Введение к работе
Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, в мире насчитывается более 2 миллиардов человек, страдающих заболеваниями печени (Дроговоз СМ., 2008). Растущий уровень заболеваемости гепатопатиями, вызванными ксенобиотическими факторами, связан с увеличением потребления лекарственных средств, химизацией пищевой промышленности, глобальным изменением экологии, высокой степенью алкоголизации населения (Григорьев П.Я, 2002; Хазанов А.И., 2006).
Возможности этиотролной терапии гепатолатий ограничены, и по-прежнему в лечении гепатитов различной этиологии весьма значительной остается роль патогенетической терапии гепатопротекторными средствами (Лобу-тева Л.А. и др., 2009). Несмотря на большое количество лекарственных средств, позиционируемых как гепатопротекторы на современном фармакологическом рынке, большинство из них являются зарубежными препаратами растительного происхождения. Эффект многих из них при острой и хронической патологии печени недостаточен и не подтверждается при независимых сравнительных исследованиях (Дроговоз СМ. и др., 1998; Верма С, Зулувас П., 2008). В связи с чем поиск новых эффективных соединений с гепатопротективным действием остается актуальным направлением отечественной фармакологии.
Протективное действие многих синтетических гепатопротекторов, эссен-циальных фосфолипидов, препаратов, содержащих флавоноиды растений, объясняют способностью подавлять патологически активированные процессы пе-рекисного окисления липидов, т.е. антиоксидантным и мембранопротекторным действием (Palasciano G., 1994; Белобородова Э.И. и др., 2000; Буеверов А.О., 2001; Gebhardt R., 2002; Дегтярева И.И. и др., 2002). Проведенные ранее исследования гибридного антиоксиданта гидроксипиридинового ряда - мексидола -свидетельствовали о наличии у него гепатопротекторной активности, в связи с чем перспективным является поиск новых высокоэффективных в отношении гепатопротекции соединений данного ряда путем направленного синтеза и скрининга среди уже существующих опытных веществ.
Работа является разделом комплексной темы Мордовского государственного университета им. Н.П. Огарева «Фармакологическая коррекция повреждений, возникающих при гипоксических, токсических и радиационных воздействиях». Номер государственной регистрации 01200004103.
Цель исследования: Разработка новых гепатопротектов на основе производных 3-гидроксипиридина (3-ГП).
Задачи исследования:
Изучить острую токсичность исследуемых соединений.
Оценить влияние исследуемых соединений на морфофункциональные характеристики печени (уровень активности аланиновой и аспарагиновой трансами-назы (АЛТ и ACT), щелочной фосфатазы (ЩФ), общего белка и его фракций, состояние процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) по уровню малонового диальдегида (МДА) и активности каталазы, а также морфологическую структуру печени) при остром тетрахлорметановом гепатите у мышей и крыс и
остром аллиловом гепатите у крыс.
3. Определить возможность коррекции морфофункциональных изменении печени (уровень активности АЛТ, ACT, ЩФ, общего белка и его фракций, состояние ПОЛ по уровню МДА и активности каталазы, а также морфологическую структуру печени) при хроническом тетрахлорметановом гепатите у крыс.
Научная новизна.
Изучена острая токсичность исследуемых производных 3-ГП, значения их LDjonpn внутрибрюшинном введении составили от 400 до 1650 мг/кг.
Исследована гепатопротекторная активность фумарата, никотината, гемисукцината, липоата и адипината 3-ГП.
У фумарата 3-ГП в дозе 25 и 50 мг/кг, адипината 3-ГП в дозе 25 мг/кг и гемисукцината 3-ГП в дозе 50 мг/кг выявлено антитоксическое действие на модели острой интоксикации тетрахлорметаном, проявлявшегося в снижении летальности подопытных животных. При острой интоксикации аллиловым спиртом, антитоксическое действие обнаружено у фумарата 3-ГП в дозе 25 мг/кг, снижавшего летальность животных до 0%.
