Введение к работе
Актуальность проблемы
Псориаз рассматривают как системное мультифакториальное заболевание организма с гфогрессируюгцей дезорганизацией соединительной ткани, нарушениями обмена веществ, проницаемости клеточных мембран, поражением кожи, суставов, почек, печени и других органов (Lester R S, 1992. Скрипкин Ю.К., 1999; Заярко ВВ. с соавт., 2000; Шилов В.Н., 2001). На уровне организма четко вырисовывается роль нарушений межклеточного матрикса, строения клеточных мембран, межклеточных взаимодействий н биохимических нарушений. Установлено, что в патогенезе псориаза важную роль играют нарушения обмена веществ, в частности липидного (Кешелева З.Б. с соавт., 1990; Farber ЕМ. et al., 1991; Sunonetti О et al, 1992; Бутов Ю.С. с соавт., 1999; Прохоренко В.И., Вандышева Т.М., 2002). Важное значение в указанных нарушениях имеет расстройство микроциркуляции, включающее нарушение реологии крови, являющееся одной из существенных стадий в патогенезе любого патологического процесса. В свою очередь, наиболее важный вклад в реологию крови и микроциркуляцию вносят эритроциты. С другой стороны, они служат удобными модельными системами для изучения указанных функций крови и всего организма. Однако в литературе практически отсутствует комплексный подход к изучению изменений при псориазе таких показателей функциональной активности эритроцитов, как спектр липидных фракций мембран эритроцитов, их заряд, агрегация и перекисное окисление липидов (ПОЛ). Между тем, анализ механизмов изменения структурно-функционального состояния эритроцитов может быть существенен при решении проблем возникновения и терапии этого заболевания.
С другой стороны, по-прежнему существует проблема эффективной
терапии псориаза. Гпяррмен""* *<"* прпття псориаза, такие как
ЯШ^РК
фотохимиотерапия, цигосіатики, ретиноиды (в том числе и последнего поколения), могут применяться далеко не всем больным ввиду многочисленных противопоказаний, кроме того, они не лишены серьезных побочных эффектов и осложнений (Суворова К.Н., 1996; Шилов В.Н., Сергиенко ВИ., 1998 и др.). Таким образом, расширение арсенала эффективных методов лечения псориаза, способствующих улучшению качества жизни больных, снижению медикаментозной нагрузки, а, следовательно, и числа осложнений продолжает оставаться актуальной задачей. В этой связи несомненный интерес представляет использование низкоинтенсивных электромагнитных волн крайне высокой частоты (ЭМИ КВЧ). Сегодня накоплено достаточно много фактического материала, свидетельствующего о значимом терапевтическом эффекте КВЧ-воздействия при многих заболеваниях человека, в том числе и при кожных заболеваниях (Балчугов В.А. с соавт., 2002; Киричук В.Ф. с соавт., 2003; Чуян Е.Н. с соавт., 2003 и др). Однако, несмотря на большое количество работ о положительном эффекте применении КВЧ-терапии в медицинской практике, публикации посвященные исследованию механизмов действия КВЧ-излучения немногочисленны, и многие из них носят лишь фактологический характер. Поэтому одной из проблем внедрения низкоинтенсивного КВЧ-воздействия в комплекс медицинских мероприятий при псориазе является доказательство его непосредственного восприятия тканями и клетками, в том числе системой крови.
Работа выполнялась в соответствии с планом НИР кафедры физиологии и биохимии человека и животных ННГУ, а также планом совместных научных исследований ННГУ и Нижегородского научно-исследовательского кожно-венерологического института МЗ РФ. Часть исследований выполнялась при финансовой поддержке гранта АОЗ-2.12-476 программы Минобразования РФ «Поддержка научно-исследовательской работы аспирантов высших учебных заведений».
Цели и задачи исследований
Целью работы явилось изучение структурно-функционального состояния эритроцитов человека в норме, при псориазе и КВЧ-воздействии. В задачи работы входило:
-
Исследование структурного состояния эритроцитов методом атомно-силовой микроскопии.
-
Изучение электрофоретической подвижности и агрегации эритроцитов.
-
Определение уровня спектрина и соотношения липидных фракций в мембранах эритроцитов.
-
Изучение уровня малонового диальдегида в эритроцитах.
-
Изучение действия низкоинтенсивного КВЧ-излучения на эритроциты крови здоровых доноров и больных псориазом и in vitro
6 Анализ изменений структурно-функционального состояния мембран эритроцитов больных псориазом при включении в комплекс терапии КВЧ-воздействия и препарата димефосфон.
Научная новизна:
В работе впервые проведены комплексные исследования структурно-функционального состояния мембран эритроцитов при псориазе, включающие определение их морфологических характеристик с использованием атомно-силовой микроскопии (АСМ) и электрокинетических свойств методом микроэлектрофореза, позволившие выявить новые механизмы нарушения их структурно-функциональных свойств.
Впервые методом одномерной тонкослойной хроматографии (ТСХ) определены 9 фракций липидного компонента мембран эритроцитов и 10 липидных фракций плазмы крови в норме и при псориазе. В работе использован новый методический подход, основанный на использовании двух систем растворителей, позволяющий одновременно разделить полярные и неполярные липиды.
Впервые в эксперименте in vitro показано модулирующее действие миллиметровых волн низкой интенсивности на эритроциты больных псориазом, приводящее к повышению их электрофоретической подвижности (ЭФПЭ), снижению интенсивности ПОЛ, восстановлению соотношения липидных компонентов мембран эритроцитов и плазмы крови
Показано, что низкоинтенсивное КВЧ-излучение со спектром «белый шум», при включении в комплексную терапию, приводит к более эффективному восстановлению таких характеристик мембран эритроцитов, как ЭФПЭ, соотношение липидных фракций и уровень малонового диальдегида (МДА), по сравнению со стандартной терапией.
Научно-практическая значимость
Полученные результаты расширяют представления о механизмах нарушения структурно-функциональных свойств мембран эритроцитов при псориазе. Они важны для понимания роли мембранных дисфункций в патогенезе псориаза и дополняют существующие теоретические предпосылки для разработки практических методов их коррекции
Предлагаемый методический подход определения липидного состава, как эритроцитарных мембран, так и плазмы крови позволяет более точно диагностировать нарушения липидного обмена при псориазе, а также оценить его изменения при проведении корригирующей терапии.
Выявленное модулирующее действие миллиметровых волн низкой интенсивности на мембраны эритроцитов при псориазе обосновывает возможность использования КВЧ-излучения в составе комплексной терапии для повышения эффективности лечения и снижения медикаментозной нагрузки.
Апробация работы
Основные положения работы были доложены на 3-й Международной
конференции молодых учбных и студентов «Актуальные проблемы
современной науки» (Самара, 2002), Пироговской студенческой научной
конференции Студенческого научного общества Российского
государственного медицинского университета (Москва, 2003), III Всероссийской конференции с международным участием «Механизмы функционирования висцеральных систем» (Санкт-Петербург, 2003), 8-ой Международной Путинской школе-конференции молодых ученых «Биология - наука 21-го века» (Пущино, 2004), расширенном заседании кафедры физиологии и биохимии человека и животных ННГУ (2004).
По материалам диссертации опубликовано 12 работ. Поданы заявки на получение патентов РФ «Способ оценки структурно-функционального состояния мембран эритроцитов в норме и при псориазе» (приоритетная справка государственной регистрации №2004131418 от 28.10.2004), «Способ оценки липидного обмена в норме и при псориазе» (приоритетная справка государственной регистрации № 2004131419 от 28.10.2004).
Структура и объем диссертации
