Содержание к диссертации
Стр.
ВВЕДЕНИЕ 5
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 10
Микрофлора и токсигенность кормов 10
Пути снижения содержания микотоксинов в кормах 21
Общие мероприятия по снижению микотоксинов в кормах 21
Физические методы обезвреживания кормов, загрязненных микотоксинами 24
Химические и другие методы обезвреживания кормов 30 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 39 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 46
К Результаты исследований по обезвреживанию кормов, за
грязненных афлатоксином В1, охратоксином А и Т-2 токси
ном физическим методом 46
Результаты исследований по обезвреживанию кормов загрязненных афлатоксином В1, охратоксином А и Т-2 токсином биологическим методом 49
Результаты исследований по обезвреживанию кормов загрязненных афлатоксином В1, охратоксином А и Т-2 токсином комбинированным методом 51
Результаты исследований по обезвреживанию кормов загрязненных афлатоксином В1, охратоксином А и Т-2 токсином химическим методом 53 Изучение токсикологических свойств натрия пероксида 69
Определение острой токсичности 69
Исследования росто-весовых и гематологических показате-
лей крыс, при многократном применении натрия пероксида 74
3. Определение раздражающего действия натрия пероксида на
кожу кроликов 76
Определение остаточных количеств препарата в кормах, по
сле воздействия натрия пероксидом 77
Изучение клинических, гематологических и биохимических
показателей овец после скармливания кормов, обезврежен
ных от микотоксинов натрия пероксидом 78
1, Изучение клинического статуса овец при скармливании кор
мов, обезвреженных от микотоксинов натрия пероксидом 78
Ветеринарно-санитарная оценка качества мяса овец при
скармливании им зернофуража обезвреженного от микоток
синов натрия пероксидом 85
1. Оценка биологической полноценности мяса овец, получав
ших зернофураж обезвреженный от микотоксинов натрия пе
роксидом 88
Изучение показателей питательности пшеницы, обработан
ной 4%-м раствором натрия пероксида 89
Производственные опыты по обезвреживанию кормов от ми
котоксинов натрия пероксидом 89
Экономическая эффективность обезвреживания кормов от
микотоксинов натрия пероксидом 91
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ 93
ВЫВОДЫ 104
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 106
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 107
ПРИЛОЖЕНИЯ 130
» СПИСОК СОКРАЩЕННЫХ ТЕРМИНОВ
ВЭЖХ- высоко эффективная жидкостная хроматография
Гр - Грэй
ЛД50 - среднесмертельная доза
Л - лейкоциты
ЛА - лизоцимная активность
мг - миллиграмм
# мкг - микрограмм
НЬ — гемоглобин
П - пульс
ПДК - предельно допустимая концентрация
Т - температура
ТСХ - тонкослойная хроматография
УАС - углеаммонийные соли
ФА - фагоцитарная активность
^ ФЧ — фагоцитарное число
ХМСМ - хроматомаесспектрометрия
#
Введение к работе
Актуальность темы. Здоровье человека и животных, в значительной степени зависит от санитарного качества продуктов питания и кормов, которая, в частности определяется степенью их загрязнения различной микрофлорой (бактерии, актииомицеты, грибы и т.д.), Количество которой при благоприятных для развития условиях может достигать от нескольких сот тысяч до миллионов в 1 г продукта (1), Зерновые, пораженные микромицетами представляют большую опасность, так как грибы образуют вторичные метаболиты - мико-токсины (57, 183). Они составляют группу химических соединений, отличающихся высокой токсичностью, мутагенными, тератогенными, канцерогенными и иммуносупрессивными свойствами (208)- Микотоксины могут вызывать заболевания с различными клиническими проявлениями, зависящими от природы токсина, его количества, продолжительности поступления в организм, вида макроорганизма, его возраста и характера питания (10, 29, 31, 41, 85). Большое значение имеют виды сельскохозяйственных растений, на которых развивается токсическая культура гриба, условия внешней среды, в том числе метеорологические условия, а также соблюдение правил агротехники, четкое выполнение которых может предотвратить развитие культуры гриба (61). Как указывает их родовое наименование - эти соединения токсичны для человека и животных, вызывают заболевания, которые имеют общее название - микотоксикозы (21я 72,78, 119).
В настоящее время известно более 250 видов микроскопических грибов, продуцирующих около 300 микотоксинов (30). Наибольшую опасность представляют токсины грибов рода Fusarium, Aspergillus, РепісІИІит. К числу наиболее опасных микотоксинов относят: афлатоксины, охратоксины, зеараленон, трихотеценовые микотоксины, цитринин, патулин, треморгенные микотоксины, эрготоксины. Все они отличаются высокой стабильностью и сохраняют свою
биологическую активность в контаминироваином субстрате в течение длительного времени (133).
Из токсинов, синтезируемых наиболее распространенными в природе грибами рода Fusarium, на практике обычно оценивают содержание дезоксини-валснола (ДОН), зеараленона, Т-2 токсина и фумонизинов В| и В; (53), Из 30 микотоксинов, синтезируемых Aspergillus в сельскохозяйственной продукции определяют содержание афлатоксинов В| и Вд, а из 40 токсичных метаболитов выделяемых грибами Penicillium - содержание патулина и охратоксина А (187).