На модели острого тетрахлорметанового гепатита на белых мышах и крысах установлено наличие гепатопротекторной активности у фумарата, адипината, гемисукцината и никотината 3-ГП, при остром аллиловом гепатите - у фумарата и никотината 3-ГП в изученных дозах, проявлявшейся в снижении степени выраженности цитолитического и холестатического синдромов, а также улучшении морфологической структуры печени, что выражалось в снижении степени дистрофии гепатоцитов, уменьшении воспалительной инфильтрации и некрозов гепатоцитов.
На модели хронического тетрахлорметанового гепатита на белых крысах установлено наличие гепатопротекторного действия у фумарата и адипината 3-ГП в дозе 25 мг/кг, выражавшегося в сохранении белоксинтетической функции печени, улучшении морфологической структуры печени: снижении степени дистрофии гепатоцитов, уменьшении воспалительной инфильтрации и некрозов гепатоцитов.
Эффективнее других исследованных производных 3-ГП степень выраженности процессов ПОЛ (по уровню МДА) в сыворотке крови белых крыс с острым тетрахлорметановым гепатитом снижали фумарат и адипинат 3-ГП (в дозе 25 мг/кг), при хроническом гепатите - фумарат 3-ГП (25 мг/кг), остром аллиловом гепатите - фумарат 3-ГП (25 мг/кг) и никотинат 3-ГП (50 мг/кг).
Практическая значимость.
Результаты исследования внедрены в научно-исследовательскую работу и учебный процесс кафедры фармакологии ГОУВПО «МГУ им. Н.П. Огарева» и служат обоснованием для доклинического исследования указанных соединений.
Основные положения, выносимые на защиту. 1. Фумарат 3-ГП в дозе 25 и 50 мг/кг, адипинат 3-ГП в дозе 25 мг/кг и геми-сукцинат 3-ГП в дозе 50 мг/кг оказывают антитоксическое действие на модели острой интоксикации тетрахлорметаном, что проявляется в снижении летальности подопытных животных. При острой интоксикации аллиловым спиртом антитоксическое действие обнаружено у фумарата 3-ГП в дозе 25 мг/кг.
На модели острого тетрахлорметанового гепатита на белых мышах и крысах гепатопротекторными свойствами обладают фумарат, адипинат, гемисук-цинат и никотинат 3-ГП, при остром аллиловом гепатите - фумарат и никоти-нат 3-ГП в изученных дозах.
На модели хронического тетрахлорметанового гепатита протективное действие на печень оказывают фумарат и адипинат 3-ГП в дозе 25 мг/кг.
Апробация работы. Результаты работы и основные положения, представленные в диссертации, были доложены и обсуждены на XIII, XIV, XVI Российском национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2006, 2007, 2009), Всероссийской научно-практической конференции, посвященной памяти профессора Я.В. Костина «Общество, здоровье, лекарство» (Саранск, 2005), XI научной конференции молодых ученых, аспирантов и студентов МГУ им. Н.П. Огарева (Саранск 2006), XXXIV, XXXV, XXXVI, XXXVII Огаревских чтениях (научной конференции Мордовского государственного университета им. Н.П. Огарева) (Саранск 2005 - 2008), I Международной (X Всероссийской) Пироговской студенческой научной медицинской конференции (Москва, 2006), XXVIII и XXX конференции общества молодых ученых МГМСУ (Москва, 2006, 2008), XIII Российской конференции «Гепатология сегодня» (Москва, 2008), 81-й конференции СПбГМА им. И.И. Мечникова (Санкт-Петербург, 2008).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 19 работ, в том числе 7 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ для публикации материалов кандидатских диссертаций, получен 1 патент РФ.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 175 стр. машинописного текста, документирована 19 таблицами и иллюстрирована 42 рисунками. Работа состоит из введения, литературного обзора, описания материалов и методов исследования, изложения собственных результатов, обсуждения полученных результатов, выводов и библиографического указателя, включающего 355 источников, в том числе 227 отечественных и 128 иностранных.
