Введение к работе
Актуальность проблемы. Известно, что современные теории )аневого процесса отводят свободнорадикальному перекисному жислению роль фундаментальной молекулярной основы заживления эан, особенно огнестрельных (П.И.Толстых и соавт., 2001; ".Н.Берченко и соавт., 2001). Основным субстратом ;вободнорадикальньгх реакций перекисного окисления липидов шляются ненасыщенные жирные кислоты, входящие в состав росфолипидов клеточных мембран и мембран субклеточных )рганелл, липопротеидов плазмы крови (Г.Я.Дубур и соавт., 1981; С.М.Дюмаев и соавт., 1981; Banghan et. al., 1965).
В физиологических условиях продукты свободнорадикального жисления участвуют в регуляции состава биомембран и гроницаемости последних, а также скорости пролиферации клеток Е.Б.Бурлакова и соавт., 1984; А.М.Герасимов, 1985; Grisham,1994). їзбьіточное накопление гидроперекисей жирных кислот ингибирует интез белка, блокирует функцию макрофагов, изменяет их :емотаксическую и ферментную активность. Их избыток может виться причиной дезинтеграции клеточных мембран и мембран убклеточных органелл, инактивации тиоловых ферментов и других іелков, что в свою очередь приведет к нарушению функциональной ктивности клеток (Н.М.Эмануэль, 1979, 1986; Е.Б.Бурлакова, 1984; lalliwell, 1994). Свободные радикалы могут изменять конформацию елка, увеличивать его чувствительность к протеолизу, а также овреждать молекулу ДНК, включая ее фрагментацию (Hinder, 1991; lalliwell, 1994). Проявлеїшю повреждающего действия продуктов вободнорадикального окисления препятствует сложная іногокомпонентная антиоксидантная система, которая обеспечивает х связывание и модификацию, тем самым предупреждая Или силивая разрушение перекисей.
Согласно современным представлениям, в основе равматических повреждений, в том числе и мышечной ткани, лежит бразование и накопление в тканях свободных радикалов кислорода Kaufman, 1989; Hinder, 1991). Это позволило с принципиально новых озиций рассмотреть процессы формирования огнестрельной раны и аметить совершенно новые пути терапии этих повреждений. В вязи с этим, в последнее время при огнестрельных ранах с целью эсстановления жизнеспособности тканей, нормализации етаболических процессов и функций мембран, повышения
устойчивости к гипоксии, рекомендуется применение аптиоксидантов (Ю.Г.Шапошников, 1986).
Ранее был известен положительный эффект влияния аптиоксидантов на предупреждение развития инфекции и заживление гнойных и огнестрельных ран, ожогов, трофических язв (М.Ф.Камаев, 1975; В.К.Сологуб и соавт., 1979; Hinder, 1991; Halliwell, 1994).
Под влиянием аптиоксидантов у экспериментальных животных с огнестрельной раной наблюдается уменьшение распадающихся полиморфноядерньгх лейкоцитов и увеличение нейтрофильных лейкоцитов с Шик-положительными зернами гликогена, наступает активизация фибробластической реакции. Наиболее активно этот процесс протекает в глубине зоны коммоции, вблизи сосудистых элементов, причем наиболее выраженная пролиферация фибробластов отмечается при использовании эпигида и, особенно, дибунола (Г.Н.Берченко, 1997).
Однако, исследования последних лет показали, что водорастворимые антиоксиданты в лечении более эффективны, чем гидрофобные (С.Н.Чукаев, 1999), которые, к сожалению, в клинической практике применяются редко, что может быть связано с их дефицитом (Г.И.Клебанов и соавт., 2000). В связи с чем в настоящее время проводится широкий поиск и тестирование свойств и активности новых классов ингибиторов свободнорадикальных реакций и их композиций (Ю.В.Климов, 2000; М.П.Толстых, 2002). Примером таких композиций является мексидол, мексидол и трипсин, металлокомплекс меди (Cu-ТРИС), антиоксидантные.в том числе и антибактериальные свойства которых до настоящего времени не изучались и для лечения огнестрельных ран не использовались.
Цель исследования - улучшить результаты лечения огнестрельных ран путем применения нативных и иммобилизованных на текстильных носителях водорастворимых антиоксидантов и металлокомплекса меди.
Задачи исследования:
-
Изучить in vitro антимикробную активность мексидола и текстильного металлохелата - дальцекс-трипсин-медь;
-
Дать сравнительную оценку с помощью разных модельных систем окисления антиоксидантной активности мексидола и хелатного комплекса меди;
3. Экспериментально изучить влияние антиоксиданта мексидола, дальцекс-трипсин-мексидола и текстильного металлохелатного раневого покрытия дальцекс-трипсин-медь на течение раневого процесса и дать сравнительную оценку их эффективности в лечении огнестрельных ран конечностей по морфологическим данным и лазерной доплеровской флоуметрии.
Научная новизна. Впервые изучен механизм антиокислительной активности мексидола и комплексированных ионов меди в отдельности и в их смеси и при этом установлено:
мексидол является ингибитором свободнорадикальных реакций пероксидации липидов за счет его способности к перехвату свободных радикалов как в водной, так и гидрофобной фазах мембран и липопротеидов;
комплектованные ионы меди эффективно ингибируют перекисное окисление липидов мембран липосом, а в смеси с мексидолом эффективность ингибирования перекисного окисления липидов возрастает за счет независимого суммирования влияний компонентов смеси;
доказано, что мексидол и комплексированные ионы меди с трипсином обладают выраженной антимикробной активностью по отношению к большинству музейных (S.Aureus-209, E.Coli-125, Cl.Perfringer-235) и клиническим (S.Aureus, S.Epidermidis, E.Coli, P.Aeroginosa) штаммов микроорганизмов в том числе и 50% штаммов грибков Candida;
установлено, что парентеральное применение мексидола и местное использование биологически активных раневых покрытий (мексидола с трипсином и комплексированных ионов меди) ограничивают расширение вторичного некроза, способствуют очищению огнестрельных ран от микробной обсемененности и раневого детрита.
Впервые в эксперименте на основе результатов гистологических, гистохимических, микробиологических методов исследования и данных компьютеризированной лазерной доплеровской флоуметрии изучено влияние водорастворимого антиоксиданта мексидола и комплексированных ионов меди с трипсином на течение раневого процесса у крыс и собак с огнестрельными ранами.
Практическая значимость работы. Экспериментально разработано и обосновано с помощью микробиологических,
патофизиологических (лазерная доплеровская флоуметрия), морфологических (гистологический и гистохимический) методов исследований с учетом фаз раневого процесса применение водорастворимого антиоксиданта мексидола и комплексированных ионов меди с трипсином для стимуляции репаративной регенерации огнестрельных ран. Предложенный способ позволяет корректировать тактику и методы лечения животных с огнестрельными ранениями на ранних стадиях (1-3 часа) развития раневого процесса.
Апробация работы. Апробация работы проведена на заседании экспериментального и клинического отделов ГНЦ лазерной медицины МЗ РФ. Основные положения диссертации доложены на Ученом Совете ГНЦ лазерной медицины МЗ РФ.
Объем работы. Диссертация изложена на 97 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, трех глав, посвященных изложению материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы. Работа иллюстрирована 11 таблицами, 16 рисунками. Указатель литературы содержит ссылки на 78 отечественных и 34 иностранных авторов.
