Введение к работе
В последнее время всё большую актуальность приобретает хроническая патология желудочно-кишечного тракта. По-прежнему лидирует язвенная болезнь как классическое кислотозависимое заболевание, которым страдает до 8-10% населения [Ивашкин В.Т., 2001; Schabowski і., 2004]. Так, в России за последние годы доля больных с впервые выявленной язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки возросла с 18 до 26% [Ивашкин В.Т., Лапина Т.Л., 2002]. По распространенности преобладает дуоденальная локализация язв. Высоким остаётся процент рецидивов и осложнений, особенно у лиц молодого возраста.
Ведущая роль в патогенезе гастродуоденальных заболеваний, в частности, язвенной болезни, отводится нарушению равновесия между кислотно - протеолитической агрессией и местным барьером слизистой [Кривова Н.А. и соавт., 1996; Atuma С, 2001; Gindzienski A., Zwierz К., Sarosiek J., 2003]. Уже на протяжении длительного времени признаётся весомым вклад Н. pylori в хронизацию данной патологии [Исаева Г.Ш., 2008;' Covacci A. et al., 1999; Whiting J. et al., 2004]. Но, несмотря на это, отсутствует единый взгляд на патогенетические основы изменений слизистой. Одним из пусковых моментов ульцерации является адгезия Н. pylori к слизистой желудка [Brink G. R. van den et al., 2000; Ofek 1., Sharon N., 2002]. В качестве главных рецепторов для данной бактерии выступают фукозилированные соединения слизистой [Karlsson К.-А., 2000; Bovenkamp J.H.B. van den, 2003]. Известно, что фукоза, наряду с другими углеводами, входит в состав гликопротеинов желудка. За счёт этого слизь приобретает вязкость и упругость. Соединения, богатые фукозой, оказывают и местное ферментпротективное действие [Madrid J. F., 1998]. Это может объяснять тот факт, что при обострении язвенной болезни слизь содержит меньше фукозы, связанной с белками, чем у здоровых людей [Рабинович П.Д., Потапова Р.Я., 1969; Кулаго Г.В. и соавт., 1978]. Однако относительно тканевой фукозы данных практически нет.
Из существующих в настоящее время методик определения
углеводных составляющих достаточно широко применяются гистохимические.
Среди них определённый интерес представляет лектиновая гистохимия.
Лектины - соединения белковой природы, способные к обратимой и
избирательной связи с теми или иными углеводными детерминантами. Это
уникальное свойство предоставляет большие диагностические возможности
[Франц X., 1980; Луцик М.Д. и соавт., 1981]. Большинство исследований
проведено с применением растительных лектинов в силу большей доступности
и изученности. Однако высокая токсичность и, зачастую, сезонная зависимость
сырья, лимитируют их использование. <^д
/\
В гастроэнтерологии лектины применяются при проведении гистохимических исследований, в основном, при опухолевых процессах. Крайне мало данных по неопухолевым заболеваниям пищеварительного тракта. Так, с применением растительных лектинов в педиатрии, показано снижение активности синтеза фукозилированных и сиалированных гликопротеинов при обострении язвенной болезни [Гроздова Т. Ю.,1992; Гроздова Т. Ю., Черненков Ю.В., 1995]. В доступной литературе очень мало работ по сравнительной оценке лектинов различного происхождения.
Лектин азотфиксирующих бактерий, благодаря отсутствию токсичности, принадлежности к непатогенным бактериям и относительной технической простоте получения, нашёл применение в ряде медико -биологических исследований [Никитина В.Е., Итальянская Ю.В., 1987]. Следует подчеркнуть его ярко выраженную специфичность к фукозе как достаточно уникальное свойство, присущее лишь ограниченному числу известных лектинов.
Неоходимо отметить, что всё более широко в медицине применяется математическое моделирование, в частности, с целью прогнозирования. Однако по язвенной болезни в настоящее время встречаются лишь единичные работы [Лифшиц В.Б., 1998].
Таким образом, с одной стороны, фукоза является одним из главных защитных компонентов слизевого барьера, с другой - участвует в адгезии Н. pylori. В этой связи актуальными представляются исследования, направленные на уточнение изменений слизистой желудка при Н. pylori - ассоциированной язвенной болезни с применением фукозоспецифичных лектинов в гистохимии и построением новой модели прогнозирования.
Целью работы являлось определение клинико-эндоскопических и морфологических критериев Н. pylori - ассоциированной дуоденальной язвы с применением гистохимии на основе фукозоспецифичных лектинов различного происхождения, выявление взаимосвязи указанных показателей с последующей разработкой математической модели прогнозирования заболевания.
1. Определить характер клинико - эндоскопических показателей и
морфологических изменений гастродуоденальной слизистой при обострении и
ремиссии дуоденальной язвы, обострении хронического гастрита.
2. Выделить электрофоретически гомогенный препарат
фукозоспецифичного лектина с клеточной поверхности азотфиксирующих
бактерий Azospirillum brasilense Sp7 и получить его ФИТЦ - производное.
3. Применить ФИТЦ - меченый бактериальный лектин для
определения характера перераспределения фукозосодержащих структур
антральной слизистой в разные стадии язвенной болезни двенадцатиперстной
кишки и при обострении хронического гастрита в сравнении с растительным
лектином бобовника анагиролистного (Laburnum anagyroides) с той же
углеводной специфичностью.
4. Выявить корреляционную связь между клинико-эндоскопическими
и морфологическими показателями при обострении и ремиссии язвенной
болезни двенадцатиперстной кишки, хроническом гастрите.
5. На основе полученных статистически значимых совокупностей
признаков с учётом гистохимических показателей разработать математическую
модель прогнозирования при дуоденальной язве.
Впервые в диагностике заболеваний гастродуоденальной системы применён метод лектиновой гистохимии с использованием бактериального лектина.
Впервые проведено сравнение свойств лектинов растительного и бактериального происхождения, специфичных к і-фукозе, при тестировании на слизистой желудочно-кишечного тракта человека.
3. Впервые показано соотношение клинико-эндоскопических и
морфологических критериев Н. pylori - ассоциированной язвенной болезни с
применением в гистохимии нетоксичного лектина непатогенных
азотфиксирующих бактерий.
4. Впервые разработаны математические модели прогнозирования
развития, тяжести течения, длительности клинико-эндоскопического
заживления дуоденальной язвы и эрадикации Н. pylori с учётом
гистохимических показателей.
1. Метод гистохимии с применением фукозоспецифичных лектинов
позволяет выявить количественное снижение фукозилированных структур
слизистой антрального отдела желудка при обострении Н. pylori -
ассоциированной язвенной болезни двенадцатиперстной кишки.
2. Лектин клеточной поверхности азотфиксирующих бактерий
Azospirillum brasilense Sp7, специфичный к L - фукозе является
преимущественным диагностическим реагентом по сравнению с ранее
изученным фукозоспецифичным лектином бобовника анагиролистного, в
плане отсутствия токсичности, доступности сырья, принадлежности к
непатогенным бактериям.
3. Разработанные математические модели прогнозирования при язвенной болезни и эрадикации Н. pylori позволяют считать показатели связывания бактериального лектина наиболее ориентирующим критерием, что важно для оптимизации лечебно-профилактических мероприятий.
