Введение к работе
ктуалыгость проблемы. Высокий уровень заболеваемости (440.000 случаев в год) смертности женщин от рака шейки матки (II место после рака молочной елезы) (Zur Hausen & Rosl, 1995) привлекает внимание мировой науки и іставляет рассматривать его как одну из важнейших проблем здравоохранения, связи с этим изучение молекулярно-генетических маркеров рака шейки матки, ак отражение этапов его этиопатогенеза представляет актуальную задачу. В астоящее время, в результате накопления в мире большого количества пидемиологических и экспериментальных данных, рак шейки матки редставляет собой уникальную модель вирусного канцерогенеза, для которой: доказана ассоциация неоплазии с инфекцией вирусами папиллом человека, определены основные факторы риска и пути передачи инфекции, охарактеризованы трансформирующие вирусные гены Е6, Е7, Е5 и возможные механизмы их действия,
идентифицированы некоторые клеточные гены, нарушение функций
которых, может приводить к возникновению благоприятных условий для
реализации вирусными онкогенами их трансформирующего потенциала,-
стимуляции клеточной пролиферации, мутагенеза с последующим развитием
инвазивного, метастазирующего новообразования (Zur Hausen & Rosl, 1995).
В то же время многие вопросы остаются невыясненными. Длительный
ггентный период инфекции, продолжающийся обычно более 10 лет, тот факт,
го лишь у небольшого числа инфицированных латентная инфекция приводит к
13ВИТНЮ рака, моноклональность опухолей, содержащих интегрированные
ярусные последовательности, дает основания предполагать, что инфекция
ірусом папиллом является необходимой, но не достаточной для развития
юкачественного новообразования. Совершенно очевидно, что в процесс
эансформации клеток вовлечены и другие клеточные факторы, участвующие в
:гуляции клеточного цикла и дифференцировки клеток. В связи с этим
редставлялось важным выяснить: является ли интеграция вирусных
оследовательностей в ДНК клеток обязательным условием их
>ансформации, как изменяется уровень экспресии белка р53 - продукта гена-
шрессора опухолевого роста в клетках рака шейки матки по отношению к
зовню экспресии его в морфологически нормальных тканях шейки матки.
арушение функций белка р53 в клетке и трансформирующая активность
эодуктов вирусных онкогенов Е6 и Е7 способствуют дестабилизации генома в
тетках опухолей, проявляющейся в появлении модификаций за счет
звышения уровня рекомбинаций ДНК и мутаций (точечных мутаций,
:леций, вставок и перестроек в структуре клеточных генов) (zur Hausen,
)94) Одними из маркеров пппимпрфизма генов и перестроек генома в
іетках опухолей являются некодирующие, повторяющиеся
эследовательности, сцепленные с генами: мини- и микросателлиты. Исходя
і этого в работе проведен анализ двух типов таких последовательностей - 28-
іенньїх тандемных минисателлитных повторов (VTR) в локусе гена Ha-rasI на
хромосоме и микросателлитных динуклеотидных повторяющихся
последовательностей в локусе генов фактора некроза опухоли (TNF) иг хромосоме человека.
Таким образом, данное исследование было направлено на изучение р молекулярно-генетических маркеров, характерных для рака шейки матки целью выяснения их возможной практической и диагностической значимости
Цели и задачи исследования. Целью данной работы был молекулярі биологический анализ клинического материала больных раком шейки матки ряду маркеров:
исследование распространенности HPV инфекции и распределения тш вируса папилломы в опухолевых тканях рака шейки матки и морфологиче< нормальных тканях, прилегающих к опухолевым;
сравнительный анализ физической формы ДНК вируса в опухолевой ткан зависимости от стадии опухолевой профессии и в морфологичес нормальных тканях, прилегающих к опухолевым;
анализ экспрессии вирусного генома;
исследование уровня белка-супрессора опухолевого роста р53 в опухолеї клетках рака шейки матки и условно нормальных тканях, прилегающиз опухолевым;
анализ полиморфизма рестрикционных фрагментов минисателлитг повторов в некодирующей области локуса гена Ha-rasI, как марке] предрасположенности к развитию неопластического процесса и геномг перестроек на коротком плече 11 хромосомы;
анализ полиморфизма микросателлита TNF-a локуса генов TNF, сцеплсни с генами МНС (Major Histocompatibility Complex) на коротком плече хромосомы, как маркера нестабильности генома;
Научная новизна. Настоящая работа представляет собой фрагмі Международного проекта, направленного на изучение роли молекулярі генетических детерминант, характеризующих как различные стадии опухолеві процесса, так и имеющих прогностическое и диагностическое значен Фактически исследование такого количества детерминант проводится в мирої практике впервые. Это позволяет на достаточно большой выборке больн оценить значимость определенных молекулярно-генетических детерминант і оценки клинического статуса больных.
Практическая значимость работы. В основном результаты работы име теоретическое значение. Последовательности вирусов папиллом выявляются всех исследованных в работе образцах тканей рака шейки матки, а такжі образцах прилегающих морфологически нормальных тканей. В последи вирусная ДНК выявляется как правило с помощью высокочувствительно метода полимеразной цепной реакции. Это с одной сторо: свидетельствует о том, что персистеиция вирусного генома не являет достаточным условием для инициации опухолевой трансформации, другой же стороны имеет важное практическое значение, посколі персистеиция вирусного генома в морфологически нормальных ткан после проведенного курса лучевой терапии и оперативного вмешательств
предполагают возможность рецидивов заболевания и ставит вопрос о радикальности проведенного лечения.
Апробация работы. Диссертационная работа апробирована на совместной конференции лабораторий: иммунологии онкогенных вирусов, молекулярной биологии вирусов, регуляции вирусных и клеточных онкогенов, вирусного канцерогенеза НИИ Канцерогенеза ОНЦ РАМН 23 января 1996 года.
Материалы работы были представлены на 2 Международном конгрессе "Папилломавирусы в патологии человека" (Париж, 1994), на VIII республиканской научно-практической конференции по актуальным вопросам диагностики и лечения злокачественных новообразований "Онкология-95" (Казань, 1995), на 14 Международной конференции по папилломавирусам (Квебек, 1995), на 1 Съезде Международного союза ассоциаций патологоанатомов (Москва, 1995). По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, описания используемых материалов и методов, эезультатов и выводов. Работа изложена на 167 страницах машинописного текста, включая 9 таблиц, 18 рисунков, 6 схем и список литературы из 320 источников.
![Улчшение результатов комплексного лечения местнораспространенного рака шейки матки [Электронный ресурс]](/i/i/4414/200428.png "Улчшение результатов комплексного лечения местнораспространенного рака шейки матки [Электронный ресурс] Югай Константин Викторович")
