Введение к работе
Актуальность проблемы. Chlamydia trachomatis является возбудителем урогенитального хламидиоза, ставшего в последние годы одной из наиболее распространенных инфекций, передаваемых половым путем (MMWR, 1993; Struzziero, 1994; Яцуха, 1995). Хламидии играют важную роль в этиологии воспалительных заболеваний органов репродуктивной системы, приводящих к бесплодию 10-15% супружеских пар (Bar-Chama, 1993; Carlin et al., 1995).
В то же время отсутствие специфической клиники хламидиоза и эффективных диагностических систем, доступных для учреждений здравоохранения, часто маскирует это заболевание другими диагнозами, что не позволяет своевременно начать адекватную терапию и способствует быстрому распространению хламидийной инфекции в популяции.
В связи с этим важное значение приобретает создание высокоэффективной тест-системы для диагностики C.trachomatis методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), который не уступает по чувствительности и специфичности культуральному методу и позволяет выявлять как острые, так и латентные формы различных инфекций (De-Barbeyrac В. et al., 1994).
Урогенитальный хламидиоз, особенно его хронические формы, часто протекает на фоне подавленных защитных сил организма: гуморального и клеточного иммунитета, продукции интерферона в ответ на взаимодействие с возбудителем, а также других систем естественной резистентности (Машкиллейсон А.Л. и др., 1995, Ершов Ф.И. и др., 1996). Данные литературы по этому вопросу скудны и противоречивы. Для понимания механизмов хронизации и устойчивости хламидии к терапии необходимо исследовать закономерности взаимодействия хламидии и иммунной системы организма. В этой связи представляет интерес оценка параметров иммуного и интерферонового статуса у пациентов с различными формами хламидиоза, диагносцированного методом ПЦР.
Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы состояла в разработке, испытании и клинической адаптации эффективной системы диагностики методом полимеразной цепной реакции C.trachomatis у женщин и мужчин репродуктивного возраста и в исследовании состояния и взаимосвязи параметров клеточного и гуморального звена иммунной системы больных урогенитальным хламидиозом.
В связи с этим в задачи исследования входило:
-
Разработать и испытать на клиническом материале методику диагностики урогенитального хламидиоза, основанігую на выявлении специфической ДНК возбудителя с помощью полимеразной цепной реакции.
-
Определить клиническую значимость и информативность ПЦР в
сравнении с другими традиционными методами диагностики хлами-диоза.
-
Выявить особенности эпидемиологии хламидийной инфекции у женщин и мужчин с нарушением репродуктивной функции.
-
Провести анализ параметров клеточного звена иммунной системы пациентов с урогенитальной хламидийной инфекцией.
-
Оценить уровень иммуноглобулинов в крови и интерферонпро-дуцирующую активность лейкоцитов у пациентов с урогенитальной хламидийной инфекцией.
-
Исследовать взаимосвязь отдельных параметров клеточного и гуморального звена иммунной системы при урогенитальной хламидийной инфекции.
Научная новизна работы.
1. При урогенитальной хламидийной инфекции наблюдаются от
клонения от нормы содержания субпопуляций лимфоцитов перифери
ческой крови. Впервые показано, что излечение от хламидиоза не со
провождается нормализацией состояния клеточного звена иммунной
системы в целом; изменение его параметров во времени носит колеба
тельный характер с амплитудой, выходящей за пределы нормы.
2. Впервые показано, что развитие хламидийной инфекции
протекает на фоне снижения интерфероновой реакции лейкоцитов на
индукторы а-, Р- и у-интерферонов, которое в большей степени выра
жено у пациентов с сочетанной хламидийной инфекцией. При
монохламидиозе инфекционный процесс протекает более остро и с
достоверно более высоким уровнем сывороточного интерферона и
спонтанной продукции интерферона лейкоцитами, чем при ассоциации
хламидий с другими урогенитальными инфекциями.
Практическая значимость работы.
