Введение к работе
. .. Актуальность проблемы.. Среди вирусных агентов, участвующих в этиологии вирусных заболеваний телят с поражением респираторного и пищеварительного трактов, особая роль принадлежит вирусу вирусной диареи-болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота (ВД-БС).
Впервые, как самостоятельное заболевание, ВД-БС было установлено в США, штате Ныо-йорк в 1946 году при вспышке острой, часто со смертельным исходом, болезни крупного рогатого скота, характеризующейся диареей и эрозивными поражениями желудочно-кишечного тракта!?.Olafscm, A.McCullum, F.?ox,1946) .
В настоящее время вирус ВД-БС является обычно встречающимся патогеном в большинстве стран и вместе с еще двумя пести-вируеами - классической чумы свиней (КЧС) и пограничной болезни овец (ПБО) инфицирувт 173 вида домашних и диких жвачных животных И II ВИДОВ свиней (G.'ffellemans, E.Van Opdenbosch,1987). Имеются публикации об обнаружении антител и антигена пестиви-руса у человека, но возможность его инфицирования пока только предполагается^.Potts et al.1987, H.Glandaspero etal. 1988, C.Wilks et al. 1989, K.Yolken et al.1989).-
, Кроме антигенных вариантов и иммунрдогически различных, штаммов, возбудитель ВД-БС представлен двумя биотипами вируса (нецитопатогенный -.ЩГ и цитопатогенный - ВДЕТ1"), взаимодействие которых.в организме восприимчивых животных определяет многообразные формы течения инфекционного.процесса - от субклинического, до .тяжелой, формы, болезни слизистых с неизбежным смер-' тельным исходом. Более того, вирус вирусной диареи, вызывая у заболевших животных постоянно проявляющееся иммуносупрес-
сивноа состояние, создает располагающий фон для развития сме-т шанных инфекций, как вирусной, так и бактериальной микрофлоры.
Главным источником и резервуаром ВД-БС являются персистен-тнр инфицированные животные, которые при видимом клиническом здоровье постоянно (иммунотолерантные - в течение всей жизни) выделяют вирус, заражая восприимчивое поголовье скота (J.Baker 1987, S.Duffell et al.1985).
Поэтому многие ведущие специалисты, изучающие ВД-БС, считают, что по комплексным экономическим показателям потерь, причиняемых этой инфекцией, следует считать ее одной из важных в ветеринарии (O.Denis Ruben,J.Edwara Dubovi et al. 1987).
ВД-ВС в бывшем СССР впервые была установлена и описана К.Н.Бучневым с соавторами; В.П.Назаровым и В.Г.Макаревичем в 1967 году.
Специфическая профилактика ВД-БС во многих странах осуществляется с помощью живых и инактивированных вакцин при строгом соблюдении стратегии их применения в зависимости от.направления хозяйства (откорм, репродукция) и других особенностей, связанных с биологией возбудителя и формами течения инфекции.
Окончательный диагноз на ВД-БС, кроме обширных лабораторных исследований, требует анализа истории стада, включая! передвижение животных (приобретение,, хозяйственный обмен), учет рождения больных, слабых телят и,любых необъяснимых заболеваний или смерти .животных... Не.менее важной задачей диагностических исследований при. БД^-БС является своевременное .выявление и удаление из неблагополучного стада персистентно инфицированных животных.
Цель и .задачи исследований. Цель исследований - разрабо-. тать средства специфической профилактики ВД-БСи метод экспресс-диагностики для установления возможности его использования с целью выявления персистентно инфицированных животных.
В задачи исследований входило:
ввделить возбудитель ВД-БС и установить его патогенность для телят;
изучить физико-химические и иммунобиологические свойства вируса вирусной диареи крупного рогатого скота;
разработать сывороточный препарат и способ его применения для пассивной специфической профилактики ВД-БС и сопутствующих ей вирусных инфекций;
получить аттенуированный вирус и разработать на его основе живую вакцину против ВД-БС, испытать ее з лабораторных и производственных условиях;
разработать технологию промышленного производства вакцины ВД-БС;
.- разработать набор компонентов иммуноферменгного анализа для экспресс-диагностики ВД-БС и установить возможность его использования для выявления персистентно инфицированных животных в неблагополучном стаде.
Научная новизна. Из различных хозяйств России и стран СНГ при вспыпках инфекции от больных телят с поражениями, респираторного и пищеварительного трактов изолирован вирус вирусной -диареи-болазки слизистых оболочек-крупного-рогатого-скота, изучены его физико-химические,..биологические свойства и показана роль в этиологии этой инфекции животных.
Впервые в стране получен аттенуированный вакцинный штамм
вируса вирусной диареи, изучены его антигенные, иммуногенные свойства (Авторское свидетельство JP 1322673) и на его основе разработана живая вакцина против ВД-БС (Авторское свидетельство № 1538304).
Аттенуированный вакцинный штамм против ВД-БС использован в составе ассоциированной вакцины против респираторных заболеваний молодняка крупного рогатого скота (Авторское свидетельство № I7892I9).
