Введение к работе
Актуальность проблемы. В соответствии с современными представлениями существенное место в противоопухолевой защите организма занимает система естественной цитотоксичности (ЕЦТ) [Чекнев СБ., 1993; 1999]. Реакции этой системы при опухолевом росте опосредуются следующими типами клеток: естественными (натуральными) киллерными клетками (ЕКК), мононуклеарными фагоцитами (моноцитами и макрофагами), Т-лимфоцитами, а также полиморфноядерными нейтрофилами [Семененя И.Н., 1991; Wahl L.M., KleinmanH.K., 1998; Чекнев СБ., 1999]. ЕККимоно-нуклеарные фагоциты занимают ключевое положение в системе ЕЦТ, осуществляя как прямое цитотоксическое действие против злокачественно трансформированных клеток, так и опосредованное - через секрецию значительного числа цитокинов, важнейшими из которых являются ИФН-у [Кузнецов В.П., 1998; Фрейдлин И.С., 2001], ФНО-а [Зубова С.Г., Окулов В.Б., 2001], ИЛ-1 [Навашин СМ., Вядро М.М., 1989; Lin Т.-J., Hirji N.. Stenton G.R., 2000]. Помимо ЕКК и мононуклеарных фагоцитов к эффекторным клеткам системы естественной цитотоксичности относятся Т- и В-лимфоциты, полиморфноядерные нейтрофилы, а также тромбоциты [Чекнев СБ., 1999; Васильева Г.И., Иванова И.А, Тюкавкина С.Ю., 2000; Головоз-нин М.В., 2001]. С другой стороны Т-лимфоцитам, а именно субпопуляции Т-хелперов (ТЫ и Th2) отводится роль главных регуляторов иммунного ответа из-за их способности продуцировать широкий спектр цитокинов. Считается, что противоопухолевая защита ассоциируется с Thl-типом иммунного ответа, в то время как опухолевая прогрессия с Т1і2-типом [Потапнев М.П.,2002].
Одним из основных методов лечения злокачественных новообразований до настоящего времени остается цитостатическая терапия. Однако возможности химиотерапии лимитируются выраженными побочными эффектами цитостатических препаратов, связанными в первую очередь с низкой селективностью канцеролитического эффекта большинства известных в настоящее время цитостатиков и их токсическим влиянием на нормальные активно пролиферирующие клеточные системы организма [Гольдберг Е.Д., Новицкий В.В., 1986; Кудаева И.В., 1997; HuitemaAD., Spander М, Mathit PvA е.а., 2002; Katoh С, Kitajima S., Saga Y. e.a., 2002; Nicol D., 2002]. Кроме того, применение противоопухолевых препаратов усугубляет и без того нарушенный баланс основных звеньев иммунитета, приводя к вторичному иммунодефициту [Напалков Н.П., Бохман Я.В., Граиов A.M. и др., 19951.
о» ymtfh
В связи с этим, при проведении химиотерапии для повышения эффективности лечения применяют модификаторы биологических реакций (МБР) -агенты различной природы, воздействующие как на опухолевые клетки, так и различные регуляторные системы организма. В их число входят природные и синтетические иммуномодуляторы, цитокины, индукторы созревания и дифференцировки клеток, моноклоналыгые антитела и др. [Навашин СМ., Вядро М.М., 1989; Амосова КН., Зуева Е.П., Разина Т.Г. и др., 2003]. К сожалению, некоторые группы модификаторов биологических реакций, используемые в терапии злокачественных новообразований, не лишены недостатков, при их использовании нередко наблюдаются различные побочные эффекты, отсутствие антиканцерогенного действия, а иногда и усиление опухолевого роста [Симбирцев А.С., 1998; Гершанович МЛ., 2003; Киселевский М.В., 2003].
Препараты растительного происхождения - особая группа модификаторов биологических реакций, выгодно отличающаяся от остальных лекарственных средств, прежде всего широким спектром регулирующих эффектов, низкой токсичностью и отсутствием побочных явлений, а также высокой биологической доступностью [Гольдберг Е.Д., Зуева Е.П., 2000]. Многочисленные данные указывают на возможность не только усиления с помощью растительных средств эффективности цитостатической терапии, но и существенного снижения токсичности последней [Валавичус Ю.М., Янкави-чус К.К., Вайчунене ЯЛ. и др, 1989; Зуева Е.П., Разина Т.Г, Амосова Е.Н., 1997; Амосова Е.Н., Зуева Е.П., Разина Т.Г и др., 2003]. Особенно важным свойством фитопрепаратов является их способность влиять как на цитоток-сическую, так и на секреторную функции клеток, в частности на продукцию ФНО, ИФН-у, ИЛ-1 и ИЛ-2, КСФ [Yesilada Е., Ustun О., Sezik Е. е.а., 1997; Гольдберг Е.Д., Зуева Е.П., 2000; Вершинина С.Ф., Потявина Е.В., 2003], при этом наблюдается нормализация нарушенного баланса субпопуляций Т-лимфоцитов при развитии в организме опухоли [Вершинина С.Ф., Потявина Е.В., 2003].
