Введение к работе
Актуальность проблемы. Эндотелий играет ключевую роль в модуляции сосудистого тонуса (Белоусов Ю.Б., Намсараев Ж.Н., 2006), продуцируя различные вазоактивные вещества, наиболее важным из которых является оксид азота (N0) - лабильная субстанция, высвобождаемая эндотелиальными клетками во время катаболизма L-аргинина при активном участии NO-синтазы, являющаяся наиболее мощным из известных в настоящее время вазодилатато-ров (Граник В.Г., 2004; Покровский В.П., 2005; Forstermann U.T., 2006; Rabelink T.J., 2006).
Фармакологическая коррекция ингибиторами фосфодиэстеразы-5 (ИФДЭ-5) эндотелиальной дисфункции объясняется усилением вазорелаксиру-ющего эффекта NO в результате ограничения распада цГМФ в гладкомышеч-ных клетках. В случае исходного снижения активности синтеза NO клетками эндотелия ингибиторы фосфодиэстеразы-5 обеспечивают усиление вазорелак-сации за счёт активации внутриклеточных механизмов (К АТФ-каналов, проте-инкиназы G, эндотелиальной и индуцибельной NO-синтаз). Можно предполагать, что введение эндотелиопротективных препаратов дополнительно стимулирующих выделение эндотелием NO совместно с ИФДЭ-5, повышает уровень вазорелаксации и, таким образом, повышается уровень и степень эндотелио- и кардиопротекции (Rossoni G. et al, 2007, Gur S. et al, 2007).
В настоящее время достаточно большое внимание уделяется изучению эндотелио- и кардиотропных эффектов L-аргинина, как предшественнику NO (Степанов Ю.С., 2005; Марков Х.М., 2005; Покровский М.В., 2011; Tousoulis D. 2007; Bode-Boger S.M., 2003, 2009), в то время как данных по изучению системных дозозависимых эндотелио- и кардиопротективных эффектов комбинации ингибиторов ФДЭ-5 с L-аргинином при экспериментальном моделировании эндотелиальной дисфункции в литературе нами не обнаружено.
В связи с вышеизложенным являлось актуальным изучение эндотелио- и кардиопротективных свойств ингибиторов фосфодиэстеразы-5 силденафила и тадалафил и их комбинаций с L-аргинином при экспериментальном дефиците оксида азота.
Работа выполнена по инициативному плану, включена в программу «Изучение патологических состояний сердечно-сосудистой системы. Разработка современных медицинских технологий профилактики, диагностики и лечения болезней системы кровообращения» на 2006-2012 гг.
Номер государственной регистрации темы - 0120.0850769
Цель исследования: провести оценку эндотелио- и кардиопротективных эффектов ингибиторов фосфодиэстеразы-5 силденафила и тадалафила и их комбинаций с L - аргинином при моделировании L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота в эксперименте.
Задачи исследования:
Изучить эндотелио- и кардиопротективные эффекты силденафила при моделировании L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота.
Изучить эндотелио- и кардиопротективные эффекты тадалафила при моделировании L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота.
Изучить эндотелио- и кардиопротективные эффекты комбинаций силденафила с L-аргинином при моделировании L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота.
Изучить эндотелио- и кардиопротективные эффекты комбинаций тадалафила с L-аргинином при моделировании L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота
Научная новизна исследования. В работе впервые изучена эндотелио- и кардиопротективная активность ингибиторов ФДЭ-5 силденафила и тадалафила в двух дозах и их комбинаций с L-аргинином на модели L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота. Продемонстрировано, что силдена-фил и тадалафил проявляли дозозависимые эндотелио- и кардиопротективные эффекты.
В работе впервые показано, что наибольшее аддитивное эндотелиопро-тективное действие оказывают силденафил и тадалафил в меньших дозах (0,22 мг/кг два раза в сутки и 0,09 мг/кг один раз в сутки соответственно), вводимых внутрижелудочно в течение 7 суток, при сочетанном их использовании с L-аргинином в дозе 200 мг/кг (однократно внутрибрюшинно в течение 7 суток) при моделировании дефицита оксида азота.
В работе продемонстрировано, что силденафил и тадалафил как в больших дозах (2,2 мг/кг два раза в сутки и 0,9 мг/кг один раз в сутки соответственно), так и в меньших дозах (0,22 мг/кг два раза в сутки и 0,09 мг/кг один раз в сутки соответственно), при сочетанном их использовании с L-аргинином в дозе 200 мг/кг оказывают кардиопротективное аддитивное взаимодействие.
