одобрены на научно-производственной конференции молодых ученых и специалистов "Ветеринарные проблемы птицеводства" (Ленинград-Ломоносов, 1990), на Методических и Ученом советах Всесоюзного научно-исследовательского ветеринарного института птицеводства.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 2 работы,' в которых изложено основное ее содержание.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 146 страницах машинописного текста и включает в себя введение, обзор литературы, результаты собственных исследований, обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы и приложение. Диссертация иллюстрирована 7 рисунками и 18 таблицами. Библиографический указатель включает 249 источников литературы, в том числе 164 иностранных автора.
