Содержание к диссертации
ВВЕДЕНИЕ 5
ГЛАВА 1 Современное состояние исследований по лекарственным формам с эфирными маслами, используемым в стоматологии 9
1.1 Анализ рынка стоматологических лекарственных средств 10
1.2 Характеристика гелей, применяемых в стоматологии 16
1.3 Технологические приемы, используемые для получения лекарственных форм, применяемых в стоматологии 21
1.4 Использование эфирных масел в качестве биологически активных веществ
1.4.1 Применение эфирных масел в медицине и фармации 30
1.4.2 Использование эфирных масел в стоматологической практике 31
1.4.3 Бактерицидная и фунгицидная активность эфирных масел 33
1.5 Современное состояние исследований в области технологии С02 экстрактов 36
Заключение по обзору литературы 44
ГЛАВА 2 Объекты и методы исследования 45
2.1 Объекты исследований 45
2.2 Методы исследований 5 3
Физические методы 53
Физико-химические методы анализа 54
Технологические методы исследования 55
Биологические методы исследования 57
ГЛАВА 3 Изучение состава, физических, физико-химических, химических свойств и разработка методик качественного и количественного анализа эфирных масел и СОг-экстрактов гвоздики и эвкалипта 60
3.1 Определение физических, физико-химических показателей, растворимости эфирных масел и С02-экстрактов гвоздики и эвкалипта 60
3.2 Изучение химического состава биологически активных веществ (БАВ) С02-экстракта гвоздики 62
3.2.1 Использование химических реакций для изучения состава С02-экстракта • » гвоздики 62
3.2.2 Использование метода тонкослойной хроматографии для идентификации ССЬ-экстракта гвоздики 63
3.2.3 Применение спектрофотометрического метода для качественного анализа СОг-экстракта гвоздики 66
3.3 Изучение химического состава и разработка методик идентификации эвкалиптового масла и С02-экстракта эвкалипта 68
3.3.1 Использование метода тонкослойной хроматографии для изучения химического состава эвкалиптового масла и СОг-экстракта эвкалипта 68
3.3.2 Использование спектрофотометрического метода для качественного анализа эфирного масла и СОг-экстракта эвкалипта 69
3.3.3 Использование метода газожидкостной хроматографии в качественном анализе эфирных масел эвкалипта, гвоздики и их СОг-экстрактах 70
3.4 Разработка методик количественного анализа эвгенола и цинеола в
эфирных маслах и С02-экстрактах гвоздики и эвкалипта 72
3.4.1 Количественное определение эвгенола в гвоздичном масле и СОг-экстракте гвоздики спектрофотометрическим методом 72
3.4.2 Количественное определение цинеола в эвкалиптовом масле и С02-экстракте эвкалипта методом ГЖХ...: 74
3.5 Валидационная оценка методик количественного анализа С02 экстракта гвоздики (определение эвгенола) методами СФ-метрии и ГЖХ \ 76
Выводы по главе 79
ГЛАВА 4 Исследования по разработке стоматологического геля с СОг-экстрактами
гвоздики и эвкалипта 81
4.1 Микробиологическое исследование С02-экстрактов и эфирных масел
гвоздики и эвкалипта 81
4.2 Разработка состава стоматологического геля с С02-экстрактамиЫ
4.2.1 Выбор основы 84
4.2.2 Изучение осмотической активности гелевых основ 89
4.2.3 Изучение намазывающей и прилипающей способности гелевых основ 90
4.2.4 Реологические исследования гелей 9І)
4.2.5 Корригирование вкуса геля 95
4.2.6 Добавление консервантов 96
4.3 Исследования по стандартизации и изучение стабильности геля «Дентолипт» 101
Выводы по главе 110
ГЛАВА 5 Биологическое исследование разработанной лекарственной формы - геля
«Дентолипт» 111
5.1 Изучение антимикробной активности геля «Дентолипт» с С02-экстрактами гвоздики и эвкалипта 111
5.2 Изучение фармакологической активности 1
5.2.1 Определение «острой» токсичности СОг-экстрактов гвоздики и эвкалипта методом Кёрбера 113
5.2.2 Изучение раздражающего действия геля «Дентолипт» с СОг-экстрактами гвоздики и эвкалипта 115
5.2.3 Изучение противовоспалительной активности геля «Дентолипт» с СОг-экстрактами гвоздики и эвкалипта... 115
Выводы по главе 118
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ : 119
БИБЖОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК 121
ПРИЛОЖЕНИЯ 134
Введение к работе
Актуальность темы
Одной из наиболее актуальных проблем современной стоматологии являются воспалительные заболевания пародонта, слизистой оболочки полости рта, а также пролежни при использовании съемных протезов.
В современной стоматологической практике традиционно применяется аппликационный метод лечения, заключающийся в нанесении лекарственных средств ria поверхность десен или слизистой оболочки полости рта. В настоящее время находят применение многие лекарственных формы: растворы, полоскания, порошки, пасты, мази, эмульсии, аэрозоли и др. Недостатки использования таких форм очевидны: неравномерность контакта действующих компонентов со слизистой рта, кратковременность их взаимодействия с тканями, быстрое снижение концентрации из-за разбавления слюной и вымывание лекарственных веществ в нижележащие отделы ЖКТ. В связи с этим, актуальным является разработка перспективных лекарственных форм для стоматологии в виде вязких структурированных систем - гелей, обладающих пролонгированием эффекта.
В связи с тем, что к лекарственным средствам, используемым в терапии паро-донтита, стоматита и др. предъявляются такие требования, как антибактериальная активность, противовоспалительное действие, способность нормализовать обмен, улучшать кровообращение, усиливать регенерацию тканей пародонта, необходимо проводить поиск биологически активных веществ, оказывающих комплексное воздействие. Таким требованиям отвечают, в ряде случаев, фитопрепараты, в том числе эфирные масла лекарственных растений, масляные и спиртовые экстракты.