Установлена высокая чувствительность диплоидного штамма эпителиальных клеток коронарных сосудов плода коров к вирусу ВД-БС крупного рогатого скота ( Авторское свидетельство № 1835849).
Разработан набор компонентов ША. для экспресс-диагностики ВД-БС и показана возможность выявления с помощью этого набора персистентно инфицированных животных.
Определены оптимальные условия к способ аэрозольного (группового) и аэроэольно-капельного (индивидуального) профилактического применения поливалентного сывороточного препарата против ВД-БС, инфекционного ринотрахеита ОРТ), парагрилпа-3 (ПГ-3) и парвовирусной инфекции (ПВИ) крупного рогатого скота.
Практическая ценность работы. Разработана и внедрена в
производство (приказ ГУБ Госагропрома СССР № 146 от 29 ноября
1988 г.) вирусвакцина сухая культуральная против вирусной ди
ареи крупного рогатого скота. Вакцина обладает выраженной про
филактической эффективностью при применении в неблагополучных
по БД-БС. хозяйствах. ., ,-...,-..-
- . Разработан и. внедряется в ветеринарную практику "Набор для диагностики вирусной диареи крупного рогатого скота мето-
дом иммуноферментного анализа". Установлена высокая чувствительность, специфичность метода и показана возможность его использования при выявлении в неблагополучном стаде персистентно инфицированных ДЦ-БС животных.
Разработана и испытана в неблагополучных хозяйствах сухая поливалентная гипериммунная сыворотка против ВД-БС, ИРТ, ПГ-3 и ПВИ для аэрозольной профилактики вирусных пневмоэнтеритов телят. Применение сывороточного препарата телятам снижает заболеваемость, смертность и позволяет получать в откормочных хозяйствах дополнительный привес в сравнении с контрольной группой животных.
Апробация работы. Основные положения диссертационной ра
боты доложены и обсуждены на заседаниях Ученых советов ВИЭВ
(1973 ... 1993 гг.) и ВГНКИ ветпрепаратов (1980 ... 1992 гг.),
на ІУ ВсесовзноЙ ветеринарной вирусологической конференции "Ак
туальные вопросы ветеринарной вирусологии" (Владимир, 1976 г.),
У Всесоюзной ветеринарной вирусологической конференции "Акту
альные вопросы ветеринарной вирусологии" (Казань, 1980 г.),
Всероссийской научно-производственной конференции "Профилакти
ка и меры борьбы с инфекционными болезнями молодняка животных"
(Москва, І993..Г.).,. научно-пролзводственной .конференции "фль-
тура клеток животных в.ветеринарии и биотехнологии". (Москва,
1993 г.), семинарах и.совещаниях ветеринарных специалистов в
павильоне--!,Ветеридария".ВДНХ.СССР. И976 ,.—1985. JT-J- Кроме
того,..материалы диссертации.вошли .а.сообщение Международного
эпизоотического бюро, которое опубликовано в 1990 году в
Париже..(3I4K „ ... .,.:_.......: ';.
Основные этапы работа оценены комиссионно с участием пред-
став"телей ВГНКИ ветпрепаратов.
Публикации результатов исследований. Основные материалы диссертации опубликованы в 23 работах, II нормативно-технических документах, утвержденных ГУВ Госагропрома СССР и ГУВ Мин-сельхоза России, четырех авторских свидетельствах и одном положительном решении ВНИйГПЭ на изобретение.
,. . Основные положения диссертационной работы, выдвигаемые для защиты:
выделение, идентификация вируса ВД-БС и воспроизведение заболевания на естественновосприимчивых животных;
оптимизация метода получения аттенуированного вакцинного
штамма ДД-БС;
оценка безвредности, реактогенности, антигенности и им-муногенности модифицированных вариантов вируса вирусной диареи;
изучение реверсибельности, стабильности и установление оптимальной иммунизирующей дозы аттенуированного варианта ВД-БС;
установление генетических признаков аттенуированного и исходного штаммов вируса - возбудителя вирусной диареи;
-, разработка.и внедрение в ветеринарную.практику вирусвак-
цины.сухой культуральной против ВД-БС, методов ее контроля и способа применения;
... - разработка .набора компонентов..Ш>А.для экспрес.Ст-диагаос-тики ВД-БС и.установление аозможности:всо использования при выявлении персистентно инфицированных животных;
- разработка метода изготовления и способа применения по-
ливалентного- сывороточного препарата для специфической пассивной профилактики заболевания телят с признаками массового поражения респираторного и пищеварительного трактов.
Объем и структура диссертации. Диссертация излокена на 299 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, вывода, практические предложения, список литературы и приложение. Работа иллюстрирована 20 таблицами, пятью рисунками и одной схемой. Список использованной литературы включает 315 источников, из них 283 иностранных. В приложении представлено 36 документов, подтверждающих наиболее важные результаты этапов исследований и их практическую ценность.
