Введение к работе
Актуальность исследования. Заболевания печени представляют собой актуальную проблему современного здравоохранения, как в России, так и в мире в целом. В их структуре наибольшую распространенность получили гепатиты вирусной этиологии и алкогольное поражение печени [Савина Н.С., 2007; Буеверов А.О., 2008; Жаров С.Н., Санин Б.И., 2009]. Рассматриваемая патология имеет большое клинико-социальное значение вследствие инвалидизации и высокой смертности в основном трудоспособного населения, больших финансовых затрат, связанных с лечением и реабилитацией пациентов [Мехтиев С.Н. с соавт., 2008]. Наряду с этим, наблюдается увеличение частоты тяжелых форм течения гепатитов с высоким риском формирования хронического поражения печени [Волчкова Е.В., Потекаева С.А., 2004; Ярошенко Е.Б. с соавт. 2008].
Возникновение и развитие патологических процессов, как отмечают Ю.А. Владимиров с соавт. (2000, 2009), зависит от этиологических факторов, но имеет единый механизм повреждения – активацию процессов липопероксидации. Хотя начальные этапы генерации активных форм кислорода при разных заболеваниях могут отличаться, но далее сдвиги свободнорадикальных процессов теряют свою специфичность и зависят только от состояния и степени мобилизации антиоксидантной защиты [Сологуб Т.В. с соавт., 2008; Потемина Т.Е., Рыжаков Д.И., 2009; Loguercio C., Federico A., 2003]. Это подтверждают и другие авторы, которые рассматривают перекисное окисление липидов как один из универсальных механизмов повреждения клеток, в том числе печени [Буеверов А.О., 2002; Чеснокова Н.П. с соавт., 2006; Журавлев А.И. с соавт., 2008].
Одним из перспективных путей в решении данной проблемы является разработка методов озонотерапии для комплексного лечения заболеваний печени. Как показали многочисленные исследования [Бояринов Г.А. с соавт., 1999; Яковлев А.Ю. с соавт., 2010; Масленников О.В. с соавт., 2012; Wolff H.H., 1999], парентеральное применение озона обладает системными метаболическими эффектами: антибактериальным и противовирусным действием, антигипоксическим, иммуномодулирующим, обезболивающим, противовоспалительным, детоксикационным, модулирующим действием на процессы липопероксидации, антиоксидантную систему, а также систему гемостаза и реологии крови [Перетягин С.П. с соавт., 2003, 2011; Конторщикова К.Н. с соавт., 2005, 2011; Rilling S., 1996; Bocci V., 1997].
Однако применение озонотерапии в комплексном лечении различных заболеваний, в том числе печени, сопряжено с немалыми трудностями. Так, остаются до конца не решенными вопросы выбора оптимальных лечебных доз озона и методов контроля эффективности лечения озоном. Большинство доз озона в клинических условиях подбираются эмпирически, не учитывая исходного функционального состояния организма и стадии развития заболевания, создавая сложности в оценке результатов озонотерапии [Перетягин С.П. с соавт., 2007, 2010]. Все это определяет актуальность изучения влияния озона на процессы липопероксидации в зависимости от активности патологического процесса в печени.
Цель исследования.
Изучить эффекты озона в отношении процессов липопероксидации и морфофункционального состояния печени в норме и при интоксикации тетрахлорметаном.
Задачи исследования.
1. Оценить влияние озона на интенсивность процессов липопероксидации в плазме и эритроцитах крови, ткани печени и её морфофункциональных показателей здоровых крыс.
2. Исследовать динамику параметров перекисного окисления липидов в крови и ткани печени крыс, а также ее функционально-метаболический статус и морфологическую структуру при экспериментальном поражении тетрахлорметаном.
3. Дать оценку эффективности применения озона в дозах 1. 10 и 100 мкг/кг на процессы липопероксидации и морфофункциональное состояние печени в зависимости от тяжести токсического поражения.
.
Научная новизна.
Впервые описаны дозозависимые эффекты озона на процессы липопероксидации в плазме и эритроцитах крови, гомогенате печени и её морфофункциональные параметры у здоровых животных, проявляющиеся активацией антиоксидантной системы и митотической активности гепатоцитов на малых дозах (1 мкг/кг) и в формировании умеренного окислительного стресса при использовании высоких доз озона (100 мкг/кг).