Фитопрепараты пользуются большим спросом у населения благодаря отсутствию токсичности, мягкому действию, возможности длительного приема при высокой терапевтической активности.
Широко в стоматологии применяются лекарственные препараты, в частности, содержащие эфирные масла эвкалипта и гвоздики, обладающие бактерицидным действием в отношении стафилококков, стрептококков, кишечной и синегнойной палочки, фунгицидной активностью.
Ввиду отсутствия отечественных производств эфирных масел в России, перспективным является извлечение комплекса гидрофобных веществ из лекарственных растений экстракцией сжиженной углекислотой. Производство СОг-экстрактов освоено в ряде регионов России, но их использование пока ограничено пищевой и косметической отраслями. В тоже время они содержат большее количество биологически активных веществ с выраженным фармакологическим действием и вполне способны заменить импортные дорогостоящие эфирные масла в лекарственных средствах. Исследование С02-экстрактов эфиромасличных растений с целью получения на их основе лекарственных средств проведены И.Н. Зилфикаровым (2008). Им показана перспективность данного научного направления.
В последние годы растет популярность корригированных лекарственных форм с фитопрепаратами ввиду их несомненных эргонометрических преимуществ (И.Н. Андреева, 2000). Улучшение органолептических свойств лекарственных веществ является одним из специфических требований, предъявляемых в последние годы ко всем лекарственным препаратам. Необходимость корригирования в полной мере относится и к стоматологическим препаратам, поэтому изучение этих вопросов при получении стоматологических гелей также требует научного обоснования.
Разработка стоматологического геля, предназначенного для лечения и профилактики воспалительных заболеваний пародонта, слизистой оболочки полости рта, для адаптации к съемным протезам и расширение ассортимента за счет комбинации С02-экстрактов в составе геля представляло на наш взгляд несомненный теоретиче-ский и практический интерес.
В связи с вышеизложенным, целью настоящей работы является разработка состава, технологии и методов анализа геля с СОг-экстрактами гвоздики и эвкалипта для использования в стоматологии.
Впервые проведены комплексные физико-химические исследования СОг-экстрактов гвоздики и эвкалипта. Установлено количественное содержание эвгенола в С02-экстракте гвоздики 55,9%, против 85% в эфирном масле; цинеола в С02-экстракте эвкалипта содержится 8,1%, а в эфирном масле - 80%. Установлена минимальная инги бирующая концентрация СОг-экстракта гвоздики 500 мкг/мл, СОг-экстракта эвкалипта 1000 мкг/мл в отношении кокковой микрофлоры и бацилл.
Впервые предложена методика качественного и количественного анализа СОг-экстракта гвоздики по содержанию мажорного соединения эвгенола, СОг-экстракта эв -калипта - по содержанию цинеола с использованием газожидкостной хроматографии (ГЖХ). Хорошая воспроизводимость методики позволила использовать её для анализа действующих веществ в разработанном геле. Изучена стабильность физико-химических, химических, реологических и микробиологических показателей предложенного геля и установлены сроки его годности.
Выявлена высокая противомикробная активность разработанного стоматологического геля в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, обнаружено противовоспалительное, противоотёчное и антипролиферативное действие.
Практическая значимость результатов исследования
Проведенные комплексные химические, технологические и биофармацевтические исследования СОг-экстрактов гвоздики и эвкалипта показали возможность их использования в составе стоматологических средств.
Предложен стоматологический лекарственный препарат для лечения заболеваний полости рта на основе СОг-экстрактов гвоздики и эвкалипта и составлен проект НД, который рекомендован к внедрению в фармацевтическое производство.
Внедрение результатов исследований в практику. По результатам исследований разработаны технические условия (ТУ), технологическая инструкция (ТИ) и проект фармакопейной статьи предприятия (ФСП) на производство геля «Денто липт» в качестве средства для лечения и профилактики заболеваний полости рта, которые прошли технологическую апробацию на ООО «Явента», г. Краснодар (акт внедрения от 14.02.08. г.) и ООО «Завод Медсинтез», г. Новоуральск (акт внедрения от 15. 06.09 г). !
Основные положения, выносимые на защиту: • результаты биофармацевтических, микробиологических, химических, технологических исследований по созданию стабильного и эффективного стоматологического средства;
• итоги экспериментальных исследований по оценке качества СОг-экстрактов гвоздики и эвкалипта и конечного продукта, разработанного на их основе;
• результаты разработки технологической схемы приготовления геля «Дентолипт» с СОг-экстрактами гвоздики и эвкалипта, методик их качественного и количественного анализа;
• результаты доказательства наличия высокой фармакологической активности у разработанного лекарственного препарата с СОг-экстрактами гвоздики и эвкалипта: широкого спектра антимикробной активности, противовоспалительного и про-тивоотечного эффекта.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на: межрегиональных научно-практических конференциях по фармации, фармакологии и подготовке кадров (Пятигорск, 2002-2008 гг.).
Публикации. По результатам исследований опубликовано 14 работ, в том числе одна в журнале, рекомендованном ВАК.
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО «Пятигорская государственная фармацевтическая академия Росздрава» по проблеме «Фармация» (номер государственной регистрации 01.2.00100455).
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 133 страницах машинописного текста в компьютерном наборе, содержит 32 таблицы, 15 рисунков, список литературы, включающий 142 источника, в том числе зарубежных авторов -13. Состоит из введения, обзора литературы, главы 2, посвященной объектам и методам исследований, 3-х глав собственных исследований, выводов, списка литературы, приложений.
