Введение к работе
Актуальность проблемы. Вирусы гриппа А относят к одним из самых значимых для человечества возбудителей инфекционных болезней. Появление высокопатогенных субтипов вируса в популяции домашних птиц и увеличивающееся количество зарегистрированных случаев прямой передачи возбудителей гриппа птиц человеку, очевидно, сопряжены с угрозой новой пандемии и необходимостью поиска новьк средств профилактики и лечения за-6omBaHra(ShortridgeKJ\etaI,2000>
В 2005 году в Новосибирской области Российской Федерации был зафиксирован падеж домашней птицы, который был вызван вирусом гриппа птиц субтипа H5N1 (Онищенко ГГ. и др., 2005). Выделенные штаммы, в частности изолят A/Goose^rasnoazgrsJcoye/627/05, являются высокопатогенными для млекопитающих и обладают устойчивостью к действию основных препаратов, применяемых при лечении и профилактике гриппа (Evseenko V A. et аі, 2007; fetsyshm SB., Shestopalov AM et al, 2008). Поскольку это были первые случаи выявления вирусов вьюокопатогенного гриппа птиц субтипа H5N1 на территории России, актуальным явилось получение данных о фенотипических особенностях выделенных вирусов. В связи с реальной опасностью распространения вируса гриппа птиц в человеческой популяции есть острая необходимость выявления механизмов патогенеза и морфогенеза инфекционного процесса для разработки средств его профилактики и лечения.
Для разработки новых подходов в борьбе с вирусными инфекциями необходимо отработать модели гриппа птиц субтипаH5N1 іщзксперимеіггальньіхживотньк(млекогішающих), изучить структуру вирионов и особенности их формирования в клетках млекопитающих. Поскольку высокая изменчивость, свойственная вирусам гриппа, приводит к появлению штаммов, резистентных к основным противовирусным препаратам (Cheung GL. et al, 2006; Mermo N. et aL, 2006), актуальным явилось исследование препаратов, не оказывающих прямого действия на вирус, что исключаетвозможность возникновения резистешносш. Такими препаратами являются иммуномодуляторы микробного происхождения, в частности декст-раны (Шкурупий В А, 2007), в связи с чем для данной работы был выбран химически окисленный декстран.
Цель исследования. Изучить особенности проявления воспалительного процесса в легких и печени у мышей при птичьем гриппе, вызываемом высокопатогенным штаммом гриппа птиц субтипа H5N1 ACIcose/Krasroczeiskoye/627A)5, и его профилактике окисленным декстраном
Задачи исследования:
-
Исследовать патогенность вируса гриппа птиц субтипа H5N1 A/Gciose/Krasnoo2erd«>ye/627/05 (далее ВГП) для мышей.
-
Исследовать эффективность окисленного декстрана при профилактике экспериментальной вирусной инфекции, вызываемой ВГП у мышей.
-
Изучить сххібешостатшотогаиВШ и субклеточных ишеда инфицированных мышей.
-
Изучить морфологические изменения в легких и печени инфицированных ВГП мышей.
-
Изучить роль провоспалигельных цигокинов в патогенезе инфекционного процесса, вызываемого ВГП.
-
Изучить пагогенетические особенности проявления гриппа птиц в легких экспериментально зараженных мышей при профилактическом введении им окисленного декстрана.
Научная новизна результатов исследования. В ходе эксперимента впервые получены данные о патогенетических особенностях воспаления при гриппе птиц, вызываемом ВГП, выделенным на территории Российской Федерации, у мышей. Подробно изучены особенности проявления инфекционного процесса и его осложнений в легких и печени мышей на тканевом, клеточном и субклеточном уровнях. Методом трансмиссионной электронной микроскопии выявлены особенности морфотипов вирионов A/Goose/ Krasnoozerskoye/627/05, его топологии, а также его тропность к различным клеткам легких и печени. Получены данные об уровне экспрессии провоспалительных цигокинов и факторов апопгоза в тканях легких и печени мышей, инфицированных ВГП.
Предложено средство (окисленный декстрин) профилактики гриппа птиц у млекопитающих и истпаговэкстюримететмышах.Показашего высокая эффективность.
Научнонпрактическая значимость работы. Исследованы пагогенетические особенности проявлений у мышей птичьего гриппа, вызываемого новым штаммом вируса гриппа субтипа H5N1 A/Goos&Kiasneozeiskoye/627A)5, потенциально опасным для человека Предложено средство профилактики основных осложнений птичьего гриппа у мышей, которое может быть перспективным для разработки средств профилактики птичьего гриппа у человека в связи с неспецифичностью его эффектов.
Положения, выносимые назащшу:
-
Вирус гриппа птиц субтипа H5N1 A/Goose/Krasnoozerskoye/627/05 обладает высокой патогенностью для мышей, обусловленной репликацией вируса в клетках легких и печени, развитием генерализованного инфекционного процесса с высокой летальностью.
-
Вирус гриппа птиц A/Goose/Kraaioozerskoye/627A)5 обладает высокой тропностью к клеткам альвеолярного эпителия, макрофагам легких и печени, гепатоцигам, синусоидальным эндогелиоцитам печени, сопряженной с развитием тромботяческих осложнений, геморрагии, интерстяциального воспаления в легких, отечного синдрома, дистрофических и некротических изменений в печени и легких и раннего фиброза в них.
-
Ош<жнньш декстран оказывает вьіраж^шоепрофт^
периментальном инфицировании беспородных белых мышей вирусом гриппа птиц субтипа H5N1 АЛЗс«іеЛйажсюгегекоуе/627/(()5, которое проявляется снижением легальности и увеличением продолжительности жизни животных, зависит от сроков и дозы введения препарата и обусловлено значительным уменьшением тяжести основных патологических проявле-нийвоспаления.
Апробация материалов диссертации. Основные положения диссертации были доложены и обсуждены на Третьей европейской конференции по гриппу, проходившей 14-17 сентября 2008 года в Португалии.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ, 5 ю которых в журналах, включенных в список периодических научных изданий, рекомендованных ВАК
РФ для опубликования материалга кандидатам
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 155 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием материала и методов исследования, главы описания результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов, списка литературы и приложения. Работа содержит 62 рисунка, 15 таблиц. Список цигаруемой литературы включает 32 работы отечественных и 153 - иностранных авторов. Материалы, изложенные в диссертации, получены, обработаны и проана-лизированы лично автором. Работа поддержана грантом ФЦП, І^аударственньШ контракт от 28сенгабря2007года№02512.112193
