Введение к работе
Актуальность исследования. Периферические витреохориоретинальные дистрофии (ПВХРД) - это группа заболеваний, которая характеризуется различными дегенеративными изменениями сетчатки крайних отделов глазного дна и встречается у пациентов с различными видами рефракции. ПВХРД обнаруживаются в общей популяции в 5-13% случаев [Азнабаев М.Т. и соавт., 2005; Щуко А.Г. и соавт., 2008].
Наличие прогностически опасных видов ПВХРД является основной причиной развития отслойки сетчатки и, как следствие этого, - снижения зрения. По данным литературы, ПВХРД встречаются в 90-96% у больных с отслойкой сетчатки [Щербакова С.Ю., 2009; Mitry D., 2009; ., 2008]. Отслойка сетчатки остается в настоящее время значимой медико-социальной проблемой. Частота регматогенной отслойки сетчатки в общей популяции достигает 10-15 случаев на 100 тыс. населения, в 10% случаев она двухсторонняя [Буткевич В.И. и соавт., 2005, Щуко А.Г. и соавт., 2008; Meier P., 2008; Mitry D., 2009]. Большинство пациентов с данной патологией - люди трудоспособного возраста. Слепота, возникающая на фоне отслойки сетчатки, занимает 6-7 место среди всех возможных причин потери трудоспособности [Терехович М.В. и соавт., 2009]. Возникновение дистрофий возможно в любом возрасте, с одинаковой вероятностью у мужчин и женщин [Батманов Ю.Е. и соавт., 2007, 2008; Зимина М.Г., 2009; Кудинова-Савченко Н.А. и соавт., 2009; Мироненко Л.В. и соавт., 2010].
Учитывая тот факт, что в ранней фазе ПВХРД протекает почти бессимптомно, выявление данного заболевания в большинстве случаев происходит на стадиях, сопровождающихся уже необратимыми изменениями сетчатки. Сложившаяся ситуация ставит вопрос о необходимости поиска молекулярно-генетических предикторов ранней диагностики периферических витреохориоретинальных дистрофий. В настоящее время есть все основания относить ПВХРД к группе мультифакторных заболеваний, развивающихся на фоне нарушения сосудистой регуляции сетчатки. В то же время, вероятно, первичные генетические эффекты определяют особенности продукции молекул сосудистой регуляции и рецепторов к ним. К сожалению, в наши дни молекулярно-генетические исследования не коснулись проблемы ПВХРД. Эти обстоятельства объясняют актуальность исследования полиморфизмов генов сосудистой регуляции при ПВХРД.
Цель исследования - изучить генетический полиморфизм молекул сосудистой регуляции у больных с периферическими витреохориоретинальными дистрофиями и оценить их клинико-прогностическое значение для развития заболевания в этническом аспекте.
Для достижения цели решались следующие задачи:
-
Выявить и оценить частоту встречаемости аномальных аллельных вариантов генов EDN1 (Lys198Asn), eNOS (C786T), VEGFA (C634G), AGT (Met235Thr) и их сочетаний среди больных с ПВХРД и относительно здоровых резидентов в русской и бурятской этнических группах.
-
Установить степень риска формирования ПВХРД у носителей аномальных аллельных вариантов генов EDN1 (Lys198Asn), eNOS (C786T), VEGFA (C634G), AGT (Met235Thr) среди резидентов Забайкальского края.
-
Сравнить содержание эндотелина-1, метаболитов оксида азота и сосудистого эндотелиального фактора роста в слезной жидкости и плазме крови у пациентов с ПВХРД и здоровых лиц русской и бурятской национальностей с учетом генотипов EDN1 (Lys198Asn), eNOS (C786T), VEGFA (C634G), AGT (Met235Thr) и их комбинаций.
-
Оценить роль полиморфизма генов молекул сосудистой регуляции в развитии осложнений ПВХРД.
Научная новизна исследования. Впервые обнаружено, что аллельные варианты eNOS (C786T), AGT (Met235Thr), EDN1 (Lys198Asn) предрасполагают к развитию ПВХРД, влияют на развитие осложнений заболевания в русской и бурятской этнических группах. Носители неблагоприятных аллельных вариантов генов eNOS (C786T), AGT (Met235Thr) бурятской национальности имеют более высокий риск формирования ПВХРД по сравнению с таковыми русской национальности.
