Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Проблема изучения инфекций, вызываемых
[.influenzae, ДО СеГОДНЯШНеГО ДНЯ ОСТЭеТСЯ ЭКТуЭЛЬНОЙ. ЭТО
)0условлено прежде всего широким распространением заболеваний ге-юфильной этиологии (острые и хронические инфекции респираторного
:раКТЭ, Воспаление среднего уха, МеНИНГИТ) (Montgomery J., 1990).
Іаиболее подвержены гемофильным инфекциям дети, пожилые люди и патенты С ИММуНОДефИЦИТНЫМИ СОСТОЯНИЯМИ (Robbins, 1973; Schlan Н, ЛП9) .
Диагностика гемофильных инфекций в настоящее время не являет-:я решенной проблемой. Частое носительство условнопатогенных мкроорганизмов, ассоциации различных видов бактерий, выявляемые >л время заболеваний, а также раннее применение антибиотиков сни-слет диагностическую значимость бактериологических методов (кгедег і., 1980). Выявление антигенов н.influenzae также не всегда ин-'ормативно, поскольку не при всех формах патологии возможно их об-[аружешіе в сыворотке крови или других стерильных гладкостях макро-ірганизма (Burman l., 1994). В этом случае определение в сыворот-:ах крови больных антител к возбудителю обладает рядом преиму-[еств. Серологические методы позволяют установить этиологическую лачимость бактерий, а также дают возможность более глубокого изу-:ешія гаялугаюго ответа во время развития инфекционного процесса
Yainanaka N. , 1993) .
Серологическая диагностика гемофильных инфекций связана со начителышми трудностями. Эти трудности возшжают прежде всего :з-за отсутствия видоспецифичных некапсульных антигенов H.infiuen-ае, представленных на всех штаммах микроорганизма (Murphy т., 987). В настоящее время при серологическом анализе используется пределение антител к капсульным полисахаридам бактерий
(KristDnsen к., 1992). Однако, увеличение доли некапсулышх форм выделяемых в настоящее время при гемофнлышх инфекциях, диктую необходимость использования различных некапсулышх антнгено:
Н.influenzae ПРИ ДИаГНОСТИКе (Claesson В., 1992).
В связи с этим, ЦЕЯЬЮ настоящего исследования било изучеши возмонагости использования различных антигенов и.influenzae Re-гликолішида грамотрицательных бактерій! для иммуноферментноп анализа антител у больных с инфекцией, вызванной н.influenzae.
Для достижения поставленной цели требовалось решить следуюшп ЗАДАЧИ:
-
Выделить препараты различных антигенов н.influenzae і Re-гликолипида.
-
Изучить состав и иммунохимические свойства получении: препаратов.
-
Разработать системы для иммуноферментного анализа на основе отдельных антигенных препаратов н.influenzae и Re-гликолипида.
-
Исследовать с помощью разработанных систем уровень антите. у здоровых детей разных возрастных групп, а также больных с различными формами инфекционных заболеваний, вызванных и.influenzae і другими условнопатогенными бактериями.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ. Уровень антител к некапсульным антигенам н.influenzae, определяемый в ИФА на основе суммарных препаратов дезіштегратов, является индикатором развития патологическогс процесса, связанного с этим возбудителем.
Антитела к белкам внешней мембраны н.influenzae у детей с хроническими заболеваниями респираторного тракта присутствуют і большей концентрации, чем у здоровых детей.
Уровень антител к Re-гликолипиду у детей с муковисцидозоіі значительно выше, чем у детей с хроническими заболеваниями респи-
заторного тракта и у здоровых детей. ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.
1. Использование суммарных препаратов дезинтегратов в качест-
зе антигенных препаратов адекватно при создании икмуноферментной
системы для определения антител к некапсулышм антигенам
I.influenzae.
-
Способ создания иммуноферментной системы для определения штител к некапсульным антигенам н.influenzae.
-
Способ создашія иммуноферментной системы для определения татител к Re-глшгалшіиду грамотрицателышх бактерий.
-
Способ создания иммуноферментной системы для определения чнтител к капсульному полисахариду н.influenzae типа ь.
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Разработаны пгауноферментные системы для определешія антител к капсульному полисахариду типа ь ,і некапсулыгым антигенам н. influenzae. Апробация систем показала ,іх высокую спещїфичность и чувствительность при анализе сывороток четей с инфекциями респираторного тракта. Системы могут быть использованы для подтверждения гемофильной этиологш! заболеваний.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Отдельные фрагменты диссертационной работы Зшти изложены на конферєнцші "Современные направлеїшя создашія медицинских диагностикумов" (Москва, 1990), xv международном конгрессе по аллергологии и клішической иммунологии (Стокгольм, 1994), съезде врачей лаборантов (Москва, 19Э5), xxvi конференции скандинавского общества иммунологов (Ґетеборг, 1995), viii международном конгрессе по бактериологии и прикладной микробиологии (Иерусалим, 1996), конференциях молодых ученых НЖВС им.И.И.Мечникова (Москва, 198Э, 1990, 19994). .Диссертация апробирована на научной конференции отдела иммунохимической диагностики НИИ ВС им.И.И.Мечникова РАМН.
ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация включает введение три главы собственных исследований, обсуждение результатов, вывод! и список литературы. Работа содержит 162 страницы машшюписногс текста, 12 таблиц, 26 рисунков. Список литературы содержит 20Е наименований работ отечественных и зарубежных авторов.