Введение к работе
Актуальность темы. Для неуклонного роста поголовья сельскохозяйственных животных и дальнейшего повышения его продуктивности важное значение имеет современная диагностика и эффективная профилактика паразитарных болезней, опасных для жизни людей и наносящих ущерб животноводству. Это касается и болезней с природной очаговостью, к числу которых относится токсоплазмоз.
Токсоплазмоз - тяжолое, паразитарное заболевание человека и животных, вызываемое простейшими вида Toxoplasma gondii. В большинстве случаев токсоплазмоз как у людей, так и у животных протекает в латентной форме. У детей, особенно в раннем возрасте, заболевание зачастую заканчивается летально или инвалидностью. У животных токсоплазмоз является одной из причин различной патологии: мертворожденнй, рождения нежизнеспособного молодняка, бесплодия, абортов и т.д. Острое и хроническое течение болезни, приводит к истощению, отставанию в росте, а также к гибели значительного поголовья молодняка.
На сегодняшний день наиболее актуальной и трудоемкой является проблема иммуноднагностихн токсоплазмоза у человека и сельскохозяйственных животных. Современная диагностика, является важным звеном в комплексе мероприятий по борьбе с токсоплазмозом.
По мнению ряда исследователей ( Sabin А.В., Feldman Н.А., 1948, Sleen Е., Kass Е., 1951, Бакулииа Н.А., 1965, Боровиков А.А., 1976, Болдырева Р.Г., 1978) при выявлении возбудителей протозойных болезней наиболее точными и быстрыми являются серологические тесты.
Из иммунологических методов диагностики токсоплазмоза наиболее широко применяются реакции связывания комплемента (РСК), достоверность которой зависит от качества антигенов. На протяжении ряда лет ученые различных стран мира проводили работу по приготовлению диагностикумов для РСК. Предложен ряд методов по приготовлению ди-агностикумов из перитоиеального экссудата белых мышей, содержащего
4 токсоплазми. Все методи включают приемы, способствующие извлечению специфического токсоплазменного компонента.
Цель исследований. Целью работы явилось получение свободного от балластных веществ специфического экзогенного токсоплазменного антигена и изучение его иммунологических свойств, а также использование его для ранней прижизненной диагностики токсоплазмоза животных в иммуноферментном анализе (ИФА).
Задачи исследований:
приготовить активный и специфический в иммунологических тест-системах экзогенный токсоплазменный антиген;
получить гипериммунные сыворотки крови к экзогенному ток-соплазменному антигену;
адаптировать антигенвыявляющий вариант иммунофермеїгтно-го анализа для диагностики токсоплазмоза животных;
- изучить возможность получения антиидиотипических антител х экзогенному токсоплазменному антигену и испытать их в качестве сенситина в иммуноферментном анализе. Научная новизна работы- Разработан способ получения экзогенного токсоплазменного антигена и предложена методика использораиия его в иммуноферментном анализе для выявлнеиия токсоплазмешшх антител. Для диагностики токсоплазмоза животных адаптирован аитигенвыяв-лягащий вариант иммуноферментного анализа, а также изучена возможность использования антиидиотипических шггител в качестве сенситина в иммунодиагностике токсоплазмоза.
Практическая ценность работы. В результате проведенных исследований получен и предложен экзогенный токсогошменный антиген для ранней прижизненной иммунодиагностики токсоплазмоза у животных. Результаты проверки этого препарата подтвердили его высокую эффективность, что дает основатш рекомендовать его с целью применения в научных и диагностических лабораториях иммуноферментного анализа.
(ИФЛ).
Реализация результатов исследований. На основании полученных результатов подготовлена нормативно-техническая документация:
- экзогенный тексоплаэменный антиген лиофилнзированный рекомендованный научно-методическим сонетом зооветеринарного института для рассмотрения на НТС МСХ РК в Комігтете ветеринарии;
- оформлен патент на предполагаемое изобретение.
Основные положения исследовании выносимые на защиту:
- Получение специфической и антигенактивной фракции из соматиче
ского (эндогенного) и секреторно-экскреторного ( экзогенного) токсо-
плззменных антигенов.
Получение гипериммунных сывороток крови к антигенным фракциям экзогенных токсоплазменных антигенов.
Адаптация антнгенвыявляющего ііммуігофсрментного анализа для диагностики токсоплазмоз».
- Использование феномена аптиидиотштин в диагностике токсо-
плазигоза.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены на: У-Всесоюзном съезде протозоологов (Витебск, сентябрь і992г)г научной конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов (Алматы, март 1991 г), Республиканской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов (Алматы, 1991,1992), научных конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов АЗВИ (1990, 1992, Г 993), Республиканской конференции молодых ученых и сггециалистов-живодноводству (Семипалатинск, Г991), заседании общества паразитологов Казахстана (Алматы, 1992), научно-практической конференции молодых ученых, посвященной 150-летик» Абая ( Алматы, 1995 г), на семинаре — совещаний врачей серологов Казахстана (Алматы, 1990 г.).
Публикации. По, материалам диссертации опубликованэ 9 научных работ, разработаны и находятся на утверждении НТС МСХ РК в Комитете ветеринарии, ТУ, временная инструкция, временное наставление.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 107 страницах машинописного текста и состоит лг титульного листа, содержания, перечня сокращений, условных обозначений, символов, единиц и терминов,{ведения, основной части, заключения, списка использованных источников и приложения. Работа иллюстрирована 8 таблицами 4 рисунками. Список использованных источников включает 166 наименований, в том числе иностранных авторов 94.