Таким образом, в работе впервые представлены убедительные доказательства необходимости комбинированной эндотелио- и кардиотропной терапии с использованием ингибиторов ФДЭ-5 и эндогенного донатора L-аргинина для сочетанного целенаправленного воздействия на метаболический путь цГМФ/ФДЭ-5 и систему «L-aprmniH-eNOS».
Научная новизна подтверждается получением 1 патента РФ.
Практическая значимость. В работе установлена и обоснована эффективность сочетанного применения меньших доз ингибиторов ФДЭ-5 силденафила и тадалафила с L-аргинином для коррекции L-NAME-индуцированной эндотелиальной дисфункции в эксперименте. Показано, что их сочетанное использование позволяет улучшать изменение соотношения сосудистых реакций на ацетилхолин (эндотелийзависимая вазодилатация) и нитропруссид (эндотелийнезависимая вазодилатация) с уменьшением коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД), предотвратить снижение показателей биохимических маркеров (Total NO), а также добиться положительной динамики морфо-фукциональных показателей сердечно-сосудистой системы (регрессия гипертрофических изменений кардиомиоцитов, артерий миокарда и почек с сохранением их просвета, прирост давления при пробе на нагрузку сопротивлением, снижение адренореактивности).
Запланировано проведение целенаправленных клинических исследований сочетанного использования ингибиторов ФДЭ-5 с L-аргинином при артериальной гипертензии в сочетании с эректильной дисфункцией («Протокол клиниче-
ского испытания комбинаций силденафила с L-аргинином и тадалафила с L-аргинином при артериальной гипертензии в сочетании с эректильной дисфункцией» ГНИЦ ПМ МЗ и СР РФ от 07.05.2011 г.).
Внедрение результатов научных исследований. Материалы диссертационного исследования используются в учебном процессе и научно-исследовательской работе ряда кафедр ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития РФ, ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», ГБОУ ВПО ВГМА им. Н.Н. Бурденко.
Личный вклад автора. Автором проанализированы отечественные и зарубежные источники по теме диссертационного исследования, проведены серии экспериментов, получены и обобщены результаты исследования, проведена статистическая обработка и анализ полученных данных.
Апробация работы. Материалы исследования были представлены на итоговых межвузовских научных конференциях студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность» (Курск, 2009, 2010 гг.), XIV, XV, XVII национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2007, 2008, 2010 гг.), Всероссийской научно-практической конференции «Биомедицинская инженерия и биотехнология» (Курск, 2010), V конгрессе «Рациональная фармакотерапия и клиническая фармакология (Санкт-Петербург 2010). Апробация диссертации проведена на научно-практической конференции кафедр фармакологии, клинической фармакологии, нормальной физиологии, инфекционных болезней, анатомии, НИИ Экологической медицины Курского государственного медицинского университета и кафедры фармакологии и фармацевтических дисциплин Института последипломного медицинского образования ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет». По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ, в том числе 5 в журналах, рекомендуемых перечнем ВАК Минобрнауки РФ.
Положения, выносимые на защиту:
Ингибиторы фосфодиэстеразы-5 силденафил и тадалафил являются дополнительной патогенетической опцией коррекции эндотелиальной дисфункции, как и L-аргинин, и проявляют дозозависимые эндотелио- и кардиопротективные эффекты при L-NAME-индуцированном дефиците оксида азота.
Комбинация силденафила в большей дозе (2,2 мг/кг) с L-аргинином (200 мг/кг) проявила только аддитивное кардиопротекторное действие, в то время как комбинация силденафила в меньшей дозе (0,22 мг/кг), два раза в сутки с L-аргинином (200 мг/кг) продемонстрировала аддитивные как эндотелио- , так и кардиопротективные эффекты при L-NAME-индуцированном дефиците оксида азота.
3. Комбинация тадалафила в большей дозе (0,9 мг/кг) с L-аргинином (200 мг/кг)
проявила только аддитивное кардиопротекторное действие. Комбинация тада
лафила в меньшей дозе (0,09 мг/кг), однократно и L-аргинина (200 мг/кг) про
демонстрировала аддитивные и эндотелио- и кардиопротективные эффекты при
L-NAME-индуцированном дефиците оксида азота.
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов исследования, обсуждения полученных результатов, выводов и списка используемой литературы, включающего 180 источников, из них 34 отечественных и 146 зарубежных авторов. Диссертация изложена на 147 страницах машинописи, содержит таблиц - 17, рисунков - 38, схем- 2.