В этом отношении большой интерес для исследования представляет жидкий экстракт шлемника байкальского. В ряде работ сотрудников НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН было показано, что жидкий экстракт шлемника байкальского подавляет процесс метастазирования и ингибирует рост перевиваемых опухолей. Кроме того, использование данного препарата при химиотерапии животных с опухолями приводит к повышению противоопухолевого и противометастатического эффектов цитостатиков и снижает их
лейкопенический эффект [Амосова Е.Н., Зуева Е.П., РазинаТ.Г., 1990; Удин-цев С.Н., Разина Т.Г., Яременко К.В., 1990; Разина Т.Г., Литвиненко В.И., Попова Т.П. и др., 1993]. Изучение механизмов влияния жидкого экстракта шлемника байкальского на состояние системы естественной цитоток-сичности при опухолевом росте является важным моментом для совершенствования терапевтических подходов при лечении злокачественных новообразований.
Цель исследования. Изучить влияние жидкого экстракта шлемника байкальского и его комбинации с циклофосфаном на состояние системы естественной цитотоксичности мышей при развитии карциномы легких Льюис.
Задачи исследования.
Изучить влияние жидкого экстракта шлемника байкальского на гуморальный (антителообразование) и клеточный (реакция гиперчувствительности замедленного типа, макрофагальный фагоцитоз, пролиферативная активность лимфоцитов) иммунный ответу интактных мышей.
Оценить противоопухолевое и антиметастатическое действие жидкого экстракта шлемника байкальского и его комбинации с циклофосфаном при развитии карциномы легких Льюис.
Исследовать цитотоксическую активность перитонеальных макрофагов мышей с карциномой легких Льюис при введении жидкого экстракта шлемника байкальского и его комбинации с циклофосфаном.
Изучить цитотоксическую активность естественных киллерных клеток мышей с карциномой легких Льюис при введении жидкого экстракта шлемника байкальского и его комбинации с циклофосфаном.
Исследовать изменение секреторной активности клеток-эффекторов системы естественной цитотоксичности (естественных киллерных клеток, перитонеальных макрофагов, Т-лимфоцитов) под влиянием экстракта шлемника байкальского и его комбинации с циклофосфаном.
Научная новизна. Показано, что жидкий экстракт шлемника байкальского (ЭШБ) оказывает стимулирующее действие, как на гуморальный, так и на клеточный иммунный ответ. При развитии карциномы легких Льюис ЭШБ потенцирует противоопухолевое и антиметастатическое действие цик-лофосфана. В ходе проведенной работы впервые изучены механизмы влияния жидкого экстракта шлемника байкальского и его комбинации с циклофосфаном на состояние системы естественной цитотоксичности при развитии карциномы легких Льюис. При этом установлена способность исследуемого препарата и его комбинации с циклофосфаном, модулировать функ-
циональную активность естественных киллерных клеток и макрофагов, а также корректировать нарушенный баланс цитокинов при данной экспери-, ментальной модели опухолевого роста у мышей. Кроме того, было отмечено, что ЭШБ нивелирует иммуноцитотоксический эффект циклофосфана, путем влияния как на функциональную активность клеток-эффекторов системы естественной цитотоксичности, так и секрецию ими широкого спектра медиаторов иммунного ответа (ФНО-а, ИЛ-1Р, ИФН-у, ИЛ-2, ИЛ-4 и ИЛ-10),
Практическая значимость. Полученные данные расширяют имеющиеся представления о механизмах противоопухолевой защиты организма. Результаты работы могут быть использованы для разработки методов коррекции нарушений, возникающих в организме при применении цитостатиче-ских препаратов, а также патогенетически обоснованных методов противоопухолевой терапии с использованием препаратов, модулирующих функции клеток-эффекторов системы естественной ЦИТОТОКСИЧНОСТИ.
Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на объединенном иммунологическом съезде (г. Екатеринбург, 2004), на конференции молодых ученых СО РАМН "Фундаментальные и прикладные проблемы современной медицины" (г. Новосибирск, 2004), на пятом международном конгрессе молодых ученых "Науки о человеке" (г. Томск, 2004), на конференции посвященной 25-летию НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН "Современное состояние и перспективы развития экспериментальной и клинической онкологии" (г. Томск, 2004).
Публикации. По теме диссертации опубликовано б научных работ.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 158 страницах машинописного текста, иллюстрирована 10 рисунками, 31 таблицей и состоит из введения, 4 глав, выводов и указателя литературы, содержащего 248 источников (152 отечественных и 96 иностранных авторов).
![Влияние экстрактов ольхи клейкой на развитие перевиваемых опухолей в условиях цитостатической терапии [Электронный ресурс]](/i/i/4449/188653.png "Влияние экстрактов ольхи клейкой на развитие перевиваемых опухолей в условиях цитостатической терапии [Электронный ресурс] Шилова Наталья Владимировна")
