Введение к работе
Актуальность темы
На современном этапе развития медицины оптимизация заживления повреждений, вызванных механическими воздействиями (ссадины, раны, оперативные вмешательства), действием крайних температур (ожоги, обморожения) и другими повреждающими факторами (гнойно-воспалительные процессы, потертости, опрелости, дистрофические нарушения), остается актуальной научно-практической задачей В связи с тем, что исскуственно синтезированным лекарственным средствам свойственны различные проявления побочных эффектов, в последние годы возник теоретический и практический интерес к веществам биогенного происхождения, в том числе и хитозану (R A A Muzarelh 1986, Ю Ф Коваль и соавт 1992)
Хитозан - уникальный природный биополимер, который был впервые
получен из хитина ракообразных в 1859 (С Rouget), но свое современное
название приобрел лишь в 1894 (F. Hoppe-Seyler). В последующие годы Р
Karrer (1929) провел деградацию хитина с помощью хитиназ, a WH.
Howorth (1939) установил абсолютную конфигурацию этого глюкозамина.
Хитозан разрушается в организме человека и животных до обычных
веществ N-ацетилглюкозамин или глюкозамин (К Г Скрябин, ГА.
Вихорева, В П Варламов, 2002) и обладает иммуномодулирующим,
противомикробным фунгистатическим, радиозащитным,
противовоспалительным, гипохолестеринемическим, гемостатическим действиями(Т Ф Соловьева 1994,НС Н Чирков2002,Tozakietal 1999).
В литературе имеются лишь единичные исследования, посвященные изучению влияния хитозана на процессы посттравматической регенерации кожи Известно (Muzzarelh R А А 1977, I Jabbalgill et al 1998), что данный биополимер активирует нейтрофильные лейкоциты и макрофаги, усиливая при этом их функциональную активность (синтез цитокинов и супероксидная продукция) В исследованиях С A Stone et al (2000), F L Mi et al (2001) показано увеличение количества фибробластов в ране и синтеза коллагена в дерме под влиянием хитозана, что приводит к ускорению течения пролиферативной стадии заживления В работе Т А. Khan, К К Peh (2003) изучено благоприятное действие хитозана на процессы эпителизации раны. Однако, изучение влияния хитозана на процессы посттравматической регенерации в динамике на всех уровнях структурной организации до сих пор не проводилось.
Особое значение, наряду с морфологическими изменениями в условиях применения хитозана, имеет изучение динамики биохимических показателей, в частности, фосфатидилинозитов и их фосфорилированных форм- соединений, принимающих непосредственное участие в реализации различных этапов заживления ран кожи
Цель настоящей работы
Определить класс токсичности хитозана, изучить скорость, характер, способы посттравматической регенерации кожи у животных и динамику фосфоинозитидного обмена при заживлении ран кожи в условиях применения хитозана
Задачи исследования
1 Определить LD5o для хитозана
2 Изучить влияние хитозана на скорость, способы и характер
репаративного процесса в коже
3 Провести анализ изменений цитологического состава раневого
эксудата при воздействии хитозаном
-
Выявить морфологические изменения и характеристику регенерирующих структур полнослойных ран кожи при использовании хитозана
-
Исследовать ультраструктурную организацию фибробластов грануляционной ткани в условиях применения хитозана
6 Определить динамику содержания фосфатидилинозитов и их
фосфорилированных форм в крови и грануляционной ткани на различных
этапах заживления ран под влиянием хитозана
7 Обосновать возможную перспективу дальнейшего изучения суспензии
хитозана на льняном масле для использования его в качестве средства,
стимулирующего заживление ран кожи
Научная новизна
Определены значения острой токсичности и класс опасности для хитозана С помощью комплекса методик впервые установлено стимулирующее влияние хитозана на течение различных этапов репаративного процесса На основе подученных материалов впервые дана морфологическая характеристика стимулирующего влияния хитозана на заживление ран кожи у животных на субклеточном, клеточном и органном уровне структурной организации Нами впервые изучена динамика содержания фосфатидилинозитов и их фосфорилированных форм (фосфатидилинозит-3-фосфатов, фосфатидилинозит-4-фосфатов) в цельной крови и грануляционной ткани на различных этапах заживления ран под влиянием хитозана Впервые установлены морфофункциональные критерии стимулирующего влияния вещества, их характеристика на различных этапах заживления, способы регенерации в условиях воздействия хитозаном
Теоретическое и практическое значение работы
Выполненные комплексные исследования характеризуют морфобиохимические изменения в процессе репаративной регенерации в условиях применения хитозана Представленные материалы могут быть использованы в качестве обоснования для дальнейшего исследования суспензии хитозана на льняном масле и создания лекарственного вещества- стимулятора репаративной регенерации кожи
Положения, выносимые на защиту
-
Хитозан относится к классу «малотоксичных» веществ, что существенно расширяет возможности его клинического использования
-
Суспензия хитозана на льняном масле уменьшает сроки заживления экспериментальных ран кожи у животных на 3 дня, что выражается в сокращении всех этапов посттравматической регенерации при сохранении последовательности их осуществ пения
-
Хитозан обладает выраженным противовоспалительным действием при заживлении полнослойных ран кожи
-
Хитозан активирует не только пролиферативные процессы в регенерирующих тканях, но и изменяет способы заживления ран кожи
-
В условиях применения хиюзана содержание фосфатидилинозитов и их производных форм изменяется в цельной крови и грануляционной ткани в соответствии с последовательными этапами репаративного процесса
-
Суспензия хитозана на льняном масле является перспективным веществом для дальнейшего его изучения на предмет создания нового лекарственного средства-стимулятора репаративной регенерации кожи
Апробация работы
Материалы и основные положения диссертации доложены и обсуждены на заседании кафедры фундаментальной и клинической фармакологии, посвященном 75-летию профессора ГН Четверикова (Тверь, 2003), на конференции, посвященной 80-летию Заслуженного работника Высшей школы РФ, профессора Г В Хомулло (Тверь, 2004), на заседании кафедр фундаментальной и клинической фармакологии, биологии Тверской государственной медицинской академии (Тверь, 2006-2007), на расширенном межкафедральном заседании ГОУ ВПО Тверской ГМА Росздрава (Тверь, 2007)
Публикации
По теме диссертации опубликовано 11 научных работ
Объем и структура диссертации
Диссертация изложена на 158 страницах машинописного текста и состоит из введения, глав «Обзор литературы», «Материалы и методы исследования», трех глав собственных исследований, «Обсуждения результатов», выводов и списка литературы, включающего 288 источников, из которых 149 отечественных и 139 иностранных Работа иллюстрирована 13 таблицами, содержит 48 рисунка (микрофотографии, гистограммы, диаграммы и графики)
