Введение к работе
Актуальность проблемы
Последние десятилетия наблюдается рост уровня аллергических заболеваний во всех возрастньгх группах [Паттерсон Р., Грэммер Л.К., 2000]. Высокой аллергенной активностью обладает домашняя пыль, основным аллергизирующим компонентом которой являются клещи семейства Pyroglyphidae рода Dermatophagoides [Вайцекаускайте Р.Л., 1983]. Наиболее распространенные виды клещей Dermatophagoides pteronyssinus (D. pteronyssinus) и Dermatophagoides farinae (D. farinae) выявляются в 60% - 80% исследуемых проб домашней пыли на территории России, Западной Европы, Ближнего Востока, Индии, Японии, Северной и Центральной Америки, Австралии и Новой Зеландии.
В настоящее время единственно возможным лечением, затрагивающим этиологические и патогенетические звенья атопического заболевания, является аллергенспецифическая иммунотерапия (АСИТ) [Гущин И.С., 1998; Новиков Д.К., Новикова В.И., 1998]. АСИТ позволяет остановить формирование тяжелых форм заболевания, сохранить эффект ремиссии в течение длительного времени, предотвратить развитие сенсибилизации к другим видам аллергенов, снизить потребление противоаллергических препаратов. Эффективность АСИТ подтверждена клиническими исследованиями, выполненными двойным слепым методом с использованием «плацебо»-группы [Балаболкин И.И., 1998; Гургенидзе Г.В., Надарая X., 1998; WHO Position Paper, 1998; Bodtger U., 2002].
Классический метод АСИТ водно-солевыми растворами аллергенов имеет ряд серьезных недостатков, ограничивающих ее применение. Это необходимость регулярных подкожных инъекций, частые местные и общие побочные реакции, длительность курса лечения, ограниченное использование при кожных заболеваниях и в педиатрической практике. Все эти факты диктуют необходимость разработки специальных лечебных форм
аллергенов и поиск альтернативных путей введения препаратов в организм пациента.
Последнее время повышен интерес к использованию неинъекционных способов АСИТ. Выделяют интраназальный, сублингвальный, оральный, ингаляционный, а также комбинированные (инъекционный и ингаляционный, инъекционный и оральный) методы [Canonica GW., Passalacqua G., 2003; Martorell Aragones A., 2000]. Вышеуказанные способы АСИТ в значительной степени различаются по лечебному эффекту, удобству и безопасности применения. Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ), несмотря на разнообразие методов, для широкой клинической практики у взрослых пациентов рекомендует только сублингвальный способ АСИТ [WHO Position Paper, 1998]. Этот способ обеспечивает быстрое всасывание аллергенного субстрата в периферическую кровь и его доставку к регионарным лимфоидным органам, минуя желудочный и печеночный барьеры [Куприянов С.Н., 1998; Мошкевич B.C., 1999; Потемкина Л.М., 1998]. К достоинствам метода можно отнести также удобный режим и безболезненность лечения, минимизацию побочных реакций, исключение возможности инфицирования. Согласно данным литературы, показана высокая эффективность сублингвального способа АСИТ для больных с пыльцевой и клещевой сенсибилизацией [Vourdas D, Syrigou Е, 1998; Passalacqua G., GuerraL.,2006].
При сублингвальном и оральном введении стандартные водно-солевые растворы аллергенов эффективны в дозах, в десятки раз превышающих дозы инъекционной АСИТ. Общая иммунологическая толерантность возникает вследствие интенсивной антигенной нагрузки [Ulrich N., Bodo N.. 1998]. Снизить аллергенное воздействие и сохранить терапевтический эффект позволяет использование специально приготовленных лечебных форм аллергенов. Согласно литературным данным, разработано достаточно много видов подобных препаратов, но большинство из них
предназначено для орального использования (инкапсулированные и липосомальные аллергены, модифицированные аллергены) [Рахман Ю.Л., 1997; Litwin A., Flanagan М., 1997; Lucas А., 1998; Malsurmga Y., 2000; Naito S., 2002]. Стандартных лечебных форм аллергенов для сублингвального приема мало и в клинике они практически не применяются. Учитывая потребность в более широком использовании сублингвального метода АСИТ, необходимо создание для него специальных аллергенных препаратов, что и послужило поводом для проведения нашего исследования. Аллерген из клещей D. farinae выбран нами как один из наиболее распространенных сенсибилизирующих агентов.