Доказано, что введение озона при остром экспериментальном (тетрахлорметановом) гепатите в дозе 1 мкг/кг массы тела не вызывает значимых изменений показателей липопероксидации, но сопровождается увеличением активности антиоксидантной системы и стимуляцией митотической активности гепатоцитов печени крыс.
Показано, что на фоне хронического гепатита наиболее действенными были высокие дозы озона (10 и 100 мкг/кг массы тела), которые проявлялись саногенетическими эффектами в виде увеличения антиоксидантной активности и улучшения морфологической картины печени.
Теоретическая и практическая значимость работы.
Результаты экспериментальных исследований показали, что озон является эффективным, дозозависимым и патогенетически обоснованным средством лечения острых и хронических заболеваний печени. Применяемые дозы озона оказывают саногенетическое действие на активность процессов ЛПО и морфофункциональные показатели печени крыс. При этом эффективность озонотерапии зависит как от тяжести токсического поражения печени, так и от дозы вводимого озона.
Результаты исследований дополняют экспериментальные и клинические данные по вопросам индивидуального подбора доз озона и методик контроля эффективности и безопасности озонотерапии.
Основные положения, выносимые на защиту:
У интактных животных введение озона в дозе 1 мкг/кг не вызывает значимой стимуляции процессов липопероксидации в крови и ткани печени, но приводит к увеличению активности антиоксидантной системы (АОС) и митотической активности гепатоцитов. Более высокие дозы озона (10 и 100 мкг/кг) способствуют у здоровых животных нарастанию интенсивности процессов липопероксидации, сопровождающемуся снижением резервов антиоксидантной защиты.
Эффективность системного применения озона при остром токсическом гепатите заключается в преимущественной стимуляции системы антиоксидантной защиты малыми дозами соединения (1 мкг/кг). В условиях хронического токсического гепатита более предпочтительными являются высокие дозы озона (100 мкг/кг), обеспечивающие снижение интенсивности процессов липопероксидации, стимуляцию антиоксидантной системы и восстановление морфологической структуры печени.
Внедрение результатов исследования.
Материалы исследований внедрены в учебный процесс и научно-исследовательскую работу на кафедрах медицинской биологии и генетики; гистологии, цитологии и эмбриологии; физики и информатики ГБОУ ВПО Кировская ГМА, в цикл последипломной подготовки специалистов по озонотерапии, проводимый Ассоциацией российских озонотерапевтов.
Апробация работы
Материалы диссертации представлены и доложены на I научно – практ. конф. «Медицина третьего тысячелетия глазами молодых ученых» (Йошкар-Ола, 2003); на III Укр. научно-практ. конф. с межд. участием «Местное и парентеральное применение озонотерапии в медицине» (Харьков, 2003); на VII Всеросс. научно-практ. конф. с междунар. участием «Озон в биологии и медицине» (Нижний Новгород, 2007), на VIII Всеросс. научно-практ. конф. с межд. участием «Озон, активные формы кислорода и методы интенсивной терапии в медицине» (Нижний Новгород, 2009).
Диссертация апробирована 28 февраля 2013 года на межкафедральном заседании кафедр патофизиологии, нормальной физиологии, химии, биологии, физики и медицинской информатики, гистологии, эмбриологии и цитологии, патологической анатомии, анатомии ГБОУ ВПО Кировская ГМА Минздрава России (протокол №2 от 28.02.2013 г.).
Личный вклад автора заключался в планировании и проведении патофизиологических экспериментов, в подготовке экспериментального биологического материала для лабораторных исследований, в анализе и статистической обработке полученных данных, в написании научных статей.
Публикации.
По материалам диссертации опубликовано 20 научных работ, из них 4 - в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки России.
Объем и структура диссертации.
Диссертационная работа изложена на 152 страницах машинописного текста, включает 7 таблиц, 57 рисунков (микрофотографии, графики и диаграммы). Диссертация состоит из введения, трех глав собственных данных, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя и приложения. Список литературы включает 238 источника, в том числе 170 отечественных и 68 иностранных авторов.
