Введение к работе
Актуальность темы. В настоящее время существует ряд методов диагностики беременности. Эти методы неравноценны и отличаются рядом особенностей, большей или меньшей специфичностью и достоверностью. Они в разной степени сложны по технике выполнения и отличаются, друг от друга также по времени наступления реакции, что, без сомнения, имеет большое практическое значение (А.М. Семиволос, 1999; В.В. Руденко, 2000; Г.П. Дюльгер и др., 2003).
Из лабораторных методов диагностики, наиболее ценными являются радиоиммунологический (РИА) и иммуноферментный (ИФА) анализ, которые позволяют определять в биологических жидкостях (плазма, сыворотка, моча, амниотическая жидкость и т. п.) количественное содержание гормонов-регуляторов репродуктивной функции (Д.И. Санагурский и др., 1990; А.И. Сергиенко, 1991; Г.Н. Бурдов и др., 2001;О.Н. Преображенский, 2003; W.F. Сleere, 1981; S. Degl Innocenti, P. Pollidori, 1988; R. Lombardelli et al., 1988; R.L. Nebel, 1988).
К сожалению, внедрение методов РИА и ИФА до настоящего времени не получило повсеместного распространения, что связано со сложностью организации специализированной лаборатории и дефицитом методической литературы по использованию результатов анализа в клинической практике.
В медицине широкое применение получили тесты на беременность, основанные на определении в моче или сыворотке крови хорионического гонадотропина – гормона, продуцируемого хорионом уже с первых дней после имплантации зародыша. Тесты отличаются высокой воспроизводимостью результатов анализа, достоверностью, диагностической точностью и простотой исполнения. Диагностическая эффективность составляет до 98 % (С.В. Зяблицев и др., 2003).
Несмотря на значительный объем информации, накопленный в медицине, ветеринарная наука на данный момент не располагает достаточными сведениями о гормональном фоне беременности, и в частности, уровне хорионического гонадотропина в организме животных в различные физиологические периоды и стадии беременности. Изучение данного вопроса позволит дополнить информацию о течении родового процесса у животных. Кроме того, актуальными являются исследования по разработке метода определения беременности у крупного рогатого скота, основанного на индикации хорионического гонадотропина в различных биологических жидкостях.
Цели и задачи исследований. Цель исследований – разработка технологии иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров, основанной на качественном определении плацентарного гормона – хорионического гонадотропина.
Поставленная цель решалась следующими задачами:
– провести мониторинг данных по диагностике беременности и бесплодия коров в животноводческих хозяйствах Ульяновской области;
– изучить уровень хорионического гонадотропина у коров на разных сроках беременности и у бесплодных животных;
– разработать технологию изготовления и применения иммунологического теста для определения беременности и бесплодия коров;
– изучить диагностическую эффективность разработанного метода и определить экономическую целесообразность его применения.
Научная новизна работы. Впервые получены данные об уровне хорионического гонадотропина в организме коров в различные сроки стельности.
Разработана технология изготовления и применения иммунологического теста для определения беременности и бесплодия коров, не имеющего аналогов в ветеринарии. Получены данные о его диагностической эффективности. Новизна полученных данных подтверждена патентом на изобретение № 2298791 от 10 мая 2007г. «Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок».
Практическая ценность. Разработан и прошел производственную апробацию экспресс-метод, позволяющий в условиях животноводческих ферм в достаточно короткие сроки и с высокой степенью достоверности устанавливать или исключать беременность коров.
Обоснованные научно-практические результаты вошли в основу следующих нормативно-технических документов:
- Временное наставление по применению одностадийного иммунологического теста на беременность и бесплодие коров (утверждено Управлением ветеринарии Ульяновской области от « 30 » мая 2008 г.);
- Технические условия «Одностадийный иммунологический тест на беременность и бесплодие коров» (ТУ 03-00-06) на опытную партию (согласованы Управлением ветеринарии Ульяновской области и утверждены ректором ФГОУ ВПО «Ульяновская ГСХА» от « 15 » мая 2008 г.);
- Инструкция по изготовлению одностадийного иммунологического теста на беременность и бесплодие коров (согласована Управлением ветеринарии Ульяновской области и утверждена ректором ФГОУ ВПО «Ульяновская ГСХА» от « 15 » мая 2008 г.).
Основные положения, выносимые на защиту:
– применяемые в животноводческих хозяйствах Ульяновской области методы диагностики беременности и бесплодия коров не позволяют осуществлять эффективный контроль за воспроизводством стада крупного рогатого скота;
– получены данные, свидетельствующие об уровне хорионического гонадотропина на разных сроках беременности коров;
– разработана технология изготовления и применения одностадийного иммунологического теста для определения беременности и бесплодия коров;
– производственные испытания установили высокую диагностическую точность и экономическую эффективность разработанного иммунологического метода определения беременности и бесплодия коров.
Апробация материалов исследований. Основные материалы диссертации доложены, обсуждены и одобрены на ежегодных отчетных научно-теоретических и методических конференциях профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов Ульяновской ГСХА с 2004 по 2007 г.г. и представлялись на следующих научных конференциях:
– межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых Приволжского Федерального округа «Молодые ученые в решении региональных проблем АПК» (Самара, 2005);
– международной научно-практической конференции «Фундаментальные и прикладные проблемы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных в изменившихся условиях системы хозяйствования и экологии» (Ульяновск, 2005);
– всероссийской научно-практической конференции «Современное развитие АПК - региональный опыт, проблемы, перспективы» (Ульяновск, 2005);
– международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных» (Воронеж, ВНИИВИПФиТ, 2005);
– международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы аграрной науки и образования», посвященной 65-летию Ульяновской ГСХА (Ульяновск, 2008).
Результаты научных исследований по разработке технологии иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров включены в Реестр научных разработок Ульяновской ГСХА и отмечены призовыми местами региональных конкурсов:
– первое место в областном конкурсе «Лучший инновационный проект», приоритетное направление «Сельское хозяйство» (Ульяновск, 2007);
– третье место в областном конкурсе «Лучшее техническое решение, изобретение, полезная модель по итогам 2006 года» в номинации «Агрономия, медицина, ветеринария» (Ульяновск, 2007).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ, в том числе 7 научных статей, из которых 2 – в изданиях, входящих в «Перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертации на соискание ученой степени доктора и кандидата наук».
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 111 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, список использованной литературы и приложения.
Работа иллюстрирована 10 таблицами, 2 диаграммами и 10 рисунками. Список использованной литературы включает 175 источников, из которых 77 иностранных.