Введение к работе
Актуальность темы
Тромбоэмболические заболевания продолжают лидировать среди причин смертности и инвалидизации населения. В связи с этим важной задачей является своевременная диагностика изменения гемостатического баланса в сторону гиперкоагуляции у пациентов с риском развития тромботических осложнений. Однако применение стандартных методов исследования системы свертывания крови далеко не всегда позволяет сделать однозначный вывод о коагулологическом статусе пациента. Таким образом, поиск дополнительных информативных критериев активации системы гемостаза остается одной из основных задач лабораторной службы.
Исследования последних лет показали, что в осуществлении реакций гемостаза и развитии тромбоза существенную роль играют микрочастицы (МЧ) плазмы крови (Зубаиров Д. М., 2009,. Nieuwland P., 2007 Morel O., 2009). Они обнаруживаются в плазме как при физиологических, так и при различных патологических состояниях. МЧ отделяются от эндотелиоцитов и клеток крови под действием разнообразных активирующих стимулов, а также в процессе их старения и апоптоза. Наружная мембрана МЧ обогащена отрицательно заряженными фосфолипидами, которые являются местом сборки прокоагулянтных комплексов. МЧ экспрессируют на своей поверхности различные клеточно-специфичные антигены, в частности тканевой фактор (TF), который, как известно, является основным триггером коагуляционного каскада (Зубаиров Д. М., 2005, Weerhaim A., 2002, Enjeti A., 2008). Перечисленные особенности дают возможность предполагать, что микрочастицы могут участвовать в повышении и распространении гемостатического потенциала плазмы крови.
В настоящее время основная часть работ направлена на исследование количества и происхождения МЧ у пациентов с различной патологией, тогда как участие МЧ в осуществлении нормального гемостаза и при развитии патологических состояний, сопровождающихся изменением коагуляционного потенциала, изучено недостаточно. Последнее в немалой степени обусловлено отсутствием стандартизованных методов исследования. В связи с этим большой интерес вызывает возможность определения участия МЧ в процессе образования тромбина с помощью интегрального теста оценки состояния системы гемостаза – теста генерации тромбина (ТГТ) (Hemker H. C., 2006). Увеличение уровня генерации тромбина, которое может быть вызвано появлением в циркуляции МЧ, экспрессирующих тканевой фактор и/или прокоагулянтные фосфолипиды, отражает рост коагуляционного потенциала плазмы крови и позволяет своевременно оценивать тромбогенную опасность.
Таким образом, исследование коагуляционного потенциала МЧ представляется актуальным, поскольку позволит получить дополнительные сведения об их значимости для развития гиперкоагуляционных изменений и улучшить диагностику состояний, сопровождающихся повышением гемостатического потенциала плазмы крови.
Цель исследования
Изучение роли микрочастиц плазмы крови в процессе генерации тромбина у здоровых лиц и пациентов с заболеваниями сосудов нижних конечностей.
Задачи исследования
1. Определить параметры генерации тромбина, обусловленной МЧ плазмы крови, у здоровых лиц.
2. Определить вклад тканевого фактора и прокоагулянтных фосфолипидов МЧ плазмы крови в развитие гиперкоагуляционных изменений у больных с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей.
3. Определить вклад тканевого фактора и прокоагулянтных фосфолипидов МЧ плазмы крови в развитие гиперкоагуляционных изменений у больных постфлебитическим синдромом.
4. Определить вклад тканевого фактора и прокоагулянтных фосфолипидов МЧ плазмы крови в развитие гиперкоагуляционных изменений у больных с варикозным расширением вен нижних конечностей.
5. Провести сравнительный анализ данных, оценивающих участие МЧ плазмы крови в процессе генерации тромбина у пациентов с заболеваниями сосудов нижних конечностей.
