Введение к работе
Актуальность работы. Раскрытие механизмов этиопатогенеза и разработка комплекса эффективной диагностики и терапии заболеваний органа зрения у мелких домашних животных представляет одну из актуальных проблем ветеринарной медицины. Одним из часто встречающихся заболеваний у собак является генерализованная прогрессирующая атрофия сетчатки (ГПАС), сопровождающаяся развитием дегенеративных процессов в сенсорной оболочке (палочково-колбочковая дегенерация) с последующем вовлечением нейрональной сетчатки, что приводит к ее полной деафферентации. (Aguirre G., 1984; Acland G., Aguirre G., 1987; Barnett K.S., 2003; Larska М., 2003; Martin Charles L., 2005; Maggs D.J., Miller P.E., Ofri R., 2009).
Несмотря на имеющиеся исследования в данном направлении, малоизученными остаются вопросы клинической картины, факторов риска возникновения и развития генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки. В ветеринарной практике до настоящего времени отсутствуют эффективные методики комплексного лечения, с учетом наследственного генеза этой офтальмопатии (Aguirre G., Rubin L., 1971; Barnett К., 1965; Heywood R., 1970; Millichamp N., 1988; O'Toole D., 1984; Wilcock В., 1983; Dziezyc J., 2007). Задача диагностики ее многочисленных клинических проявлений не может быть решена без анализа структурного и функционального состояния сетчатки на разных этапах патологического процесса. В этой связи чрезвычайно важным и высокоинформативным является разработка алгоритма генетических исследований, позволяющего выявить тип наследования данной патологии.
В настоящие время классификация дегенерации сетчатки, в зависимости от породы и типа наследования, приведена без учета времени проявления офтальмических признаков, и результатов электроретинографических исследований. В тоже время, идентификация генов, ответственных за развитие данной патологии, обеспечит прогнозирование заболевания и наметит правильный подход к селекционной работе (Kijas J.W., Cideciyan A.V., 2002; Hamel C., 2006; Zangerl B., 2006; Acland G., 1987; Petersen-Jones S., 2005; Pitts R., 2003; Dekomien G., Epplen J.T., 2002; Maubaret C., 2005; Zangerl B., 2006).
Быстрота развития осложнений (никталопия, гемералопия, катаракта, слепота), отсутствие параллелей между клиническим течением ГПАС, данными исследований морфологического и функционального состояния структур, вовлеченных в патологический процесс, и характеризующих изменения в ткани сетчатки, результатов генетических исследований свидетельствует о необходимости комплексного изучения клинической картины заболевания в сочетании с данными показателями.
Цель работы: на основании комплексного обследования сетчатки глазного яблока разработать научно-обоснованный подход к диагностике, клинико-морфологической, электроретинографической характеристике и лечению ГПАС.
Задачи исследования:
-
Изучить факторы риска возникновения и развития генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак.
-
Выявить клинические, дифференциально-диагностические критерии генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак и изучить их прогностическую значимость, в связи с показателями электроретинографии и ретинофотографии.
-
Определить морфологические и биохимические показатели крови у собак с генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки на разных стадиях заболевания.
-
Определить концентрацию тироксина, трийодтиронина в сыворотке крови собак с генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки.
-
Изучить наследственные факторы генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак с помощью генетических тестов.
-
Изучить морфологические изменения тканей органа зрения, вовлеченных в патологический процесс при генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак.
-
Определить систему мониторинга структурно-функционального состояния сетчатки и критерии оценки терапевтической эффективности медикаментозного лечения животных с ГПАС.
Научная новизна. На основании использования комплексного методического подхода к оценке морфофункционального состояния сетчатки у собак, включающего субъективные (тест с лабиринтом, тест с шариком ваты, мигательный рефлекс) и объективные методы оценки зрительной функции (электроретинографию, ретинофотографию, ДНК – маркерные тесты) а также гистологическое исследование, изучена палочково-колбочковая дегенерация ГПАС. Установлена совокупность факторов, предрасполагающих к возникновению и развитью генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак (пол, возраст, порода, тип наследования).