Для снижения уровня микотоксинов, содержащихся в кормах в опасных количествах, проводят их детоксикацию (121). Детоксикация кормов является трудноосуществимой задачей, так как большинство микотоксинов - устойчивые химические соединения и для их обезвреживания необходимо использование радикальных, жестких средств и методов, кроме того корма обычно конта-минированы более чем одним микотоксином (191). В настоящее время методы детоксикации подразделяются на физические, химические, биологические и комбинированные (118, 181). Одним из перспективных считают химические методы (обработка растворами сильных кислот и щелочей), среди которых интерес представляют сильные окислители. Тремасовым М.Я. и соавт. (1995, 199G) был испытан метод детоксикации кормов от микотоксинов, основанный на использовании растворов перекисей. Применение их минимизировало содержание Т-2 токсина, однако фармако-токсикологические свойства, оптимальные эффективные концентрации препаратов, обезвреживающих корма не определены, также не изучалась возможность обезвреживания кормов от афлатоксинов и охратоксинов.
Основной целью наших исследований явилось: Изыскание методов и средств обезвреживания кормов, контамииированпых несколькими различными микотоксинами одновременно, определение параметров токсичности, раздражающих и кумулятивных свойств обезвреживающего препарата - натрия гте-
роксида, изучение влияния обезвреженных кормов на клинико-гематологический статус и неспецифическую резистентность организма лабораторных и сельскохозяйственных животных. Исходя из вышеизложенного и в соответствии с тематическим планом института «Проведение исследований по разработке и освоению в условиях призводства методов и средств предупреждения и ликвидации поражений животных зкотоксикаїїтами» (№ госрегистрации 01200202603). *<* —- ^-<Ч^ ^!CJ"^^U' -^'ytfrf—ї. На решение были поставлены следующие задачи:
Изучить влияние высокой температуры (автоклавирование, проваривание) на степень обезвреживания кормов, загрязненных одновременно различными микотоксинами (афлатоксин ВІТ охратоксин А, Т-2 токсин),
Определить острую, субхроническую токсичность, раздражающие и кумулятивные свойства натрия пероксида на лабораторных животных в качестве перспективного средства обезвреживания кормов от мико-
ТОКСИНОБ.
Изучить обезвреживающее действие натрия пероксида и других препаратов при обработке загрязненных микотоксинами кормов^ определить в обезвреженных кормах остаточные количества натрия пероксида.
Провести исследование клинических, гематологических, биохимических показателей и факторов неспецифической резистентности организма овец, потребивших обработанный натрия пероксидом корм.
Научная новизна. Впервые проведена сравнительная оценка физических (тепловая обработка), биологических (ферментация), химических и комбинированных методов детоксикации кормов, загрязненных одновременно несколькими микотоксинами (афлатоксин В1? охратоксин А, Т-2 токсин), отобран препарат натрия пероксид, как перспективное, высокоэффективное средство обез-
вреживания кормов для сельскохозяйственных животных. Определена острая, субхроническая токсичность, кумулятивные свойства натрия пероксида, обоснована оптимальная концентрация препарата для обезвреживания кормов, загрязненных микотоксинами. Изучено клиническое состояние, показатели гематологического статуса и неспецифической резистентности организма овец при скармливании кормов, обезвреженных от микотоксинов.
Практическая ценность работы. На основе полученных результатов предложен (для использования в животноводстве и ветеринарии) препарат натрия пероксид для детоксикации кормов содержащих микотоксины, обоснованы его эффективные концентрации, разработан способ его применения. Результаты проведенных исследований использованы при составлении нормативно-технических документов, утвержденных начальником ГУВ КМ РТ (2002, 2003 гг.); 1) Методические рекомендации по борьбе с микотоксикозами животных в РТ. 2) Временное наставление по применению препарата натрия пероксида для обезвреживания кормов от микотоксинов.
Апробация работы. Основные материалы диссертационной работы опубликованы в материалах Межрегиональной научно-практической конференции 29-30 августа 2001г. - Барнаул» в материалах конференции ветеринарных фармакологов и токсикологов, посвященной 125-летию Н.А. Сошествен-ского 27-28 сентября 2001г. - Казань, в материалах Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии 2001г. - Казань, в материалах Всероссийской научно-практической конференции «Агроэкологическис проблемы сельскохозяйственного производства в условиях техногенного загрязнения агроэкосистем» 13-14 ноября 2001г. - Ка-зань> Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии 30-31 мая 2002 г. - Казань, в материалах международной научно-практической конференции «Новые энтеросорбенты и фармакологически активные вещества и их применение в ветеринарии и жи-
вотноводствс», посвященной 80-летию Заслуженного деятеля науки РФ, доктора ветеринарных наук, профессора М.Н. Рабиновича 26-27 июня 2002г\ - Троицк, в материалах международной научно-практической конференции 23-25 сентября 2002г. - Воронеж и в журнале «Ветеринария» №8, 2003г.
Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на
130 страницах компьютерного текста и включают введение, обзор литературы,
собственные исследования, обсуждение полученных результатов, практические
рекомендации, список литературы. Список использованной литературы содер
жит 211 литературных источников, в том числе 106 иностранных. Работа со
держит 41 таблицу. . , . л / .. .
.-—(На защиту выносятся.
Фармако-токсикологическая оценка натрия пероксида.
Сравнительная оценка физических и химических методов обезвреживания кормов ОТ МИКОТОКСИНОВн
Применение натрия пероксида для обезвреживания кормов от мико-токсинов.
