Введение к работе
^
Актуальность темы. В последнее время в России сложилась крайне неблагоприятная демографическая ситуация, характеризующаяся возрастающими темпами убыли населения. За последние пять лет численность населения в Алтайском крае уменьшилась более чем на 50 тыс. человек. Существующее поколение воспроизводит себя менее чем на 60%, семьи характеризуются малодетностью, что ведет к старению общества. На фоне сохраняющейся тенденции к сокращению народонаселения особенно острой является проблема бесплодия. В России бесплодием страдают 12-15% супружеских пар (Кулаков В.И., 1999), а при показателе бесплодия свыше 15% проблема уже приобретает государственное значение.
Методы вспомогательной репродукции делают возможным прижизненное изучение человеческих гамет, зигот и эмбрионов на ранних стадиях развития. Важную роль в достижении беременности в процессе оплодотворения in vitro и переноса эмбрионов играет выбор наиболее перспективного клеточного материала (ооцитов, зигот, эмбрионов). Однако в настоящее время в практической эмбриологии существуют лишь качественные, субъективные критерии его оценки.
Цель исследования. Исследование вариантной анатомии ооцитов, зигот, эмбрионов и разработка информативных критериев для повышения надежности прогнозирования успешности экстракорпорального оплодотворения.
Задачи исследования:
Выявить вариабельность и информативность морфологических параметров комплекса ооцит-кумулус, зигот и эмбрионов.
Изучить степень надежности качественных морфологических параметров ооцитов и эмбриональных клеток для прогноза успешности экстракорпорального оплодотворения.
Разработать методику морфометрического исследования строения ооцитов и эмбриональных клеток.
Осуществить отбор информативных количественных морфологических параметров эмбрионального клеточного материала, исследовать степень их надежности для прогноза исходов экстракорпорального оплодотворения.
Предложить морфометрические критерии оценки функционального состояния клеточного материала и проанализировать их эффектив-
і «ШМИОГСКА і
ность для обеспечения результативности экстракорпорального оплодотворения.
Научная новизна исследования. Изучена вариантность строения комплекса ооцит-кумулус, зигот, эмбрионов. Предложены информативные качественные и количественные параметры оценки морфофункционального состояния системы ооцит-кумулус, зигот, эмбрионов. Получено подтверждение возможности прогноза успешности экстракорпорального оплодотворения по результатам оценки состояния эмбриональных структур. Впервые на человеческом материале морфометрическими методами подтверждена оправданность использования наиболее информативных морфологических характеристик для использования их в роли критериев, обеспечивающих повышение результативности экстракорпорального оплодотворения и инъекции единичного сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки.
Практическая значимость работы. Предложенные критерии качественной и количественной оценки морфофункционального состояния системы ооцит-кумулус, ооцитов, зигот, эмбрионов при использовании их для отбора наиболее перспективного клеточного материала в повседневной работе врача-эмбриолога повышают успешность экстракорпорального оплодотворения.
Положения, выносимые на защиту:
По данным морфометрического исследования выявлена высокая морфологическая вариабельность системы ооцит-кумулус, зигот и эмбрионов по таким элементам, как: лучистый венец, прозрачная оболочка, перивителлиновое пространство, цитоплазма, бла-стомеры.
Информативно значимые качественные морфологические признаки системы ооцит-кумулус, зигот и эмбрионов могут быть использованы в качестве критериев отбора наиболее перспективного клеточного материала в программе ЭКО.
3. По данным морфометрического исследования наиболее
информативными критериями для прогноза эффективности ЭКО яв
ляются: умеренная интенсивность окраски и компактность клеток
кумулуса, отчетливая выраженность границы лучистого венца и лу
чей в нем, однородность структуры лучистого венца, умеренная тол
щина прозрачной оболочки зиготы, равномерность перивителлиново-
го пространства, симметричность пронуклеусов, одинаковые размеры
бластомеров в эмбрионе при наибольшем их количестве.
Апробация работы. Материалы исследования были представлены на международных конференциях: XII международная конференция Российской ассоциации репродукции человека (Санкт-Петербург, 2003), международная конференция «Twin-Meeting Alpha-Andrology: 4th Biennial Alpha Conference I 8th Meeting of Andrology in the 2000s» (Антверпен, Бельгия, 2003), XXIX ежегодная конференция Американского андрологического общества (Балтимор, США, 2004).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 печатных работ.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 185 страницах машинописного текста, иллюстрирована 46 рисунками и 50 таблицами, состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, двух глав, содержащих результаты собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, списка цитируемой литературы и приложения. Библиографический указатель содержит 207 источников, из которых 51 отечественных, 156 иностранных авторов.