-
Разработана и прошла клинические испытания тест-система для выявления хламидийной инфекции, основанная на полимеразной цепной реакции, более чувствительная и специфичная по сравнению с традиционными методами аншшза, что позволило внедрить ее в практику учреждений здравоохранения как для постановки диагноза и контроля зффектішности лечебных мероприятий, так и для скринингового обследования населения.
-
Определение уровня спонтанной продукции интерферона лейкоцитами может быть использовано для оценки характера инфекционного процесса: при высоком уровне СПИЛ хламидиоз протекает преимущественно в острой форме, при низком - в латентной форме.
Основные положения, выносимые на защиту.
1. Диагностика хламидий на основе полимеразной цепной реакции значительно превышает по чувствительности и специфичности традиционные методы лабораторного анализа и пригодна как для установления инфицированное пациента, так и для контроля эффективности лечебных мероприятий.
-
Нарушение репродуктивной функции у мужчин и женщин в 30-35% случаев сопровождается наличием в нижних отделах репродуктивного тракта моно- или сочетанной хламидийной инфекции.
-
У пациентов с хламидийной инфекцией имеются в разной степени выраженные отклонения от нормативных показателей содержания субпопуляций лимфоцитов в крови. Излечение от хламидиоза не приводит к нормализации состояния клеточного звена иммунной системы в целом, но сопровождается колебательными изменениями значений его параметров.
-
У мужчин и женщин с хламидийной инфекцией значительно подавлена способность лейкоцитов продуцировать а-, р- и у-интерфероны в ответ на индукторы. У пациентов с монохламидийной инфекцией повышены содержание циркулирующего в крови интерферона и уровень спонтанной продукции интерферона лейкоцитами.
Реализация работы и апробация диссертационного материала.
Разработаны и утверждены методические рекомендации «Применение меченного биотином ДНК-зонда для выявления возбудителей хронических инфекций в акушерско-гинекологической практике» (Информационное письмо, 1994) и «Применение метода полимеразной цепной реакции для выявления хламидийной, микоплазменной и уреа-плазменной инфекций в акушерско-гинекологической практике» (Информационное письмо, 1995), а также НТД к «Набору реагентов для одновременного обнаружения хламидий, микоплазм и уреаплазм в биологических пробах методом полимеразной цепной реакции» (1996). Материалы диссертационной работы были представлены на П Международном конгрессе по андрологии (Турция, 1995 г.), на II симпозиуме по нсинвазивным методам диагностики (Россия, 1995 г.), на Ш Европейской конференции по Chlamydia (Австрия, 1996 г.), на Международном симпозиуме по иммунологии репродукции (Украина, 1996 г.), на II Международной конференции по системной эпзимотерапии (Россия, 1996 г.) и на I Всероссийской научно-практической конференции по примененшо ПЦР для диагностики инфекционных заболеваний и методам лечения (Сочи, 1996 г.). В завершенном виде диссертационная работа прошла предварительную апробацию на совместном семинаре лаборатории клинической иммунологии НЦ АГиП РАМН и кафедры клеточной физиологии и иммунологии биологического факультета МГУ им. М.В.Ломоносова 4 декабря 1996 года.
Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы (4 главы), описания материалов и методов, результатов собственных исследований (6 глав), обсуждения результатов, выводов и списка цитируемой литературы. Работа изложена на 146 страницах машинописного текста, содержит 20 таблиц и 22 рисунка. Библиография включает 233 источника отечественных и зарубежных авторов, представлених на 28 страницах.
![Оценка влияния гриппозной инфекции и иммунизации живой реассортантной гриппозной вакциной на возникновение и течение IgE-опосредованных аллергических реакций организма [Электронный ресурс]](/i/i/4338/184223.png "Оценка влияния гриппозной инфекции и иммунизации живой реассортантной гриппозной вакциной на возникновение и течение IgE-опосредованных аллергических реакций организма [Электронный ресурс] Чиркова Татьяна Викторовна")