На основании изучения факторов риска развития заболевания, генетических тестов и особенностей клинического течения, дана комплексная клиническая оценка и установлены дифференциально-диагностические критерии ГПАС. Показана высокая информативность использования методов ретинофотографии и электроретинографии, позволяющая достоверно оценить характер и масштабы структурно-функциональных изменений в пигментном эпителии, фоторецепторах, нейроретине, а также диске зрительного нерва. На основании анализа состояния сетчатки, определяемого использованными нами методами, представлено детализированное описание клинической картины на каждой стадии заболевания животных с данной офтальмопатией. Представлена динамика изменения электроретинограммы и ее зависимость от тяжести клинических признаков.
Впервые с использованием внутримитохондриального антиоксиданта, улучшающего трофику тканей и обладающего ретинопротективным действием, установлена возможность сохранения зрения у всех опытных животных в ближайшем (6 месяцев) и отдаленном (2-3 года) периоде наблюдения, что подтверждено данными электроретинографических и ретинофотографических исследований.
Теоретическая и практическая значимость. Дано научное обоснование оценки состояния сетчатой оболочки глаза, основанное на анализе выявленных структурных и функциональных изменений в фоторецепторном аппарате, которые затрагивают как фоторецепторы, так и остальные части сетчатки. Показано что, деструктивный процесс на начальной стадии характеризуется деформацией палочек и колбочек, распадом клеток и в конечном итоге уменьшением их количества. На средней стадии гибель нейронов, компенсируемая гипертрофией клеток Мюллера, что затрудняет доступ сетчатки к хориоидее. Это приводит к нарушению процессов метаболизма в сетчатке и ее глиальному перерождению.
Разработан алгоритм клинического исследования органа зрения, включающий офтальмоскопию, ретинофотографию, электроретинографию, субъективные методы исследования, который является высокоинформативным в диагностике генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки. Показана целесообразность использования электроретинографии и установлены нормативные параметры электроретинограммы, определяющие функциональное состояние сетчатки у здоровых и больных собак. Выявленные морфофункциональные изменения состояния сетчатки у собак являются предпосылкой прогнозирования степени тяжести течения и исхода данного заболевания.
Показана целесообразность проведения генетических исследований собак с подозрением на ГПАС, позволяющая не только выявлять патологию на ранней стадии, но и своевременно проводить грамотную селекционную работу.
Полученные результаты являются базовыми в расшифровке механизма и характера поражения сетчатки при генерализованной прогрессирующей атрофии, а также в диагностике доклинической стадии заболевания, дифференциальной диагностике патологического состояния сетчатки и разработке методов корригирующей терапии собак с данной патологией. Их целесообразно использовать при комплексном исследовании сетчатки. Материалы диссертации могут быть использованы в учебном процессе и обучении ветеринарных врачей по специализации ветеринарная офтальмология.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Классификация клинических форм течения ГПАС у собак, основанная на применении методов офтальмоскопии, ретинофотографии и электроретинографии.
2. Информативность генетического анализа, объективных методов исследования в мониторинге ранних проявлений ГПАС.
3. Электроретинография, ретинофотография и генетический анализ как основные методы диагностики генерализованной прогрессирующей атрофии сетчатки у собак, позволяющие определить критерии морфофункционального состояния сетчатки.
4. Оценка возможности терапевтической эффективности внутримитохондриального антиоксиданта «Визомитин» улучшающего трофику тканей и обладающего ретинопротективным действием, для сохранения зрения у животных.
Сведения о практическом использовании научных результатов
Полученные данные используются при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий на кафедре биологии и патологии мелких домашних, лабораторных и экзотических животных, а также на кафедре ветеринарной хирургии ФГОУ ВПО МГАВМиБ. Разработанные, в результате научных исследований, данные внедрены в ветеринарную практику. Опубликовано методическое указание «Прогрессирующая атрофия сетчатки у собак».
Апробация и публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 8 работ, из них 4 в изданиях, входящих в перечень ВАК РФ. Основные положения работы были доложены на Международной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Вопросы ветеринарной медицины и биотехнологии» Москва 2009, I Всероссийской межвузовской конференции по ветеринарной хирургии, Москва 2010, а также Международной научно-практической конференции «Адаптация и становление физиологических функции у животных» Москва 2010.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 144 страницах машинописного текста и включает разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, библиографический список.
Работа содержит 26 таблиц и 65 рисунков. Библиографический список включает в себя 153 наименований: 131 иностранных и 22 отечественных авторов.