Цель исследования Разработать технологию приготовления лечебной формы аллергена из клещей D. farinae, предназначенной для проведения аллергенспецифической иммунотерапии сублингвальным способом.
Задачи исследования /. Разработать способ получения гранулированной формы аллергена из клещей D. farinae.
Изучить физико-химические свойства гранулированной формы аллергена из клещей D. farinae.
Оценить специфическую активность полученного препарата в тестах in vitro.
Исследовать безвредность, хроническую токсичность и иммуногенность препарата на лабораторных животных.
Научная новизна Впервые разработана технология изготовления и получена гранулированная лекарственная форма аллергена из клещей D. farinae для АСИТ сублингвальным способом.
Впервые в технологии приготовления лечебной формы аллергена использованы элементы процесса производства гомеопатических препаратов.
Полученный препарат сохраняет антигенную активность исходного стандартного аллергена из клещей D. farinae, проявляет иммуногенные свойства и имеет сниженную аллергенность. Показаны безвредность и нетоксичность препарата.
Практическая значимость
Разработанная технология приготовления гранулированной формы аллергена D. farinae позволяет получать оригинальный препарат для АСИТ на основе стандартного водно-солевого раствора аллергена. Предлагаемую технологию можно использовать для изготовления гранулированной формы из любого неинфекционного аллергена. На способ получения гранулированной лекарственной формы аллергена из клещей D. farinae получен патент № 2216353, зарегистрированный 20 ноября 2003 г. в Государственном реестре изобретений Российской Федерации.
Разработаны фармакопейная статья производства и инструкция по изготовлению и контролю гранулированной формы аллергена из клещей D. farinae. Составлена программа клинических испытаний экспериментального препарата на ограниченном контингенте больных.
Полученный препарат предполагается использовать для АСИТ сублингвальным способом, что позволит избежать длительного курса инъекций, уменьшить зависимость пациента от врача, улучшить переносимость АСИТ, особенно у детей. Доклиническое изучение препарата свидетельствует о необходимости дальнейших клинических испытаний.
Основные положения, выносимые на защиту 1. Разработана технология получения гранулированной формы аллергена из клещей D. farinae с использованием элементов технологии гомеопатических препаратов.
2. Разработанный метод позволяет получать препарат с сохраненной
антигенной и иммуногенной активностью при сниженной аллергенное.
3. На основании патоморфологического исследования органов
лабораторных животных показана безвредность и нетоксичность
гранулированной формы аллергена из клещей D.farinae.
Апробация материалов диссертации и публикации
Материалы диссертации представлены на международной конференции молодых ученых по вопросам новых медицинских технологий Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова (г. Москва, 2001); на конференции «Экологические проблемы в аллергологии» (г. Тула, 2001); на Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Тульские педиатрические чтения» (г. Тула, 2001); на XXI конгрессе EAACI (г. Неаполь, Италия, 2002); на IV и V конгрессах РААКИ (г. Москва, 2001, г. Москва, 2002); на V конгрессе «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии» (г. Москва, 2002); на научно-практической конференции «55 лет сотрудничества Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова и здравоохранения Тульской области» (г. Москва - г. Тула, 2002); на VII Всероссийском научном форуме с международным участием имени академика В.И. Иоффе (г. Москва, 2003); на IV Всемирном конгрессе по астме и IX Международном конгрессе по клинической патологии (г. Бангкок, Таиланд, 2004).
Основные положения диссертации изложены в 17 печатных работах.
Апробация диссертации состоялась 01.03.2006 г. на научной конференции отдела аллергологии ГУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН.
Объем и структура диссертации