Положения, выносимые на защиту
1. Коагуляционный потенциал МЧ плазмы крови у пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей, постфлебитическим синдромом и варикозным расширением вен нижних конечностей значительно выше по сравнению со здоровыми лицами. Наибольший рост уровня генерации тромбина характерен для больных с постфлебитическим синдромом.
2. У пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей МЧ плазмы крови могут обладать не только прокоагулянтным, но и антикоагулянтным потенциалом, что приводит к менее выраженному росту генерации тромбина.
3. Прием гиполипидемических препаратов ассоциируется со снижением уровня генерации тромбина за счет уменьшения участия тканевого фактора МЧ в этом процессе.
4. Развитие хронической венозной недостаточности у пациентов с варикозным расширением вен нижних конечностей сопровождается усилением роли прокоагулянтных фосфолипидов МЧ плазмы крови в процессе генерации тромбина.
5. Исследование коагуляционного потенциала МЧ плазмы крови с помощью теста генерации тромбина открывает новые возможности диагностики гиперкоагуляционных состояний у больных с риском развития тромбоэмболических заболеваний.
Научная новизна
Впервые в России проведено исследование роли МЧ в коагуляционном процессе с помощью теста генерации тромбина, установлены пределы нормальных колебаний показателей генерации тромбина, зависимые от прокоагулянтных фосфолипидов и тканевого фактора МЧ.
Оценена роль МЧ в развитии гиперкоагуляционных изменений у пациентов с патологией сосудов нижних конечностей.
Впервые обнаружено наличие антикоагулянтного потенциала МЧ у пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей.
У пациентов, постоянно находящихся на гиполипидемической терапии, выявлено снижение роли тканевого фактора МЧ в генерации тромбина.
Практическая значимость
Проведенные исследования показали, что МЧ плазмы крови обладают выраженным коагуляционным потенциалом, который значительно возрастает при развитии заболеваний сосудов нижних конечностей. Исследование генерации тромбина, обусловленной МЧ плазмы крови, позволяет выявить сдвиг гемостатического баланса в сторону гиперкоагуляции на самых ранних этапах развития заболевания и, в отличие от стандартного коагулологического обследования, может служить информативным критерием, указывающим на наличие гиперкоагуляционных изменений у пациентов с риском развития тромбоэмболических осложнений.
Апробация работы
Результаты работы доложены и обсуждены на Всероссийской конференции с международным участием «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии» (Москва, 3-5 февраля 2011 г.), на Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых «Современные проблемы гематологии и трансфузиологии» (Санкт-Петербург, 24-25 марта 2011 г.), на IX международной научно-практической конференции «Тромбозы и кровотечения – актуальные проблемы современной медицины» (Севастополь, 20-21 октября 2011 г.), на 58-ом заседании комитета по стандартизации международного общества по изучению тромбоза и гемостаза (Ливерпуль, Великобритания, 27-30 июня 2012 г.), на Всероссийской научно-практической конференции с международным участием, посвященной 80-летию Российского научно-исследовательского института гематологии и трансфузиологии (Санкт-Петербург, 24-25 октября 2012 г.).
Структура и объем диссертации
Диссертация изложена на 108 страницах печатного текста, содержит 21 таблицу, иллюстрирована 16 рисунками и состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, глав с изложением собственных результатов исследования, заключения, выводов и списка литературы (включает 25 отечественных и 79 зарубежных источников).
Личный вклад автора
Автором лично выполнены исследования по определению показателей теста генерации тромбина, обусловленных МЧ плазмы крови, у больных и в контрольной группе. Проведен сбор анамнестических данных, статистическая обработка, анализ полученных данных и обобщение результатов исследований.
![Содержание [В] - казоморфинов - 7 в плазме крови детей первого года жизни на разных видах вскармливания, связь с психомоторным развитием.](/i/i/4229/374191.png "Содержание [В] - казоморфинов - 7 в плазме крови детей первого года жизни на разных видах вскармливания, связь с психомоторным развитием. Корнеева Екатерина Викторовна")