Впервые установлено, что уровень эндотелина-1 в слезной жидкости больных с ПВХРД обеих этнических групп увеличен по сравнению со здоровыми. Содержание метаболитов оксида азота в плазме крови пациентов с ПВХРД и здоровых лиц бурятской национальности выше по сравнению с аналогичными группами у русских, тогда как в слезной жидкости пациентов с ПВХРД русской и бурятской национальности их уровень ниже по сравнению с контрольной группой. У пациентов обеих национальностей заметно увеличивается содержание VEGF в слезной жидкости при развитии осложнений ПВХРД. По мере развития осложнений ПВХРД в виде разрывов и отслойки сетчатки уровень эндотелина-1 повышается, а метаболитов оксида азота снижается.
Впервые выявлено, что различные аллельные варианты и генотипы влияют на уровень молекул сосудистой регуляции в слезной жидкости. Наличие аллели Asn полиморфизма гена EDN1 (Lys198Asn) обуславливает повышенное содержание эндотелина-1 в слезной жидкости больных c ПВХРД не зависимо от национальности. Носительство аллели С у русских и аллели Т гена eNOS (C786T) у бурят в гомо- и гетерозиготоном состоянии определяет более высокое содержание метаболитов оксида азота в слезной жидкости здоровых и больных ПВХРД. Носительство аллели G полиморфизма гена VEGFA (C634G) в гомо- и гетерозиготном состоянии способствует более высокой продукции ростового фактора у здоровых и больных ПВХРД не зависимо от национальности. У больных - носителей генотипа С/С и С/G падает содержание VEGF в плазме крови.
Теоретическая и практическая значимость работы. В результате исследования получены новые данные о патогенезе ПВХРД, демонстрирующие роль генов молекул сосудистой регуляции eNOS (C786T), EDN1 (Lys198Asn), VEGFA (C634G) и AGT (Met235Thr) в механизмах развития заболевания. Носительство патологических аллелей оказывает влияние на продукцию молекул сосудистой регуляции и развитие осложнений ПВХРД среди представителей русской и бурятской этнических групп Забайкальского края.
Выявленные факты позволяют оценить риск развития ПВХРД в этническом аспекте и разработать новые методы прогнозирования и ранней диагностики заболевания среди резидентов русской и бурятской национальностей. Полученные сведения о наличии полиморфизмов eNOS (C786T), EDN1 (Lys198Asn), VEGFA (C634G) и AGT (Met235Thr) могут быть включены в генетический паспорт индивидуумов и использоваться для оценки риска развития ПВХРД.
Внедрение результатов работы. Теоретические положения, раскрываемые в диссертации, внедрены в учебный процесс на кафедрах нормальной физиологии и офтальмологии ГБОУ ВПО «Читинская государственная медицинская академия».
Апробация работы. Результаты исследования доложены на Всероссийской научно-практической конференции с международным участием, посвященной 60-летию Читинской государственной медицинской академии «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины» 16 октября 2013 года.
Положения, выносимые на защиту:
-
Носители неблагоприятных аллельных вариантов генов eNOS (C786T) и EDN1(Lys198Asn) русской национальности и EDN1(Lys198Asn), VEGFA(C634G), AGT (Met235Thr) бурятской национальности имеют более высокий риск развития ПВХРД. У пациентов с ПВХРД независимо от национальности встречаемость генотипа Asn/Asn гена EDN1 (Lys198Asn) выше при наличии осложнений. У бурят с отслойками сетчатки отсутствуют нормальные генотипы генов EDN1(Lys198Asn), VEGFA(C634G) и AGT (Met235Thr). Распределение полиморфизмов генов eNOS (C786T), AGT (Met235Thr) у резидентов Забайкальского края имеет этнические особенности.
-
В слезной жидкости пациентов с ПВХРД русской и бурятской национальностей уровень эндотелина-1 увеличивался, а метаболитов оксида азота и сосудистого эндотелиального фактора роста снижался по сравнению с контрольной группой. Концентрация молекул сосудистой регуляции в слезной жидкости зависит от клинических проявлений ПВХРД.
-
Содержание эндотелина-1, метаболитов оксида азота и VEGF в слезной жидкости у пациентов с ПВХРД зависит от полиморфизма генов EDN1 (Lys198Asn), eNOS (C786T), AGT (Met235Thr) и VEGFA (C634G) и их сочетаний, присутствует этнический компонент. Влияние полиморфизмов генов EDN1 (Lys198Asn), eNOS (C786T), AGT (Met235Thr) и VEGFA (C634G) на развитие данной патологии носит этнический характер.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 131 странице машинописного текста, иллюстрирована 2 рисунками и 32 таблицами. Состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования и клинической характеристики больных, шести глав собственных результатов исследования, главы обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, состоящего из отечественных и зарубежных источников.
